随机分组:将50只KM小鼠按体质量和性别采用“均衡随机”法分成4组,每组10只,雌雄过半,50只小鼠称重,并标记。第1组为对照组,第2组、第3组以及第4组为治疗组。小鼠皮肤癌模型的建立:模型动物组小鼠皮肤上,每天1次涂含60%DMBA(二甲基苯蒽)的矿物油,直至10 d。给药剂量和给药方式:从第11天开始,对照组小鼠皮肤上,每天1次涂生理盐水。第2组每天1次涂莪术超声提取乳液、第3组每天1次涂莪术油乳液以及第4组每天1次涂莪术水提乳液。每次约0.8g左右。
2.2.3实验结果对小鼠体质量增长的影响见表2。表2莪术微乳液对细胞癌小鼠体质量的影响各组小鼠体质量均有不同程度的增加,水提组体质量增加最少,油乳组体质量增加量与荷瘤对照组比较差异显著(P<0.01)。超声组和水提组可能因为其所提取的姜黄素等活血化瘀成分,能显著降低胆固醇、脂肪酸等导致体质量变化与荷瘤对照组没有显著性差异,针对适应证,由体质量变化可以看出油乳组有利于皮肤癌的治疗。抑瘤率计算:于给药后第14天,将各组小鼠眼球采血后处死,称质量,依次用碘酊酒精消毒操作部位皮肤,于超净工作台上,以无菌操作完整剥取肿瘤皮肤,剥离干净后于电子天平称瘤体质量并按公式计算抑瘤率。抑瘤率(%)=(1-治疗组平均瘤质量/对照组平均瘤质量)×100%。表3莪术微乳液对细胞癌小鼠体质量的影响超声组、油乳组、水提组瘤质量与对照组相比差异均显著。尤其是超声组和油乳组有明显的抑制肿瘤生长作用,抑瘤率分别达32.98%和31.27%,水提组也有一定的抑瘤作用,抑瘤率达12.96%。外周血常规检测 小鼠眼球采血,血细胞自动分析仪检测血常规。表4莪术微乳液对细胞癌小鼠外周血象的影响荷瘤鼠在应用莪术微乳液后WBC、MCV均有所降低,而对RBC、HGB影响不大;超声组与荷瘤对照组相比PLT差异显著(P<0.01),油乳组与荷瘤对照组相比PLT有显著差异(P<0.05),表明莪术乳液透皮吸收有显著的抗凝血作用,即有显著的活血化瘀的作用。脾脏、胸腺指数:小鼠处理后,以无菌操作取下脾脏、胸腺,电子天平称质量并计算脏器指数。表5莪术微乳液对细胞癌小鼠免疫器官质量的影响荷瘤鼠在涂莪术样品液后胸腺指数和脾脏指数均下降,超声组与荷瘤对照组相比脾脏指数差异显著(P<0.01),油乳组与荷瘤对照组相比胸腺指数以及脾脏指数均有显著差异(P<0.05)。水提组与荷瘤对照组相比胸腺指数以及脾脏指数差异不明显。
3讨论
药效评价实验表明,针对皮肤癌的适应证莪术提取物有较好的抑瘤效果,且活血化瘀疗效显著,能改善血细胞,提高机体免疫力,故有利于皮肤癌的治疗。就适应症而言,莪术对皮肤癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、直肠癌等等都有一定程度的治疗以及辅助治疗作用,尤其是超声提取物里面含有的活血化淤类以及增强人体免疫活性类成分等在体内可以改善血液流变学参数以及增强在体对病毒性感染的抵抗能力,起到对实体肿瘤以及病毒性感染的辅助治疗作用,故超声提取物研究开发价值较大。
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