检验生化
E.以上都不对
(12)摆动配对指下列碱基之间配对不严格
A.反密码子第一个碱基与密码子第三个碱基 B.反密码子第三个碱基与密码子第一个碱基
C.反密码子和密码子的第1个碱基 D.反密码子和密码子的第三个碱基 E.以上都不对
(13)核蛋白体是合成产物,下列哪种成分不直接参与其合 成?
第十二章 蛋白质的生物合成—翻译 单项选择题
(1)与mRNA密码子ACG相对应的tRNA反密码子是 A.UGC B.TGC C.GCA D.CGU E.CGT (2)翻译的产物是
A.多肽链 B.tRNA C.mRNA D.rRNA E.DNA (3)在大肠杆菌的多肽链合成中,其氨基端的氨基酸残基是 A.蛋氨酸 B.丝氨酸 C.N-甲酰蛋氨酸 D.N-甲酰丝氨酸 E.谷氨酸
(4)蛋白质合成中,有几个不同的密码子能终止多肽链延长 A.一个 B.二个 C.三个 D.四个 E.五个 (5)生物体编码20种氨基酸的密码个数为 A.16 B.61 C.20 D.64 E.60 (6)肽链合成的延伸阶段不需要下列哪种物质
A.转肽酶 B.GTP C.蛋白质性质的因子
D.甲酰蛋氨酰-tRNA E.mRNA (7)关于遗传密码的叙述哪一项是正确的
A.由DNA链中相邻的三个核苷酸组成 B.由tRNA结构中相邻的三个核苷酸组成
C.由mRNA上相邻的三个核苷酸组成 D.由rRNA中相邻的三个核苷酸组成
E.由多肽链中相邻的三个氨基酸组成
(8)蛋白质生物合成中每延长一个氨基酸消耗的高能磷酸键数
A.5 B.2 C.3 D.1 E.4
(9)真核生物欲合成一个由100个氨基酸组成的以亮氨酸为N末端的蛋白质,在其他条件都具备的情况下需消耗的高能磷酸键最小数量为
A.200 B.201 C.303 D.400 E.402 (10)操纵子调节系统属于哪种水平的调节
A.复制水平 B.转录水平 C.翻译水平 D.反转录水平 E.以上都不是 (11)rRNA
A.是蛋白质生物合成的场所 B.属细胞内最少的一种RNA
C.与多种蛋白质形成核蛋白体 D.不含有稀有碱基
A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶 C.tRNA?D.mRNA E.核蛋白体
(14)AUG是蛋氨酸唯一的密码子,下列哪项可说明其重要性
A.30s核蛋白亚基的结合位点 B.tRNA的识别位点 C.肽链的释放因子
D.肽链合成的终止密码子 E.肽链合成的起始密码子
(15)下列哪一种反应需要GTP
A.肽在核蛋白体上的合成? B.肽从多核蛋白体上的释放
C.氨基酰-tRNA合成酶对氨基酸的活化 D.精氨酰-tRNA合成酶对精氨酸的活化 E.多核蛋白体亚单位的生成
(16)在蛋白质合成中,哪一步不需消耗高能磷酸键 A.转肽酶催化形成肽键?B.氨基酰-tRNA与核蛋白体的受位结合 C.移位 D.氨基酸活化
E.N-甲酰蛋氨酰-tRNA与mRNA的起始密码的结合以及大、小核蛋白体亚基的结合
(17)细菌 蛋白的翻译过程包括①mRNA,起始因子,以及核蛋白体亚基的结合; ②氨基酸活化;③肽键的形成;④肽酰-tRNA易位;⑤GTP,延长因子以及氨基酰-tRNA 结合在一起等步骤.它们出现的正确顺序是
A.1,5,2,3,4 B.2,1,5,3,4 C.5,1,2,4,3 D.2,1,5,4,3 E.1,5,2,4,3
(18)能出现在蛋白质分子中的下列氨基酸哪一种没有遗传密码
A.色氨酸 B.蛋氨酸 C.羟脯氨酸 D.谷氨酰胺 E.组氨酸?
(19)蛋白质生物合成中多肽链的氨基酸排列顺序取决于? A.相应tRNA的专一性? B.相应氨基酰-tRNA合成酶的专一性?
C.相应tRNA上的反密码子? D.相应mRNA中核苷酸排列顺序?
E.相应rRNA的专一性?
(20)下列关于氨基酸密码子的描述哪一项是错误的?? A.密码子有种属特异性，所以不同生物合成不同的蛋白质
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检验生化
?
B.密码子阅读有方向性，从5′端起始，3′端终止? C.一种氨基酸可有一组以上的密码子?
D.密码子第1，2位碱基与反密码子的第3，2位碱基结合严格按照碱基互补原则?
E.密码子第3位碱基在决定掺入氨基酸的特异性方面重要性较小?
(21)人体内不同细胞能合成不同以蛋白质是因为? A.各种细胞的基因不同? B.各种细胞的基因相同，而表达基因不同?
C.各种细胞的蛋白酶活性不同? D.各种细胞的蛋白激酶活性不同?
E.各种细胞的氨基酸不同? (22)氯霉素可抑制?
A.DNA复制 B.RNA转录 C.蛋白质生物合成?
D.生物氧化呼吸链 E.核苷酸合成? (23)利福平和利福霉素抑制结核菌的原因是?
A.抑制细胞的RNA聚合酶 B.抑制细菌的RNA聚合酶?
C.抑制细胞的DNA聚合酶 D.抑制细菌的DNA聚合酶? E.抑制细菌的RNA转录的终止? (24)形成镰刀状红细胞贫血的原因是?
A.缺乏维生素B12? B.缺乏叶酸? C.血红蛋白β链N末端缬氨酸变成了谷氨酸?
D.血红蛋白β链基因中CTT变成了CAT?E.血红蛋白β链基因中的CAT变成了CTT 2.多项选择题
(1)蛋白质生物合成需要
A.mRNA B.转肽酶 C.核蛋白体 D.ATP (2)关于翻译哪些叙述正确
A.三联体密码编码一个氨基酸 B.终止密码指令肽链合成终止
C.密码的第三个核苷酸较前两个具有较小的专一性 D.一个以上的密码子可以编码一种氨基酸 (3)氨基酰tRNA合成酶 的作用是
A.使氨基酸活化 B.对氨基酸识别无专一性,对tRNA的识别有专一性
C.促使相应的tRNA与活化氨基酸连接
D.精氨酸可由6种tRNA携带,因此要求有6种氨基酰tRNA合成酶催化
(4)蛋白质合成具有下列特征:
A.氨基酸必需活化? B.每延长一个氨基酸,都必须经过“进位-转肽-移位”
C.肽链由N端向C端不断延长?D.新生肽链需加工才能成为活性蛋白质
(5)转肽酶的功能有
A.识别mRNA上的密码子 B.水解肽酰?tRNA释放肽链
C.识别终止信号 D.催化肽键形成 (6)直接参与蛋白质生物合成的核酸有
A.mRNA B.tRNA C.rRNA D.DNA (7)终止因子在多肽链的合成中的作用是
A.识别mRNA分子上的终止信号 B.促使多肽链的肽键形成
C.水解肽酰-tRNA酯键 D.抑制转肽酶的作用?
(8)与蛋白质生物合成有关的酶有?
A.氨基酰一tRNA合成酶 B.转肽酶 ?C.转位酶 D.转氨酶?
(9)能直接抑制细菌蛋白质生物合成的抗生素是? A.氯霉素 B.链霉素 C.四环素 D.青霉素?
(10)在蛋白质中，下列哪些氨基酸是在翻译后加工阶段产生的??
A.磷酸丝氨酸 B.羟赖氨酸? C.γ-羧基谷氨酸 D.谷氨酰胺?
(11)下列关于翻译过程的描述正确的是?
A.多肽链合成中C末端的氨基酸是最后参入的?B.存在着一系列肽酰-tRNA中间物?
C.延长过程需要消耗ATP? D.氨基酰-tRNA将近基酰传给肽酰-tRNA?
(12)关于遗传密码正确的是?
A.每种氨基酸都有一组以上密码子? B.所有密码子都决定着特定的氨基酸?
C.乌氨酸、瓜氨酸和羟脯氨酸都有遗传密码? D.终止密码使多肽链合成终止?
(13)下列哪些成份是核蛋白体循环起始阶段所必需的?? A.蛋氨酰-tRNA B.核蛋白体? C.起始因子 D.ATP?
(14)下列哪些成份是核蛋白体循环延长阶段所需要的?? A.tRNA B.延长因子 C.氨基酰-tRNA D.GTP?
(15)下列哪些成份是核蛋白体循环终止阶段所需要的?? A.核蛋白体 B.终止因子? C.遗传密码UAA、UAG、UGA D.GTP
第十二章蛋白质生物合成——翻译答案? 1.单项选择题：?
(1)D (2)A (3)C (4)C (5)B (6)D (7)C (8)E (9)E (10)B?(11)C (12)A
(13)A (14)E (15)A (16)A (17)B (18)C (19)D (20)A- 42 -
检验生化
?(21)B (22)C (23)B (24)D? 2.多项选择题：?
(1)A.B.C.D (2)A.B.C.D (3)A.C
(4)A.B.C.D (5)B.D (6)A.B.C?(7)A.C (8)A.B (9)A.B.C (10)A.B.C (11)A.B.C (12)A.D (13)A.B.C.D (14)A.B.C.D (15)A.B.C? 3.名词解释?
(1) 密码子：mRNA分子上，相邻的三个碱基组成碱基三联体，它对应于一个氨基酸，此碱基三联体称 密码子。? (2) 操纵子：操纵子是DNA分子中一个转录基本单位，由信息区和控制区两部分组成，信息区由结构基 因组成，含有编码数种蛋白质的遗传信息、控制区包括启动基因(RNA聚合酶结合部位)和操纵基因。(控制RNA聚合酶向结构基因移动)。?
(3) 转肽作用?：核蛋白体大亚基上有转肽酶，可以催化P位上肽酰tRNA(蛋氨酰-tRNA)上的羧基与A位上氨 基酰-tRNA的氨基间形成肽键，此过程称转肽作用。? (4) 不稳定配对：mRNA分子上的密码子和tRNA分子上的反密码子配对结合时，密码的第3个碱基和反密码的 第一个碱基结合是不严格遵照碱基互补原则的，此现象称不稳定配对。?
(5) 分子病：由于DNA分子上基因的遗传性缺陷， 引起mRNA异常和蛋白质合成障碍，导致机体结构和功能异常所致的疾病。?
（6）顺反子：遗传学上将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子。原核生物中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质，为多顺反子。真核生物mRNA比原核生物种类更多，一个mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反子mRNA。 4.填空题：?
(1)新生肽链每增加一个氨基酸单位都需经过 进位、 、转肽 、 移位? 三步反应.
(2)在蛋白质生物合成中需要起始tRNA,在原核细胞为 甲酰蛋氨酰-tRNA ;在真核细胞为蛋氨酰-tRNA 。 (3)转肽酶在蛋白质生物合成中的作用是催化 肽键形成 和 肽链水解 水解。
(4)组成核蛋白体的化学物质是 rRNA 和 蛋白质 ，核蛋白体的生理功能是 蛋白质生物合成的场所 。 (5)蛋白质生物合成中,译读mRNA的方向从 5′ 端到 3′ 端;多肽链的合成 从 N 端到端 C .
(6)三联体密码共有 64 个,其中 61 个代表 20 种氨基酸.
5.问答题：?
(1)简述RNA的分类,各类RNA的结构特点及其在蛋白质生
物合成中的作用
①mRNA，5′端有帽子结构m7Gppp;3′端有polyA;依次相连的三个核苷酸组成一个密码，共有64个密码，其中61个密码代表20种氨基酸，1个起始密码，3个终止密码。mRNA在蛋白 质合成中起直接模板的作用。?
②tRNA，其二级结构为三叶草形。有氨基酸臂；DHU环；反密码环，TφC环；额外环。tRNA 能选择性的转运活化了的氨基酸到核蛋白体上，参与蛋白质的生物合成。? ③rRNA,rRNA和多种蛋白质组成核蛋白体，核蛋白体由大、小亚基组成，是蛋白质生物合成 的场所。?
(2)从原料,模板,合成方向和合成方式的基本特点几个方面来比较DNA的合 成,RNA的合成和蛋白质合成. ? DNA合成? RNA合成? 蛋白质合成
原料? dNTP? NTP? 20种氨基酸
模板? DNA? DNA的模板链? mRNA
合成方向? 5′→3′ ?5′→3′? N→C
合成方式?半保留复制? 不对称转录? 核蛋白体循环?
(3)简述在蛋白质生物合成中每延长一个氨基酸要经过哪些步骤?
①进位，与受位上mRNA嘧码对应的氨基酰-tRNA进入。? ②转肽；核蛋白体大亚基上的转肽酶将给位上的肽酰(蛋氨酰)基转移到受位氨基酰-tRNA的 α?氨基上，形成肽键。?
③移位：空载的tRNA从核蛋白体上脱落，核蛋白体沿mRNA向3′端移动一个密码子距离，肽 酰-tRNA随之移到了给位，受位空下来。又可进行下一个循环，进位，转肽，移位。?
?(4) “无意义”的起始密码和终止密码是如何被人们发现的呢？
例如，用连续的（CCA）n核苷酸序列合成一段mRNA，放在试管内加入胞浆提取液（含翻译所需的所有组份）及20种氨基酸。反应结果得到由组氨酸、脯氨酸、苏氨酸组成的肽。这是上个世纪60年代初遗传密码被确定的实验之一。 CCACCACCA的mRNA只有三种读码的可能性，即CCA、CAC、CCA。64个三联体密码的意义，就是用类似的实验加以确认的。
(5)为什么说核糖体是蛋白质生物合成的场所？是如何证明的？
用同位素标记的氨基酸，加入胞浆蛋白提取液，提取液中有蛋白质生物合成所需的各种组份，再加适当的mRNA模板，即可进行试管内蛋白质合成。分析氨基酸的掺入，会发现，- 43 -
检验生化
同位素最先出现于核糖体。然后较长时间才出现于细胞其他组分。用标记氨基酸注射动物，取肝脏分离收集种种细胞器作同位素测定，得出类似结果。肝脏是合成各种蛋白质非常活跃的器官。
(6)为什么同一种氨基酸会有好几种遗传密码？ 每组遗传密码仅编码一种氨基酸，但除甲硫氨酸和色氨酸只对应1个密码子外，其他氨基酸都有2，3，4或6个密码子为之编码，这称为遗传密码的简并性。
遗传密码的简并性使翻译时蛋白质中20种氨基酸和RNA中的61种有意义密码之间能形成对应关系。
(7)抗生素靠什么专一地识别原核生物翻译体系，原核生物和真核生物的密码子大体都一样，为什么抗生素不会同时对真核生物的翻译也形成干扰？
真核生物、原核生物的翻译过程既相似又有差别，原核生物核蛋白体较真核生物小，含有不同的rRNA和核蛋白体蛋白组成等。这些差别在临床医学中有重要价值。
抗生素是微生物产生的能杀灭细菌或抑制细菌的药物，它们专一抑制原核生物翻译体系，能杀灭细菌但对真核细胞无害。
而有些物质则仅干扰真核翻译过程，故应尽量利用原核、真核生物蛋白质合成体系的差异，以设计、筛选仅病原微生物特效，而不损害人体的药物。
（8）何谓翻译？简述原核生物的蛋白质生物合成体系？
翻译是指把核酸中由四种符号(A、G、C、T/U)组成的遗传信息，破译为蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。即把mRNA中核苷酸的排列顺序转变成蛋白质分子中20种氨基酸的排列顺序。
回文结构 E.长末端重复序列 4. 可识别并切割特异DNA序列的酶称为
A.限制性核酸外切酶 B.限制性核酸内切酶 C.核酶 D.核酸酶 E.反转录酶 5. 下列DNA序列属于回文结构的是
A.ATGCCG B.GGCCGG C.CTAGGG D.GAATTC E.TCTGAC
TACGGC CCGGCC GATCCC CTTAAG AGACTG 6. cDNA文库包括该种生物
A.某些蛋白质的结构基因 B.所有蛋白质的结构基因 C.所有结构基因
D.结构基因与不表达的调控区 E.内含子和调控区 7. 下列哪种工具酶的出现在基因工程中具有最重要的意义：
A.逆转录酶 B.限制性核酸内切酶 C.末端转移酶 D.DNA聚合酶 E.DNA连接酶 8. 常用质粒载体的特点是
A.为线性双链DNA分子 B.为环形单链DNA分子 C.具有自我复制能力
D.含有同一限制性内切酶的多个切点 E.缺乏表达外源基因的能力
9. 基因工程的操作程序可简单地概括为
A.载体和目的基因的分离 B.分、切、接、转、筛、表达 C.将重组体导入宿主细胞，筛出阳性细胞株
D.将载体和目的基因连接成重组体 E.限制性内切酶的应用
10. 外源基因与载体的连接，可以采取以下方法，除了： A.粘性末端连接 B.平端连接 C.同聚物加尾连接 D.人工接头连接 E.重组连接
第十四章 基因重组与基因工程答案
一、选择题：?
1.A 2.E 3.D 4.B
第十四章 基因重组与基因工程
一、选择题
1.细菌的F因子是通过哪种方式进行基因转移的 A.接合作用 E.转座
2. 下列关于限制性内切核酸酶作用特性正确的是 A.在对称序列处切开单链DNA B.DNA两链的切点一定不在同一位点 C.酶切部位一定位于识别序列处 D.酶辨认的碱基一般为8～12个 E.酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端
3. 限制性核酸内切酶识别的顺序通常是
A.基因的操纵序列 B.启动子序列 C.S-D序列 D.
B.转化
C.转导 D.转染
9.B 10.E
5.B 6.B 7.B 8.C
二、名词解释
1. 基因工程：(genetic engineering) —— 实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程，又称重组DNA工艺学。
2. 目的基因：准备用来扩增或表达的基因。 3.同源重组：发生在同源序列间的重组称为同源重组(homologous recombination)，又称基本重组（general recombination）。是最基本的DNA重组方式，通过链的断裂和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。
4.接合作用：当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）的
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检验生化
DNA转移称为接合作用(conjugation)。
5.质粒：细菌染色体外的小型环状双链DNA分子。 6.转化作用：通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，称为转化作用 (transformation)。
7.转导作用：当病毒从被感染的细胞（供体）释放出来，再次感染另一细胞（受体）时，发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用。 8.位点特异重组：是由整合酶催化，在两个DNA序列的特异位点间发生的整合。
9.转座子(transposons) ——可从一个染色体位点转移到另一位点的分散重复序列。
10.DNA克隆：应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质（同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA）与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子(replicon)，继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增提取获得大量同一DNA分子，也称基因克隆或重组DNA (recombinant DNA) 。
11.限制性核酸内切酶(restriction endonuclease, RE)是识别DNA的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。
12.回文结构：指被大部分Ⅱ类酶识别的DNA位点的核苷酸序列呈二元旋转对称，这种特殊结构序列称之。 三、填空题
(1) 基因工程的主要步骤包括 分离目的基因 , 限制性内切酶切割载体DNA , 目的基因与载体DNA连接 ， 重组DNA转入宿主细胞 和 筛选含重组体的细胞使目的基因在宿主细胞中表达 。 (即分、切、接、转、筛)? 四、问答题?
(1) 何谓基因工程?简述其操作过程.
用人工的方法在体外进行基因重组，然后使重组基因在适当的宿主细胞中得到表达。基因工程的操作过程：? ①构建DNA重组体?
a.分离目的基因 b.选择克隆载体?c.用目的基因和载体DNA构建DNA重组体? ②DNA重组体的扩增和表达?
a.将重组DNA导入宿主细胞?b.筛选含有重组DNA的宿主细胞?c.目的基因的扩增和表达? （2）为什么质粒可作为基因载体？
质粒，是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子。质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构，能在宿主细胞独立自主地进行复制，并在细胞分裂时恒定地传给子代细胞。质粒带有某些遗传信息，所以会赋予宿主细胞一些遗传性状。因为质粒DNA有自我复制功能及所携带的遗传信
息等特性，故可作为重组DNA操作的载体。 （3）基因组DNA文库是如何保存的？
为了有效地保存基因文库，可通过细菌的繁殖而使包含各个特定DNA片段的细菌增多。液体培养不适用于这一目的，因为各个细菌的生存和繁殖能力不同，各个克隆被保存的机会也会因此而不相等。在固体培养基上每一个细菌单独形成一个菌落，各个细菌并不相互干扰和竞争，因而有利于全部克隆的保存。形成的每一个菌落中大约包含107个细菌，这样一个基因文库中的所有的克隆几乎都扩增了107倍。把培养皿上的细菌全部洗下加以保存，便可以在需要时从中取得任何一个克隆。
（4）转化作用和转导作用有何区别？
通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，这就是转化作用。 （5）什么是转基因动物？
借助基因工程技术把外源目的基因导入生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎，并在受体染色体上稳定整合，使之经过各种发育途径得到能把外源目的基因传给子代的个体，即转基因动物（transgenic animal）。 转入的目的基因称为转基因（transgene），这种转移目的基因的过程称为转基因作用（transgenesis）。关于“转基因”的概念，通常只限于动、植物中经基因工程技术进行的基因转移，因此品种间不论有性或无性杂交获得新基因的途径都不属此范畴。
（6）人类内存在着抑癌基因，为什么有的人还会出现癌症？
存在于生物正常细胞基因组中的癌基因称为原癌基因。在正常情况下，这些基因处于静止或低表达的状态，不仅对细胞无害，而且对维持细胞正常功能具有重要作用；当其受到致癌因素作用被活化并发生异常时，则可导致细胞癌变。
抑癌基因是一类抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤形成的基因。
对于正常细胞，调控生长的基因（如原癌基因等）和调控抑制生长的基因（如抑癌基因等）的协调表达是调节控制细胞生长的重要分子机制之一。癌基因激活和过量表达与肿瘤的形成有关，抑癌基因的丢失或失活也可能导致肿瘤发生。
（7）现在发现很多疾病的发生都与某些特定的基因有关，若用基因治疗是否是将身体每个有害基因切割并都替换上正常基因？
基因治疗就是向有功能缺陷的细胞导入具有相应功能的外源基因，以纠正或补偿其基因缺陷，从而达到治疗的目的。基因治疗包括体细胞基因治疗和性细胞基因治疗，前者针对体细胞进行基因改良，这类基因治疗仅单独治疗受累组织，类似于器官移植；后者因对后代遗传性状有影响，目- 45 -