(a)是松弛复制型 (b)具有四环素抗性
(c)能被氯霉素扩增 (d)能产生肠杆菌素 7. Mu噬菌体也是一种转座元件，这种转座元件( ) (a)可引起寄主的突变 (b)可用于细胞内的基因工程 (c)具有转座酶基因
(d)以上说法都正确
8. 在分离mRNA的溶液中，Mg2+离子的浓度不能低于0．5mmol／L，因为低了，( ) (a)mRNA会降解 (b)mRNA会沉淀
(c)核糖体解体 (d)mRNA会变性 9. 在cDNA技术中，所形成的发夹环可用( ) (a)限制性内切核酸酶切除 (b)用3’外切核酸酶切除 (c)用S1核酸酶切除
(d)用5’外切核酸酶切除 10. 当用过量的RNA与有限的DNA杂交时，( ) (a)所有的RNA杂交 (b)所有的DNA杂交 (c)50％的RNA杂交 (d)50％的DNA杂交
(e)没有RNA杂交，所有的DNA复性为双链DNA 二、判断题（每题1分，共计10分）
1． 病毒的遗传因子可包括1到300个基因。与生命有机体不同，病毒的遗传因子可能是
DNA或RNA(但不可能同时兼有!)，因此DNA不是完全通用的遗传物质。 ( ) 2.切口移位法(nicktranslation)只能标记线性双链DNA不能标记环状双链DNA. ( ) 3.通过差示杂交后制备的CDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞表达基因的几率大为提高。 ( ) 4．如果PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA都加了一倍，那么，10个循环就扩增了1000倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍. ( ) 5． M13噬菌体每个世代裂解宿主后，可释放100个子代噬菌体。 ( )
6. 某一染色体DNA经内切酶SalI切割后，产生了若干个具有黏性末端的DNA片段，将这些片段分别在T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导人受体细胞，都可以进行独立地复制。 ( ) 7. DNA聚合酶I有三种酶活性，其中3，-*5，外切核酸酶的活性在较多的dNTP存在下，常被5，--*3，合成酶的活性所掩盖。 ( ) 8. 同一种限制性内切核酸酶切割靶DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。 ( ) 9. DNA修复的第一步是由专用于修复过程的酶催化的，下面的步骤由DNA代谢过程中的常用酶催化。 ( ) 10.拓扑异构酶I之所以不需要ATP来断裂和重接DNA链，是因为磷酸二酯键的能量被暂时贮存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。 ( ) 三、填空（每空1分，共计20分）
1． 基因克隆中三个基本要点是：—---------—；—--------------—和—----------—。
2． Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小．一般在20～40kDa，通常由—-----—亚基所组成。
它们的作用底物为双链DNA，极少数Ⅱ类酶也可作用于单链DNA，或DNA／RNA杂合双链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，Ⅱ类酶既具有—-------—专一性，也具有——------专一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有--------—，产生末端的DNA片段或—----—的DNA片段。作用时需要---------作辅助因子，但不需要—------—和--------——。 3． A聚合酶与Klenow酶一样，具有5’→3’聚合酶和3’→5’外切酶两种活性，但是它的
3’→5’外切酶的活性比Klenow酶强—----—倍。该酶的3’→5’外切活性既能作用于单链DNA也能作用于双链DNA，不过作用于————二链的活性要强于—---—链。 4． 如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则属于-----——群，这是因为它
们的——————————所致。 5.野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是—------------—、—---------—和—--------------—。
6. 如果DNA聚合酶出现错误，会产生一对错配碱基，这种错误可以被一个通过甲基化作用来区别新链和旧链的特别—------—系统进行校正。 四、简答题（每题3分，共计30分）
1.溶菌酶是破碎细菌细胞的有效方法。但有些细菌的孢子对溶菌酶不敏感，应该如何处理? 2.前体mRNA剪接体的催化中心是什么?它是如何形成的?有什么证据可以证明这个模型? 3.什么是转录起始前复合体?
4.举例说明单链核酸中形成茎环结构的重要性。 5. 跳跃复制的结果是什么? 6. 一个复合转座子和一个IS元件之间的关系是什么?
7. 说明因RNA聚合酶—启动子不同的相互作用如何导致不同基因的转录。 8. 为什么吖啶类染料诱导的突变较碱基类似物诱导的突变对生物体更有害?
9. 曾经认为DNA的复制是全保留复制，每个双螺旋分子都作为新的子代双螺旋分子的模板。如果真是这样，在Meselson和Stahl的实验中他们将得到什么结果? 10.在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中―G‖的百分含量? 五、设计分析题（每题5分，共计10分）
1.当lacZ-或lacY-突变体生长在含乳糖的培养基上时，lac操纵子中剩余的基因没有被诱导，解释是何原因。
2. MS2噬菌体含有一单链的RNA，既是染色体又作为信使。下面是编码蛋白质外壳基因开始的一段序列及蛋白质外壳相应的N端氨基酸序列：
密码 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
核苷酸AUG GCU UCU AAC UUU ACU CAG UUC GUU CUC…
氨基酸 Ala --Ser --Asn –Phe --Thr –Gin -Phe -Val -Leu… (1)为什么蛋白外壳的N端没有甲硫氨酸残基? (2)下列的突变将会对蛋白外壳的氨基酸组成有何影响? ①密码4中缺失一个A。 ②密码4中的C缺失。 ③密码6中的U被G替代。
④密码6中的A被G替代。 六、问答题（10分）
什么是摇摆假说?
《基因工程》试题库（六）
一、选择题（单选或多选） （每题2分，共计20分） 1. 关于cDNA的最正确的提法是：( ) (a)同mRNA互补的单链DNA (b)同mRNA互补的双链DNA (c)以mRNA为模板合成的双链DNA
(d)以上都正确
2. EcoRI切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要( )。 (a)用65℃处理5～10分钟使限制性内切核酸酶失活 (b)用CIP处理载体DNA防止自身环化 (c)进行琼脂糖凝胶电泳监测
(d)上述说法都正确 3. 报告基因( )
(a)以其易于分析的编码序列代替感兴趣基因的编码序列 (b)以其易于分析的启动子区代替感兴趣基因的启动子区 (c)能用于检测启动子的活性
(d)能用于确定启动子何时何处有活性 4. DNA分子中的超螺旋：( )
(a)仅发生于环状DNA中。如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后(即增加缠绕数)才 闭合，则双螺旋在扭转力的作用下，处于静止
(b)在线性和环状DNA中均有发生。缠绕数的增加可被碱基配对的改变和氢键的 增加所抑制
(c)可在一个闭合的DNA分子中形成一个左手双螺旋。负超螺旋是DNA修饰的前 提，为酶接触DNA提供了条件
(d)是真核生物DNA有丝分裂过程中固缩的原因
(e)是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的总和 5. 锤头型核酶：( )
(a)是一种具有催化活性的小RNA
(b)需要仅含有17个保守核苷酸的二级结构 (c)不需要Mg2+协助
(d)可用两个独立的RNA创建锤头型核酶 6. 标出下列所有正确的答案： ( )
(a)转录是以半保留的方式获得两条相同的DNA链的过程 (b)DNA依赖的DNA聚合酶是负责DNA复制的多亚基酶 (c)细菌转录物(mRNA)是多基因的
(d)σ因子指导真核生物的hnRNA到mRNA的转录后修饰
(e)促旋酶(拓扑异构酶Ⅱ)决定靠切开模板链而进行的复制的起始和终止
7.σ因子专一性表现在： ( )
(a) σ因子修饰酶(SME)催化σ因子变构，使其成为可识别应激启动子的σ因子 (b)不同基因编码识别不同启动子的σ因子 (c)不同细菌产生可以互换的。因子 (d) σ因子参与起始依靠特定的核心酶
(e) σ因子是一种非专一性蛋白，作为所有RNA聚合酶的辅助因子起作用 8. 关于在TnlO转座子上dam甲基化效应的陈述哪些是对的?( ) (a)在IS1OR反向重复序列上，一个位点的甲基化可以阻断转座酶的结合 (b)PIN中的一个位点被甲基化可以刺激转座酶的转录 (c)TnlO转座在dam-突变中增加1000倍
(d)复制后甲基化位点立即半甲基化，允许转座酶表达和作用 9. 下列哪些基因组特性随生物的复杂程度增加而上升?( ) (a)基因组大小 (b)基因数量
(c)基因组中基因的密度
(d)单个基因的平均大小 10. 下列关于VSG基因转录活性的叙述是正确的有：( ) (a)只有在表达位点的VSG基因被转录
(b)ELC(expression linked copy)总是位于端粒附近
(c)将内部的VSG基因拷贝复制到表达位点可以改变表达位点的VSG基因 (d)不需经过基因复制，端粒附近的VSG基因就可以被激活
(e)少数情况下，通过不同的VSG基因拷贝在表达位点组装可以产生一个新的VSG基因
(f)以上都正确 二、判断题（每题1分，共计10分）
1． 在有丝分裂中，端粒对于染色体的正确分离是必要的。 ( ) 2． TnA家族的转座子通常转移三种基因：转座酶、解离酶和氨苄抗性基因。 ( ) 3． 追踪有外壳病毒的一个生活周期就等于游历整个细胞。 ( ) 4． 线粒体DNA的复制需要使用DNA引物。 ( )