割。与试管婴儿不同的是该技术属于无性生殖。(3)预防排斥反应需要服用免疫抑制药物；利用基因工程手段可以除去抗原决定基因，再利用克隆技术培育出没有免疫排斥反应的猪器官；培育转基因猪的核心步骤是基因表达载体的构建。
5．吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛“织女”，其过程如下，请据图回答问题。
(1)克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有：____________________________________________________ (至少答出两项)。
(2)实施基因工程包括四个基本操作步骤，其核心步骤是__________________。在这一过程中处理目的基因和载体的限制酶一般是同一种，目的是_____________________________ ___________________________________________。
(3)从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行_____________ ___________________________________________________________。
把⑤送入⑥孕育形成⑦之前，对⑥的处理方法和目的是____________________________。 (4)⑦可通过分泌乳汁来生产人类所需药物，这类转基因动物被形象地称为“_____________”。为取得生产效率，在早期胚胎培养时可以对要移植的胚胎提前进行________鉴定。
答案 (1)核移植技术、动物细胞培养、胚胎移植 (2)基因表达载体的构建 切割后形成相同的黏性末端 (3)胚胎分割 注射孕激素以使⑥与供体处于相同的生理状态 (4)乳腺生物反应器 性别
解析 (1)从图示可看出该流程涉及的生物技术有：核移植技术、动物细胞培养，早期胚胎培养、胚胎移植等。(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，用同一种限制酶切割后得到的黏性末端相同。(3)胚胎分割可获得一卵双胎或一卵多胎。(4)通过分泌乳腺来生产人类所需药物，这类转基因动物被形象地称为“乳腺生物反应器”。为保证⑦是雌性，在进行胚胎移植之前可以取滋养层细胞进行性别鉴定。
6．(2014·福建，33)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的__________。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的________________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有______________ 酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的__________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
答案 (1)细胞核 (2)囊胚 (3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白质
解析 (1)动物细胞核移植技术是将体细胞核移入去核的卵母细胞中。(2)囊胚期细胞开始出现分化，分化为滋养层细胞和内细胞团，内细胞团细胞(即ES细胞)具有发育的全能性。(3)利用PCR技术扩增目的基因时需要设计引物，引物是目的基因的一段核苷酸序列。基因工程中所用表达载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶的酶切位点，而Rag2基因是用HindⅢ和PstⅠ限制酶切割获得的，所以所选择的表达载体上应具有HindⅢ和PstⅠ限制酶的酶切位点。(4)基因表达的产物是蛋白质，可利用抗原—抗体杂交原理检测Rag2基因的表达情况。 7．加拿大科学家通过转基因山羊已经生产出重组的人类丁酰胆碱酯酶，该酶可以用于对抗生化武器。如图是转基因山羊的培育过程示意图，请据图回答问题(山羊为二倍体)：
(1)在上述操作中，目的基因是______________________基因，将该基因表达载体导入受体细胞常用的方法是____________法。
(2)胚胎工程是指对动物的早期胚胎或______________所进行的多种显微操作和处理技术。 (3)从雌性山羊卵巢内获取的卵母细胞需要培养到________期才能完成受精作用，此时细胞中的染色体组数是________。为了获得更多的卵母细胞，往往需要向雌性山羊体内注入________激素。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和________________。 (4)要同时获得多只与此转基因山羊遗传物质相同的小羊，可对囊胚进行______________ __________________________________________________________。 (5)下列不属于生物武器特点的是________。 A．致病力强，传染性大 B．污染面积大，危害时间长 C．有潜伏期，传染途径多 D．造价高，技术难度大
答案 (1)丁酰胆碱酯酶 显微注射 (2)配子 (3)减数第二次分裂中 1 促性腺 卵细胞膜
反应 (4)胚胎分割 (5)D
解析 (1)根据题意，是利用转基因山羊生产人类丁酰胆碱酯酶，所以丁酰胆碱酯酶基因是目的基因；由于受体是动物，故将目的基因表达载体导入受体细胞常用的方法是显微注射法。(2)根据胚胎工程的概念，它是指对动物的早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。(3)从山羊体内获取的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才具有受精能力；由于山羊是二倍体生物，减数第一次分裂结束时，细胞中染色体和染色体组数目减半，故此时细胞中染色体组数目是1个；为了获得更多的卵母细胞，可通过注射促性腺激素的方法促进雌羊超数排卵；受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。(4)要同时获得多只遗传物质相同的小羊，可在囊胚期进行胚胎分割。(5)生物武器的特点是致病力强，传染性大、污染面积大，危害时间长、有潜伏期，传染途径多。
8．如图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答下列问题：
(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至________期的内细胞团或胎儿的________________ ______中分离得到的一类细胞。
(2)图中分化程度最低的干细胞是________________。在体外培养条件下，培养液中加入____________因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
(3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因______________________的结果。 (4)某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的。骨髓移植的实质是将上图中的________细胞移植到患者体内。
(5)若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞、皮肤细胞、神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的________，其原因是__________________________。 答案 (1)囊胚 原始性腺细胞 (2)胚胎干细胞 分化诱导 (3)选择性表达 (4)造血干 (5)红细胞 细胞中无细胞核
解析 (1)胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，囊胚阶段细胞开始分化为内细胞团或滋养层细胞。(2)图中分化程度最低的干细胞是胚胎干细胞，全能性最高，在体外培养条件下，该种干细胞可诱导分化形成不同类型的组织细胞，培养液中加入分化诱导因子。(3)细胞分化是细胞中基因选择性表达的结果。(4)骨髓是人体的造血组织，存在造血功能干细胞，骨髓移植的实质是将题图中的造血干细胞移植到患者体内。(5)克隆某种哺乳动物需要供体提供细胞核，而成熟的红细胞没有细胞核，所以不能作为供体。
9．一青年农民利用自己学习的生态学知识，在自家庭院里建了一个小型生态农业，年创收上万元。下图是该家庭生态工程的模式图，请据图分析回答问题。
(1)从图中可知，人类生活中所需的能源来自于太阳能、沼气等。利用这些能源与利用煤炭相比，突出的优点是________________________________________________________。 (2)该生态工程中的能量能够更多地被人类利用，原因是________________________ ________________________________________________________________________。 (3)生态工程建设的目的就是遵循自然界____________的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展。与传统工程相比较，生态工程具有____________________________的特点。
(4)人类设计生态工程的根本目标：在促进自然界良性循环的前提下，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展。生态工程所遵循的基本原理是________________、________________、协调与平衡原理以及________________、系统学和工程学原理。
(5)据生态工程中的物种多样性这一原理，有人认为生态农业建设中，应使食物链和营养级越长越多越好，你是否支持这一观点？________。
答案 (1)减少了燃烧煤炭所产生的污染 (2)充分利用了废弃物中的能量，实现了能量的多级利用 (3)物质循环 少消耗、多效益、可持续 (4)物质循环再生原理 物种多样性原理 整体性原理 (5)否
解析 (1)该生态农业减少了燃烧煤炭所产生的污染。(2)该生态工程充分利用了废弃物中的能量，实现了能量的多级利用，使能量能够更多地被人类利用。(3)生态工程建设的目的就是遵循自然界物质循环的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益的同步发展。生态工程的特点是少消耗、多效益、可持续。(4)生态工程遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理。(5)由于食物链越长，营养级越多，则能量损耗越多，不能充分利用能量。