核酸和蛋白质序列分析(4)

2021-01-20 09:27

6、基因上游调控区分析

(1)启动子预测:推荐使用冷泉港开发的FIRSTEF程序

(http://www.77cn.com.cn/tools/FirstEF/)进行启动子预测。用RT-PCR等实验方法获得的mRNA往往缺少完整的5’端,采用FirstEF 程序可以对第一外显子(尤其是非编码的第一外显子)和CpG相关启动子进行预测。

方法:以FastA格式输入起始密码子上游序列。

(2)转录因子结合位点分析:推荐使用TFSEARCH程序

(http://www.cbrc.jp/research/db/TFSEARCH.html)及MATCH程序

(http://www.77cn.com.cn/pub/programs.html#match)对转录因子数据库TRANSFAC(http://transfac.gbf.de/TRANSFAC/)进行搜索,寻找可能的转录因子结合位点。

方法:输入起始密码子上游序列。结果将给出很多可能的转录因子结合位点,注意选择其中分值较高的位点。

(二) 蛋白质序列分析

1、跨膜区预测

各个物种的膜蛋白的比例差别不大,约四分之一的人类已知蛋白为膜蛋白。由于膜蛋白不溶于水,分离纯化困难,不容易生长晶体,很难确定其结构。因此,对膜蛋白的跨膜螺旋进行预测是生物信息学的重要应用。

推荐使用TMHMM软件(http://www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/)对蛋白进行跨膜预测。TMHMM综合了跨膜区疏水性、电荷偏倚、螺旋长度和膜蛋白拓扑学限制等性质,采用隐马氏模型(Hidden Markov Models),对跨膜区及膜内外区进行整体的预测。TMHMM是目前最好的进行跨膜区预测的软件,它尤其长于区分可溶性蛋白和膜蛋白,因此首选它来判定一个蛋白是否为膜蛋白。所有跨膜区预测软件的准确性都不超过52%,但86%的跨膜区可以通过不同的软件进行正确预测。因此,综合分析不同的软件预测结果和疏水性图以获得更好的预测结果。

方法:输入待分析的蛋白序列即可。

2、信号肽预测


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