早期自然流产病人血清、胎盘绒毛和蜕膜组织中瘦素水平的测定(2)

　　1.2.3染色评分标准 以磷酸盐缓冲溶液替代一抗作为阴性对照。根据细胞染色强度和染色细胞所占百分比判断瘦素表达水平。染色强度:不染色或染色不清为0，浅黄色为1，棕黄色为2，深黄色为3。染色细胞（胞浆或胞膜中出现黄色或棕黄色颗粒）百分率:无细胞染色为0，细胞染色<25%为1，细胞染色25%～50%为2，细胞染色>50%为3。若积分之和0～1，则表达为（-），积分之和2则为（+），积分之和3～4则为（ ），积分之和5～6则为（ ）。
　　1.3 统计学处理 采用SPSS 10.0软件包对血清LP、β-hCG测量结果进行 t 检验。对LP表达数据进行Kruskal-Wallis秩和检验。
　　
　　2 结果
　　2.1 两组血清β-hCG和LP水平的比较 两组血清β-hCG水平比较差异有显著性（ t= 5.356 ，P <0.01）。两组血清LP水平比较差异有显著性（ t=9.493，P <0.01）。LP水平与β-hCG水平呈正相关（ r=0.776，P <0.05）。见表1。
　　2.2 两组胎盘绒毛及蜕膜组织中LP水平的表达 LP不论在研究组还是对照组胎盘绒毛组织中均有较高水平的表达，分别为63.3%和84.0%;对照组胎盘绒毛组织中LP的表达强度以（ ）～（ ）为主，研究组胎盘绒毛组织中LP的表达强度以（+）～（ ）为主，研究组LP表达水平明显低于对照组（ H=15.26，P <0.01）。LP在蜕膜组织中无表达。见表2。

　　表1 两组病人血清LP及β-hCG水平的比较（略）
　　表2 两组病人胎盘绒毛组织中LP的表达（略）
　　3 讨论 
　　LP是肥胖基因（Ob）的产物，参与细胞的成熟与生长，而妊娠的建立和早期胚胎发育与多种因素有关。近年来研究显示，LP对早期胚胎发育和着床过程有着重要作用。GONZALEZ等［2］发现，LP能上调在受精卵植入中起重要作用的整合素亚单位和 金属蛋白酶9的表达，有助于增加滋养细胞的侵袭力，提示LP可能以自分泌或旁分泌的方式在受精卵植入和胎盘形成过程中起着调节作用。通过逆转录聚合酶链反应技术，检测到人胎盘组织中有Ob基因mRNA的表达。来源于胎盘滋养层的细胞株JEG3和JAR有LP mRNA的表达，这些细胞可以合成和分泌人绒毛膜促性腺激素（hCG）、胎盘生乳素、孕酮等激素，因此LP也是胎盘分泌的激素，可能参与胎儿生长发育的调节［3］。免疫组化研究表明，LP存在于胎盘合体滋养层细胞的胞浆中，而在基质、绒毛膜和血管内皮细胞中均检测不到LP，证明胎盘合体滋养层细胞系产生LP的部位［4］。本研究也证实，LP不论在研究组还是对照组胎盘绒毛组织中均有较高水平的表达，但研究组中LP的表达强度和水平均低于对照组。LP在蜕膜组织中无表达。流产的发生被认为主要与异常发育的胎儿-胎盘单位有关，LP在其中的作用主要为:①LP作为细胞因子，可以通过影响胎儿-胎盘单位内的其他细胞因子之间的平衡来影响妊娠结局;②LP也可以影响细胞滋养细胞的功能，增加其hCG的合成与基质金属蛋白酶的分泌，有助于增加滋养细胞的侵袭力;③LP还具有血管生成活性，可通过影响胎盘血管丛的生成影响胎儿发育［5］。有研究证明，孕妇流产前的血中LP含量明显低下，而流产后24 h母体血中LP的含量与正常分娩后24 h的母体LP含量相似，说明孕妇血中LP含量下降是流产的标志，孕妇血中LP不足的重要原因是胎盘分泌LP能力降低。本研究也表明，对照组妇女的血清LP水平明显高于研究组，并且与β-hCG水平呈正相关;研究组胎盘绒毛组织中LP水平表达明显低于对照组，推测由于合体滋养细胞LP分泌减少，影响hCG的合成和基质金属蛋白酶的分泌，阻碍了滋养层细胞对子宫内膜的侵入和胚胎的发育，可能导致流产的发生。由于LP的表达受多种激素、生长因子和细胞因子影响，且它们之间相互调节，协调完成胚胎的发育和着床，因此，LP在自然流产中的作用机制仍有待于进一步研究证实。
　　［参考文献］
　　［1］ LAIRD S M， QUINTON N D， ANSTIE B， et al. Leptin and leptin-binding activity in women with recurrent miscarriage:correlation with pregnancy outcome［J］. Hum Reprod， 2001，16（9）: 2008.