复方贞术调脂胶囊水提液精制方法研究(2)

2012-08-26 23:49

  2.1.4  超滤法 

  精密量取样品溶液Ⅰ 100 mL,加水稀释至药液浓度0.05 g/mL,在120 kPa压力下,采用截留分子量为50 k的超滤膜滤过,滤液浓缩并定容至250 mL,作为样品溶液Ⅳ。

  2.2  总多糖含量测定

  2.2.1  葡萄糖标准曲线的绘制  

  精密称取干燥至恒重的无水葡萄糖0.055 6 g,加水溶解并定容于50 mL量瓶中,制成每1 mL含1.112 mg的溶液,作为对照品溶液。分别精密吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL至50 mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,精密吸取上述各浓度溶液2 mL,分别加入2%苯酚溶液1 mL,摇匀,迅速加入浓硫酸5 mL,摇匀,静置5 min,至沸水浴中加热15 min,取出,快速用冷水冷却至室温。以水为空白,同样显色操作制备空白对照,于紫外可见分光光度计490 nm波长处测其吸光度。以葡萄糖毫克数为横坐标,以吸光度为纵坐标,得回归方程Y=2.8122X+0.1406,r=0.9993。葡萄糖在0.02224~0.13344 mg范围内与吸光度呈良好线性关系。

  2.2.2  供试品溶液制备 

  分别精密量取样品溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各100 mL,加乙醇使含醇量达85%,静置,滤过,滤渣分别用无水乙醇、丙酮洗涤,干燥,加水溶解并定容至25 mL,分别作为供试品溶液1、2、3、4。

  2.2.3  稳定性考察 

  精密量取供试品溶液Ⅰ 100 μL,置25 mL 刻度试管中,按“2.2.1”项下方法操作,测定吸光度,然后每隔30 min测定1次(n=6),150 min内吸光度基本不变,表明供试品在150 min内基本稳定。

  2.2.4  含量测定

  精密量取供试品溶液1、2、3、4各100 μL,置25 mL试管中,按“2.2.1”项下方法操作,测定吸光度,计算总多糖含量及转移率(见表1)。

  2.3  总酚酸含量测定

  2.3.1  供试品溶液制备[4] 

  精密量取样品溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各100 mL,调整药液浓度为0.3 g生药/ mL,离心,取上清液50 mL置已处理好的XDA?5型大孔吸附树脂柱(内径1.5 cm,长度10 cm,10 mL树脂湿法装柱)中,用2倍柱体积的水冲洗至流出液近无色,弃去水液,再用70%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,水浴蒸至近干,加水定容至20 mL,分别作为供试品溶液5、6、7、8。

  2.3.2  测定波长选择 

  分别精密吸取原儿茶醛对照品及供试品溶液0.8 mL于 20 mL量瓶中,加入0.5%亚硝酸钠溶液5.0 mL,混匀,放置 12 min,再加入10%硝酸铝溶液0.5 mL,混匀,放置12 min后,加入1 mol/mL氢氧化钠溶液5.0 mL,加水稀释至刻度,摇匀,10 min后,用紫外可见分光光度计于 300~900 nm波长范围扫描,随行试剂为空白。结果对照品和供试品在490 nm波长处有一较大吸收峰,与文献报道的一致[5]。

  2.3.3  原儿茶醛标准曲线的绘制 

  精密称取原儿茶醛对照品14.22 mg于25 mL量瓶中,加水溶解,定容至刻度,摇匀,即得。分别吸取原儿茶醛对照品溶液0.5、1、1.2、1.5、2 mL于 20 mL量瓶中,分别加入0.5%亚硝酸钠溶液5 mL,摇匀,放置 12 min后,加入 10%硝酸铝溶液0.5 mL,摇匀,放置 12 mim后,加入1 mol/L氢氧化钠溶液5.0 mL,加水稀释至刻度,摇匀, 10 mim 后,用紫外可见分光光度计于 490 nm波长处测定吸光度,以原儿茶醛毫克数对吸光度绘制标准曲线,得回归方程为:y=0.9314x-0.0666,r=0.9988。原儿茶醛在0.2844~1.1376 mg范围内与吸光度呈良好线性关系。

  2.3.4  稳定性试验 

  精密量取供试品溶液5于20 mL量瓶中,按“2.3.3”项下方法操作,每间隔10 min测定1次,测定结果表明,显色后60 min内供试品基本稳定。

  2.3.5 含量测定 

  精密量取供试品溶液5、6、7、8各100 μL,置25 mL刻度试管中,按“2.3.3”项下方法操作,测定吸光度,计算总酚酸含量及转移率(见表1)。

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