流式细胞仪的原理和临床应用(3)

2021-01-20 16:23

鄄代医学仪器与应用2008年第20卷第1期Modeical

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呈正相关。NK细胞反映机体对病毒感染的细胞和肿瘤细胞的杀伤能力及巨噬细胞的杀菌活性。

2.3在肿瘤学方面的应用

利用FCM可以进行细胞周期分析,DNA倍体分析,定量分析检测细胞增殖标志物、细胞表面标志、癌基因蛋白产物、耐药蛋白、细胞凋亡等,从而获得组织形态学方法难以得到的信息,可为肿瘤的临床诊断、治疗、预防和预后提供帮助【堋。DNA非整倍体的出现可能是发生早期癌变的一个重要指标。在淋巴瘤、白血病在病理形态学还不能进行早期诊断之前,FCM可以提供确切的诊断信息。流式细胞术对淋巴瘤的早期诊断比形态学的更为敏感、准确。DNA非整倍体的交界瘤应按恶性肿瘤对待.形态学表现为良性的肿瘤出现非整倍体提示有恶性转变的可能。FCM主要是利用实体瘤标本或穿刺标本、胃镜、食管镜及支气管镜、肿瘤冲洗液、尿液等少量组织进行DNA含量测定,进行包括癌前病变及早期癌变的检出.从而为临床辅助诊断和进一步治疗如放疗中的药物选择、强度、时间等提供较确切、可靠的信息。

2.4在器官移植中的应用

实体组织和骨髓的移植已广泛应用于临床医学的疾病治疗中。而流式细胞术在移植前后为同种异体移植的受者提供了一个较传统方法更为灵敏的监控

方法。主要包括两个方面【1习。①检测受者血清中是否存

在抗供者的anti—HLA抗体。流式细胞术应用之前,检测抗供者的anti—HLA抗体主要通过补体依赖性细胞毒交叉配型实验(complement—dependent

cytotoxicity

crossmateh,CDCXM)。尽管CDCXM阳性对于一些急进型排斥反应有一定价值,但CDCXM阴性却不能确认抗体存在和保证移植物的长期存活。而流式细胞术配型实验(floweytometriccrossmatch.FCXM)与CD.CXM相比,有很大的优越性。FCXM亦可多参数分析。区别出哪群淋巴细胞亚型是阳性(T淋巴细胞或B淋巴细胞)的,同时识别特异抗体的种型(IgG或IgM)。FCXM检测移植抗体的结果同CDCXM相比。有更好

的灵敏度,所以在临床有了越来越多的应用。②监测

移植期间受者的免疫状态。移植后病人仍面临着细胞介导的移植物排斥反应的问题。移植后病人免疫球蛋白及CD47CD8q"淋巴细胞比值的监控,是在移植物

出现明显损伤前早期预测排斥反应的重要方法。3临床流式细胞分析发展趋势

3.1从相对细胞计数到绝对细胞计数

T淋巴细胞亚群的绝对计数在国外实验室早已成为常规检查。而国内仅有少数实验室开展。流式细胞

绝对计数在临床可开展的项目包括:①淋巴细胞亚群,尤其是T淋巴细胞亚群的绝对计数;②外周血或骨髓中造血干细胞的绝对计数;③血液中网织红细胞的绝对计数;④血液中血小板数量,尤其是血小板减

少症病人的血小板的绝对计数.此种计数优于血细胞分析仪法,已成为血小板计数的国际推荐参考方法。此外,可能出现在血液中的其他一些稀少细胞(如内皮细胞、转移的肿瘤细胞等)的计数,也将发展为流式细胞绝对计数。流式细胞绝对计数的开展对临床疾病的诊断、治疗等有重要意义。

3.2细胞内成分分析

随着近年来细胞内成分检测技术的不断完善,细胞内成分检测已成为流式细胞分析的又一个热点。细胞内成分分析能反映某些细胞的系列特征和功能变化。例如。急性髓系白血病性原始细胞浆中检测到髓过氧化物酶(MPO)是最为准确的系列标志【lq。胞内细胞因子染色与传统的检测可溶性蛋白的方法如ELISA相比。具有显著优越性。该法从单个细胞水平检测多个细胞因子的同时,还可标记各种细胞表面分化抗原以及活化分子、趋化因子受体和黏附分子等,从而区分表达特定细胞因子的细胞亚群及其表型特征f171。根据细胞内细胞因子产生的不同。CD4叮淋巴细胞可分为和11h2两个功能不同的独立亚群。Thl细胞主要分泌IL-2、IFN一^r和TNF—Q等,介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答,参与细胞免疫及迟发型超敏反应.在抗胞内病原菌感染中发挥重要作用;Th2细胞主

要分泌IL4、IL一5、IL-6和IL一10,主要功能是刺激B

淋巴细胞增殖并产生抗体,与体液免疫有关【1蜘。

3.3多色荧光分析

三色或四色流式细胞仪已常规应用于临床检验中.随着新的荧光色素分子的不断发现,荧光标记技术的进步和流式细胞仪的多激光激发等技术的进展,多色荧光分析得到迅速发展。五色或六色甚至更多颜

111l


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