2.3 化学法 在同种异体神经移植中,与免疫排斥反应有关的是雪旺细胞和髓鞘存在的主要组织相容性复合体(MHC)。其中雪旺细胞与免疫排斥关系密切。为降低同种异体神经的抗原性,减轻移植后的免疫排斥反应,人们研究发现,化学萃取法是一种较为理想的方法,该方法具有以下优点[10~12]:①有效地清除细胞、髓鞘及崩解碎片。②保留了雪旺细胞基底板层(SCBL)。
Dument等[13]应用溶血性磷脂胆碱等化学消毒剂获得脱细胞异体神经,然后将雪旺细胞注入脱细胞神经中,制备再细胞化神经移植物。国内众多学者在此法的基础上,将异体的预变性神经和正常神经经溶血卵磷脂裂解处理后用于神经移植,得到了良好的效果。Sondell等[14]应用脱氧胆酸钠和TritonX?100处理鼠坐骨神经,可以清除所有细胞和髓鞘及其崩解碎片,同时保持了SCBL的完整。衷鸿宾等[15]在Sondell方法的基础上,发展了大型哺乳类动物周围神经化学处理方法,获得粗大和长段去细胞移植物,为向临床过渡打下了基础。但后来研究发现,Sondell法萃取异体神经在不同程度上破坏了神经基底膜管及细胞外基质结构,影响神经的再生,Hudson等[10,11]综合应用TritonX?200、SB?16和SB?20处理异体神经,较好地去除了免疫物质,避免了组织从去污剂到蒸馏水的急骤转变,减轻了Sondell法对神经基底膜的损害,保存了较完整的神经结构。有研究综合运用TritonX?100、SB?16和SB?10或综合应用TritonX?200、SB?16和SB?10萃取异体神经,均较好的解决了宿主免疫排斥问题,同时提供了较理想的促神经再生能力[16,17]。为更好的解决异体神经的免疫排斥反应,联合运用冻融法和改良化学法制备去细胞同种异体神经,明显降低了同种异体神经的抗原性,无明显排斥反应,其原理是冻融法处理后的神经其雪旺细胞和髓鞘已被去除,免疫原性已经降低,但基底膜完整,同时该法避免了神经在蒸馏水长时间浸泡引起的基底膜破坏,同时利用较温和的去污剂进一步降低了异体神经的免疫原性,并最大限度的保留了基膜管成分[18]。 3 展望
去细胞异体神经是新型生物组织工程材料,随着对脱细胞神经移植的研究,其处理方法越趋完善,优化法或冻融联合优化法解决了宿主免疫排斥问题,同时具备促进神经再生能力,但对于其抗免疫排斥和促神经再生能力的长期性及修复长段神经缺损等问题还有待进一步研究,同时目前的研究还未应用于大型哺乳类动物及临床,下一步应研究制备浓度的选择及临床应用。随着对周围神经基础理论的深入研究和生物工程技术的进一步发展,异体神经移植最终可以代替自体神经应用于神经缺损的临床治疗。
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