3.3 不同提取温度对多糖得率的影响
采用料液比为1∶20,提取时间为40 min,频率为50 kHz,考察不同温度对款冬花多糖得率的影响。结果如图3所示。结果表明,30 ℃和40 ℃提取,对多糖得率差异不大,当温度的上升50 ℃时,多糖得率从6.97%升高到11.21%。随着温度的上升,多糖分子的运动速度加快,使其更容易从款冬花细胞中提取出来,且热作用对细胞有破坏作用,使多糖更容易溶出。提取温度为60 ℃时,由于部分多糖水解,多糖得率略有下降。
3.4 不同频率对多糖得率的影响
采用料液比为1∶20,温度为30 ℃,时间为40 min。考察不同频率对款冬花多糖得率的影响,结果如图4所示。不同频率对款冬花多糖得率的影响不明显,30～70 kHz条件下,多糖的得率在8.095%～11.44%之间,频率为50 kHz时,多糖的得率最高。
3.5 最佳工艺条件的确定
根据单因素试验的结果,选择料液比(A)、提取时间(B)、提取频率(C)、提取温度(D),各个因素取3个水平,见表1。按照L9(34)进行正交试验,以多糖得率为提取效果评价指标对水提工艺条件进行优化[4],对测定结果进行直观分析,可知各因素对多糖含量的影响大小为B＞C＞D＞A,且B3＞B1＞B2,C2＞C1＞C3,D2＞D1＞D3,A1＞A2＞A3,最佳水平组合为A1B3C2D2。结果见表2。将离差平方和较小的因素A和D列合并,作为误差估计,进行方差分析,见表3。表1 因素水平表（略）表2 水提法工艺L9(34)正交试验结果(略)表3 方差分析表（略）注：F0.05(2,2)=19.00,F0.01(2,2)=99.00
方差分析结果表明因素B对多糖含量有显著影响,因素A、C、D对多糖含量无显著影响。
由直观分析和方差分析结果,得到款冬花多糖超声提取的最佳工艺条件为A1B3C2D2,即加10倍量水,40 ℃,超声提取50 min,超声频率为50 kHz。
4 讨论
先用80%乙醇提取,去除单糖、低聚糖、苷类及生物碱等干扰性成分,然后用水提取多糖类成分。超声法提取款冬花多糖不仅增加了多糖的得率,节省溶剂,而且简化了提取步骤,也避免了高温对多糖的破坏。
由表2可知,比较4个因素的极差值为B＞C＞A＞D,说明提取时间对款冬花粗多糖得率影响最大。由正交试验结果分析表可得,较优的工艺条件为B3C2A1D2,即：提取时间50 min,提取频率50 kHz,料液比为1∶10,提取温度为40 ℃。正交试验与采用单因素考察结果基本一致。单因素考察时,料液比为1∶20时多糖得率最高。而正交试验时,10倍量水的提取工艺最好。
【参考文献】
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[4] 方开泰.均匀设计与均匀设计表[M].北京：科学出版社,1994.1－35.