磷酸形成ATP，同时能量携带蛋白又可逆的回到原来的低能状态③化学渗透假说（chemiosmotic hypothesis）：认为电子传递的结果将H+从线粒体内膜上的内侧“泵”到内膜的外侧，于是在内膜内外两侧产生了H+的浓度梯度。即内膜的外侧与内膜的内侧之间含有一种势能，该势能是H+返回内内膜内侧的一种动力。H+通过F0F1-ATP酶分子上的特殊通道又流回内膜的内侧。当H+返回内膜内测时，释放出自由能的反应和ATP的合成反应相偶联。
10、第二信使指能把激素或神经递质的信息传导细胞内，并引起相应生理效应的细胞内的某种化学物质至少有两个基本特性：①是第一信使同其膜受体结合后最早在细胞膜内侧或胞浆中出现、仅在细胞内部起作用的信号分子②能启动或调节细胞内稍晚内出现的反应信号应答。细胞内有五种最重要的第二信使：cAMP、cGMP、1，2-二酰甘油（DAG）、1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）、Ca2+等。①环磷腺苷（cAMP）：是ATP经AC作用的产物。β受体、D1受体、H2受体等激动药通过GS作用使AC活化，ATP水解而使细胞内cAMP增加。α受体、D2受体、MACH受体、阿片受体等激动药通过Gi作用抑制AC，细胞内cAMP减少。cAMP受磷酸二酯酶（PDE）水解为5’AMP后灭活。茶碱抑制PDE而使胞内cAMP增多。cAMP能激活蛋白酶A（PKA）而是胞内许多蛋白酶磷酸化（ATP提供磷酸基）而活化②环磷鸟苷（cGMP）：是GTP经鸟苷酸环化酶（GC）作用的产物，也受PDG灭活。cGMP作用与cAMP相反，使心脏抑制、血管舒张、肠腺分泌等。cGMP可以独立作用而不受cGMP制约。cGMP可激活蛋白酶G而引起各种效应③钙离子：对细胞功能有着重要调节作用，如肌肉收缩、腺体分泌、白细胞及血小板活化等。
中国科学院2002年硕士学位研究生入学生物化学（B卷）
一、是非题（15题，每题1分，共15分。答“是”写“+”，答“非”写“—”） 1、维生素对人体的生长和健康是必须的，但人体不能合成维生素。
2、能被某种生物大分子识别，并与其特异和共价结合的原子、原子团、分子，称为配基。 3、当不同的分子大小的蛋白质混合物流经凝胶层析柱时，小分子物质因体积小最先被洗脱出来。
4、酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两个数值通常比较接近或相同。
5、对于一个酶而言，其过渡态底物的类似物与其底物的类似物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。
6、Km值是酶的特征常数之一，与酶浓度、pH、离子强度等条件或因素无关。 7、磷脂酶A水解磷脂生成磷脂酸。
8、NAD不能由细胞浆通过线粒体内，而NADH能在通过线粒体内膜后被氧化。 9、寡霉素是线粒体ATP合成酶的抑制剂。 10、黄嘌呤和次嘌呤都是黄嘌呤氧化酶的底物。
11、核苷酸磷酸化酶催化腺苷酸的磷酸化，生成腺嘌呤和核糖-5-磷酸。
+
12、肿瘤RNA病毒的复制过程为RNA-DNA-RNA。
13、肾上腺素能与细胞膜上专一受体结合，这种激素-受体复合物能直接活化环化酶，使细胞cAMP浓度增加，引起级联反应。
14、维生素E是一种抗氧化剂，对线粒体膜上的磷脂有抗自由基的作用。 15、吡哆醛、吡哆醇、吡哆醇可以做为转氨酶的辅酶。 二、选择题（20题，每题1分，共20分）
1、为稳定胶原三股螺旋结构，三联体的每第三个氨基酸的位置必须是A．丙氨酸 B．谷氨酸 C．甘氨酸
2、分离含有二硫键的肽段可以用 A．SDS-PAGE电泳 B．对角线电泳 C．琼脂糖电泳 3、引起疯牛病（牛海绵脑病）的病原体是 A．一种DNA B．一种RNA C．一种蛋白质 D．一种多糖
4、胰岛素等激素的受体以及上皮或表皮生长因子的受体都是一种 A．激酶 B．脱氢酶 C．转氨酶
5、在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是
A．竞争性抑制剂 B．非竞争性抑制剂 C．反竞争性抑制剂 D．都不是
6、所谓“多酶体系”是指一个代谢过程中的几个酶形成了一个反应联体系，多酶体系统通常具有性质
A．只在功能上相互有联系 B．不仅在功能上有相互联系，在结构上也有相互联系，形成复合体
C．上述两种情况都存在
7、所谓“代谢物”指的是下面哪一条
A．特指代谢反应中的反应物 B．特指代谢反应中的产物
C．特指代谢反应中的中间物 D．所有代谢反应中的反应物、中间物、产物都为代谢物。
8、有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应
A．并不完全相同 B．完全相同，而且反应的平衡常数也相同 C．完全相同，但由于每一种同工酶的活性不同，反应的平衡常数可以不相同。 9、脂肪肝是一种代谢疾病，它由于
A．肝脏脂肪代谢障碍 B．肝脏脂蛋白不能及时将肝细胞排除 C．肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸 D．肝脏细胞膜脂肪酸载体异常。 10、线粒体ATP/ADP交换载体在细胞内的作用是
A．需要能量 B．促进传递 C．ATP、ADP的通道 D．ATP水解酶
11、辅酶Q是线粒体内膜
A．二羧酸载体 B．琥珀酸脱氢酶的辅酶 C．二羧酸载体 D．呼吸链的氢载体 12、线粒体蛋白质的跨膜传送是一种
A．类似细胞膜的吞噬作用 B．蛋白质解折叠后的传送 C．通过对各个蛋白质转移的载体传送 D．膜内外同类蛋白质交换传送 13、poly d（A-T）的Tm值较poly d（G-C）为 A．高 B．低 C．相同 14、反密码子为IGC，可识别密码子为 A．GCA B．GCG C．ACG 15、RNA形成二级结构的碱基配对，除了A-U和G-C外，还有 A．A-C B．A-G C．G-U 16、RNA用碱水解，产生
A．2’和5’—核苷酸混合物 B．2’和3’—核苷酸混合物 C．3’和5’—核苷酸混合物
17、能与受体结合，形成激素-受体复合物，进入细胞核调节基因表达的激素是 A．甲状腺素 B．肾上腺素 C．糖皮质激素 D．前列腺素 18、原核生物基因转录终止子在终止子前均有
A．回文序列 B．多聚A序列 C．TATA序列 D．多聚T序列 19、能专门水解DNA-RNA杂交分子中RNA的酶是
A．DNA聚合Ⅰ B．反转录酶 C．RNase A D．核酸外切酶Ⅲ
20、真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是 A．RNA聚合酶ⅠB．RNA聚合酶ⅡC．RNA聚合酶Ⅲ
三、填空题（9题，共15空格，共15分）
1、已知三种超二级结构的基本组合形式 、 、 。 2、Western印迹法原理是 鉴定蛋白质的一种方法。
3、酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有 和 等。
4、红细胞膜带3蛋白是一种 。
5、肝素是一种 ，他的主要药理作用是 。
6、细胞核内除了DNA外，还发现至少有两类小分子RNA，它们是核小分子RNA和 。 7、核酸变性时，紫外吸收值增高，叫做 效应。
8、限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文序列，形成粘性末端和 末端。 9、内质网分为两种类型，一种是粗面内质网，为 的场所；两一种为光滑内质网，与 和 合成关系密切。
四、问答题（10题，每题5分，共50分）
1、根据氨基酸通式的R基性质，20种常见氨基酸可分为哪4类？ 2、简述蛋白质翻译后的加工过程。
3、葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6-磷酸葡萄糖，催化这一步反应的酶有两种酶：已糖激酶和葡萄糖激酶。已糖激酶对葡萄糖的Km值远小于平时细胞内的葡萄糖的浓度。此外，已糖激酶受6-磷酸葡萄糖强烈抑制，而葡萄糖激酶不受6-磷酸葡萄糖的抑制。根据上述描述，请你说明这两种酶在调节上的特点是什么？
4、请解释什么是酶的活力和酶的比活力，并说出活力和比活力两个指标在酶的纯化过程中分别反应什么？
5、写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤（写出9步即可）
6、写出氧化磷酸化的5个作用部位不同的抑制剂，并写出各自抑制的部位。
7、真核生物mRNA的5’末端有一段poly（A），5’末端有一个“帽子”的结构特点是什么？
8、5-磷酸核酸-1-焦磷酸（PRPP）是一个重要的代谢中间物，试举出两个反应例子。 9、试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。 10、真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式？ 中国科学院2002年硕士学位研究生入学生物化学（B卷）答案 一、是非题
1、- 人体能合成少量维生素，如维生素D等；2、-；3、- 凝胶层析又称为凝胶过滤，是按分子量大小分离物质的方法，把样品加到充满凝胶颗粒的层析柱中，然后用缓冲液洗脱。大分子无法进入凝胶颗粒中的静止相中，只存在于凝胶颗粒之间的流动相，因而以较快速度先流出层析柱，而小分子则能自由出入凝胶颗粒中，并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡，因此就要花费较长的时间流经柱床，从而使不同大小的分子得以分离；4、-；5、+；6、- 米是常数与底物浓度和酶浓度无关，而受温度和PH值的影响；7、- 生成溶血磷脂；8、- 胞液中生成NADH不能自由通过线粒体内膜，须经α-磷酸甘油穿梭和苹果酸-天冬氨酸穿梭两种转运机制才能进入线粒体，然后再经呼吸链进行氧化磷酸化；9、+；10、+ 次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶催化下也转变成黄嘌呤。黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶催化下进一步被氧化成尿酸；11、+；12、- 有的RNA→RNA；13、-；14、+；15、+ 二、选择题
1、C；2、B；3、C；4、A；5、C；6、C；7、D；8、C；9、B；10、A；11、D；12、B；13、B；14、A；15、C；16、B；17、C；18、A；19、B；20、A 三、填空题
1、αα ββ βαβ；2、抗原抗体结合的专一性；3、低温 干燥；4、糖蛋白（阴离子交换蛋白）；5、多聚阴离子酸性粘多糖 抗凝血；6、snoRNA；7、增色效应；8、平末端；9、光面内质网 脂质 胆固醇
四、问答题
1、不带电荷的极性氨基酸、带正电荷的极性氨基酸、带负电荷的极性氨基酸、非极性氨基酸。
2、在内质网中，多肽的修饰包括信号肽的切除、二硫键的形成、高级结构的折叠及糖基化。在内质网中以长萜醇磷酸酯为载体合成核心糖链，然后转移到蛋白质的天冬酰胺或丝氨酸、苏氨酸上。多肽的进一步修饰在高尔基体中实现，高尔基体可对核心糖链进行修饰和调整，称为末端糖化。多肽在此根据各自的结构进行分类，被运往溶酶体、分泌粒和质膜等目的地。具体的修饰包括：⑴末端修饰：细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽的N末端都是甲硫氨酸，统称Ｎ末端的第一个甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的Ｎ末端氨基酸残基要被除去。真核生物多肽的Ｎ末端残基还要进一步乙酰化，羧基端的再修饰有时也有发生。⑵切除信号序列⑶非末端的氨基酸残基的修饰：丝氨酸、苏氨酸羟基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸等的甲基化；谷氨酸、天冬氨酸的羧基化⑷糖基化：糖蛋白的天冬酰胺、丝氨酸、苏氨酸和糖基结合⑸附加异戊二烯基团：许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合⑹添加辅基：这些辅基和多肽链共价结合，如血红素、生物素、叶绿素等⑺前体修饰：有些蛋白质生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的，如噬菌体、病毒蛋白、真核生物的酶原、激素原（胰岛素前体）等，通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子⑻形成二硫键。对于真核生物的蛋白质，经过合成后的加工，多肽链进一步折叠成为具有正确空间结构的蛋白质、定位和分泌到作用的部位。
3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：已糖激酶对６-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物６-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抑制；葡萄糖激酶则对Ｄ-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被６-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变为糖原储存起来。
4、酶活力也叫酶活性，可以用酶活力单位表示，酶活力是由酶自身催化一定反映的能力决定的，比活力是指单位质量的酶制剂的酶活力单位数，酶的比活力反应酶的纯度。 磷酸葡萄糖异构酶 己糖激酶
5、考察糖酵解反应过程： 磷酸果糖激酶 Mg2+
①G+ATP G-6-P+ADP+H ②G-6-P F-6-P ③F-6-P+ATP F-1，6-2P+ADP 1，6-磷酸果糖醛羧酶 脱氢酶
④F-1，6-2P 磷酸二羟丙酮+3-磷酸甘油醛 磷酸甘油激酶
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