瓜蒌皮体外抗氧化作用研究(2)

2019-08-30 15:50

2.3瓜蒌皮黄酮的还原力

试验结果见图5.如图5所示,一般情况下,样品的还原力与抗氧化活性有明显的相关性(YenG.C.,1995;DuhP.D.,1997).从图5可以看出,在一定浓度范围内,瓜蒌皮黄酮的还原力随着浓度增大而增强,且具有明显的量效关系,Vc亦是。瓜蒌皮黄酮浓度为0.2mg/ml时,吸光度为0.667,而Vc浓度为0.2mg/ml时,吸光度为0.775,表明软瓜蒌皮具有较强的还原能力,但低于同浓度Vc的还原力。瓜蒌皮黄酮还原力大约是的Vc还原力的0.86倍。说明瓜蒌皮黄酮对Fe3+具有较好的还原作用,但稍差于Vc。

1.61.41.21吸光度0.80.60.40.200100瓜蒌皮黄酮Vc 200300400样品浓度(μg/mL)500600 图5瓜蒌皮黄酮和Vc的还原力

Fig.5 The redueing ability of flavonoids from pericarpium trichosanthis and ascorbic acid

2.4瓜蒌皮黄酮清除超氧阴离子自由基能力

邻苯三酚自氧化的机理十分复杂,至今仍不很清楚。邻苯三酚在碱性条件下发生反应,在反应滞后30-45秒后,产生稳定浓度的超氧阴离子自由基(·02-)与中间物(M),中间物M又与·02-反应,得到一种有颜色的中间产物,此产物在紫外有吸收,能够引起某一波长处吸光值的线性积累,从而来反映抗氧化剂的清除能力的大小。试验结果见图6和图7。如图6和图7所示,瓜蒌皮黄酮具有清除超氧阴离子自由基的作用,清除率随着黄酮浓度增加而增强,且具有明显的量效关系,Vc亦是。 瓜蒌皮黄酮的IC50为7.33mg/mL,Vc的IC50为0.39mg/mL。说明瓜蒌皮黄酮对超 氧阴离子自由基有一定的的清除作用,但差于Vc。

8070清除率(%)605040302002468黄酮浓度(μg/mL)1012 图6瓜蒌皮黄酮对超氧阴离子自由基清除能力

Fig.6 The scavenging effect of flavonoids from pericarpium trichosanthis on superoxide anion radical

656055清除率(%)504540353025200100200300Vc浓度(μg/mL) 400500600图7 Vc对超氧阴离子自由基清除能力

Fig.7 The scavenging effect of ascorbic acid on superoxide anion radical

2.5软枣称猴桃黄酮清除轻基自由基能力

轻自由基(·OH)是一种氧化能力很强的自由基,可发生电子转移!夺取氢原子和轻基化等反应,可以使氨基酸、蛋白质、糖类、核酸和脂类等发生氧化,遭受损伤和破坏。·OH与肿瘤、衰老、辐射损伤以及细胞吞噬有关,与许多疾

病的发生有关,因此迫切需要加强对#OH的作用进行研究。

试验结果见图 8和图 9。如图 8和图 9所示,瓜蒌皮黄酮具有清除经基自由基的作用,清除率随着黄酮浓度增加而增强,且具有明显的量效关系,Vc亦是。瓜蒌皮黄酮的IC50为9.16mg/mL,Vc的IC50为1.51mg/mL。说明瓜蒌皮黄酮对轻基自由基有一定的的清除作用,但差于Vc。

605550清除率(%)4540353025200246黄酮浓度(μg/mL)81012 图8 瓜蒌皮黄酮对轻自由基清除能力

Fig.8 The scavenging effect of flavonoids from pericarpium trichosanthis on scavenging hydroxyl radicals

7060清除率(%)5040302000.511.5Vc浓度(μg/mL)22.53 图9 Vc对轻自由基清除能力

Fig.9 The scavenging effect of aseorbie acid on scavenging hydroxyl radicals

3结论

瓜蒌皮黄酮具有很好的对DPPH自由基的清除作用和抗脂质体过氧化作用,并且优于Vc;对Fe3+具有较好的还原作用但稍差于Vc;对超氧阴离子自由基和轻基自由基有一定的清除作用但差于Vc。说明瓜蒌皮黄酮具有一定的体外抗氧化活性。 4讨论

DPPH自由基(二苯基苦味基肼自由基)是一种稳定的以氮为中心的自由基,被用来评价多种天然抗氧化剂的抗氧化活性,在517nrn波长处有最大吸收。DPPH呈深紫色,当有自由基清除剂存在时,由于清除剂与DPPH的孤对电子配对,使其吸收逐渐消失,生成稳定的黄色化合物。褪色程度与DPPH所接受的电子数成定量关系,即与抗氧化剂的供氢能力有关。由于DPPH自由基反应的简便可行性,故已广泛用于检测自由基清除能力的研究中。加入黄酮后,黄酮可以与DPPH自由基结生成合DPPH-PheO,消耗DPPH,降低DPPH的含量,表现出对DPPH自由基的清除能力高于Vc(牛桂玲等,2009)。

铁离子可以诱发脂质体氧化,但脂质体氧化开始后所衍生出来的过氧化物自由基, 也会造成油脂的连锁反应,促使油脂氧化,黄酮在铁离子催化下的抗氧化可能是对铁离子鳌合以及对自由基清除的综合表现(Ock一Sook Yi,1997)。由于黄酮类结构中大分子间具有共扼效应,鳌合铁离子的能力高于Vc,表现出抗脂质过氧化能力高于Vc。

还原力的测定以样品是否为良好的电子供体为指标,还原力大的样品是良好的电子供者,供应的电子除可使Fe3+还原为Fe2+外,亦可与自由基反应,使自由基成为稳定的物质。由于Vc存在烯醇式2-OH的互变异构,是容易脱氢,故瓜蒌皮黄酮的还原力稍差于Vc(李颖畅,2008)。同理可知,瓜蒌皮黄酮清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力差于Vc。


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