2、蛋白质生物合成的后加工过程就是多肽链离开核糖体以后的进一步修饰的过程，这一过程可以划分为：⑴末端修饰：细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽的N末端都是甲硫氨酸，统称Ｎ末端的第一个甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的Ｎ末端氨基酸残基要被除去。真核生物多肽的Ｎ末端残基还要进一步乙酰化，羧基端的再修饰有时也有发生。⑵切除信号序列⑶非末端的氨基酸残基的修饰：丝氨酸、苏氨酸羟基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸等的甲基化；谷氨酸、天冬氨酸的羧基化⑷糖基化：糖蛋白的天冬酰胺、丝氨酸、苏氨酸和糖基结合⑸附加异戊二烯基团：许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合⑹添加辅基：这些辅基和多肽链共价结合，如血红素、生物素、叶绿素等⑺前体修饰：有些蛋白质生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的，如噬菌体、病毒蛋白、真核生物的酶原、激素原（胰岛素前体）等，通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子⑻形成二硫键。对于真核生物的蛋白质，经过合成后的加工，多肽链进一步折叠成为具有正确空间结构的蛋白质、定位和分泌到作用的部位。
3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：已糖激酶对６-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物６-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抑制；葡萄糖激酶则对Ｄ-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被６-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变为糖原储存起来。 4、ｖ－［Ｓ］作图法，双倒数作图法。
5、胆固醇的作用有：维生素Ｄ３的前体；固醇类激素（肾上腺糖皮质激素、肾上腺盐皮质激素、性激素）的前体；胆酸的前体、过量时增加动脉粥样硬化几率。
6、虽然CoQ既是NADH-CoQ还原酶的辅酶，也是琥珀酸－CoQ还原酶的辅酶，但当NADH经NADH-CoQ还原酶氧化时有ATP合成，而琥珀酸经琥珀酸-CoQ还原酶氧化时却不会有ATP合成。从表面看来，这是因为CoQ接受的氢的来源不同前者来自NADH，后者来自FADH2。从氧化磷酸化机理分析，在对这两种酶的P/O比和ATP生成部位的研究中发现，前者的P/O等于3，后者的P/O等于2，初步说明前者是ATP形成的部位（偶联位），后者则不是ATP形成的部位，进一步分析，这时可能是由于NADH-CoQ之间的氧化电势差和FADH2-CoQ不同所致，前者足以推动ATP的合成，后则不足以推动ATP的合成。氧化磷酸化的机理是一个仍在研究中的重大问题。
7、竞争性抑制，5-氟尿嘧啶是尿嘧啶的类似物，进入体内后先转变成为它的核糖核苷酸（F-UMP），在转变成为脱氧核糖核苷酸（F-dUMP）后者抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶，使细胞缺少DNA合成必须的胸腺嘧啶核苷酸，从而显示出抗癌效力。在正常细胞中，5-氟尿嘧啶能被分解为α-氟-β-氨基丙酸，但在癌细胞中则否。但是已经发现，这一药物的副作用很大，有可能也掺入到正常细胞的DNA分子中，或者抑制正常细胞DNA的合成。
8、在一个基因中，最后成为编码蛋白质的碱基序列叫做外显子，再转录之后被切除掉的碱基序列叫做内含子。内含子将外显子分割开来。在一个多肽链中，经过加工最终成为承担生物活性的多肽链部分叫做蛋白外显肽。经过加工最终除去的多肽链部分叫做蛋白内含肽。胰岛素前体中的连接肽就是一个蛋白内含肽。9、PCR原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成相同的两分子挎贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。但是，DNA聚合酶在高温时会失活。因此，每次循环都得加入新的DNA聚合
酶，不仅操作繁琐，而且价格昂贵，制约了PCR技术的应用和发展。1988年Erlich 发现耐热DNA聚合酶同酶——Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义。该酶可以耐受90摄氏度以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量适应，并逐步用于临床。
PCR意义：PCR本身可直接用来鉴定特定基因的存在与否，也可以用来侦测基因是否有异常。例如，在医学上对遗传疾病或肿瘤癌症的诊断及预后的评估；对细菌、病毒及霉菌感染的诊断。它也可成为一个生产线进而大量复制特定的基因进行基因密码的读取及其它的运用。PCR更可以用于器官移植组织兼容性HLA的分析。另外在演化上的分析，经由PCR的运用也产生重大的进展。进来，在生物医学的研究上，特别是细胞进讯息的传递分子的表现都可用PCR来进行质与量的分析。
10、核小体的结构：核小体由核心颗粒（coreparticie）和连接区DNA（linker DNA）二部分组成。这二部分结构也是通过核酸酶解实验而确定的，核小体单体被小球菌核酸酶处理后，随着时间延长其降解产物（DNA片段）会逐渐缩短，从200bp降至146bp至此变为很难进一步降解的稳定状态。对此稳定降解产生进行分析，证明它是由146bp的DNA片段和H2A、H2B、H3和H4各两个分子组成，这种结构称为核心颗粒。而H1总是随着核心颗粒的形成而消失，通常是在DNA被降解至160bp以后，提取物中H1丢失，提示H1位于“裸露”DNA与核心颗粒的毗邻区。核心颗粒外，“裸露”的DNA长度为60bp左右，成为连接区DNA。连接区DNA的长度在不同物种差异较大，其范围在10——140bp。
生物物理的有关研究说明，DNA盘绕在组蛋白八聚体的周围，呈很有规律的螺旋状虽然DNA双链分子位于核心颗粒的外围，但DNA与组蛋白八聚体的这种相互作用对保护DNA链免受细胞核中核酸酶的消化十分重要。根据上述结构，我们对核小体的结构可做这样的描述：染色质中的DNA双螺旋链等距离缠绕组蛋白八聚体形成众多核心颗粒，各颗粒之间为带有H1组蛋白的连接区DNA。这种组成染色质的重复结构单位就是核小体。
中科院2001年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》
一.是非题，每题1分，共25分。答“是”写“+”，答案“非”写“一”。 1. 所有α氨基酸中的α碳原子都是一个不对称的碳原子( )
2. 蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( )
3. 根据凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,所以最先被洗脱出来( ) 4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有特殊的几何排列的局部空间结构,这样的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( )
5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则不会表现为竞争性抑制( )
6. 酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( ) 7. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子( )
8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( )
9. 线粒体内膜ADP-ATP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( ) 10. 脂质体的直径可以小到150nm( )
11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( ) 12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素( )
13. CoA,NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分( )
14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤( ) 15. RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板( ) 16. DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物( ) 17. 真核生物mRNA两端都含有3'-OH.( )
18. 在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统( )
19. 所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在tRNA末端核糖的3'-羟基上( ) 20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰( ) 二.选择题(20题，每题1分，共20分)
1. 绒毛膜促性激素是一种： A. 甾醇类激素 B. 脂肪酸衍生物激素 C. 含氮激素 2,溴化氰(CNBr)作用于： A. 甲硫氨酰-X B. 精氨酰-X C. X-色氨酸 D. X-组氨酸
3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力： A. ATP酶 B. 蛋白质激酶 C. 蛋白水解酶 4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成： A. αα B. ββ C. α2βγ2 5.胰岛素原是由一条\连接肽\通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端,这条\连接肽\称为：
A. A链 B. B链 C. C肽
6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为：A. Km B. Vmax C. Km/Vmax D. Vmax/Km
7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶：
A. 由低活性形式变为高活性形式 B. 由高活性形式变为低活性形式 C. 活性不受影响 8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于： A. 结合能增大 B. 增加的结合能被用来降低反应活化能
C. 增加的结合能被用来降低Km D. 增加的结合能被用来增大Km 9.TGFβ受体具有下列哪一种酶的活性：
A. 酪氨酸激酶 B. 酪氨酸磷酸酯酶 C. 丝氨酸/苏氨酸激酶 D. 腺苷酸环化酶
10.2000年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大贡献有关:
A. 结构生理学 B. 发育生理学 C. 神经生物学 D. 免疫学 11.苍术钳是一种抑制剂,它的作用位点在：
A.钠钾ATP酶B.线粒体ADP-ATP载体C.蛋白激酶C D.线粒体呼吸链还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶
12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用主要通过： A. 离子键 B. 疏水键 C. 氢键 D. Van der Waal氏力
13.生物膜的基本结构是：
A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质 B. 磷脂形成片层结构,蛋白质位于各个片层之间
C. 蛋白质为骨架,二层林脂分别附着与蛋白质的两侧 D. 磷脂双层为骨架,蛋白质附着与表面或插入磷脂双层中
14.辅酶Q是： A. NADH脱氢酶的辅基B. 电子传递链的载体C. 琥珀酸脱氢酶的辅基D.脱羧酶的辅酶
15.完整线粒体在状态4下的跨膜电位可达： A. 1mv B. 10mv C. 100mv D. 200mv
16.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做： A. 有义链B. 反义链C. 重链D. cDNA链
17.一段寡聚合糖核苷酸TψCGm1Acmm5CC,其中含有几个修饰碱基(非修饰核苷): A. 3个 B. 4 C. 5 D. 6
18.已知有的真核内含子能编码RNA,这类RNA是：
A. 核小分子RNA(sn RNA) B. 核仁小分子RNA(sno RNA) C. 核不均一RNA(hnRNA) 19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症,因为它是：
A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂,减少尿酸的生成 B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂,减少尿酸的生成
C. 尿酸氧化酶的激活剂,加速尿酸的降解 20.α-鹅膏覃碱能强烈抑制：
A. 细菌RNA聚合酶 B. 真核RNA聚合酶 C. 细菌DNA聚合酶 D. 真核DNA聚合酶
21. 在核糖体上进行蛋白质合成,除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关? A. ATP的水解 B. GTP的水解 C. Camp的水解 D. 烟酰胺核苷酸参与 22. 基因重组就是DNA分子之间的:A. 共价连接 B. 氢键连接 C. 离子键连接 23. DNA复制过程中双链的解开,主要靠什么作用：
A. 引物合成酶 B. Dnase I C. 限制性内切酶 D. 拓扑异构酶
24. 包括中国在内,有很多国家科学家参与的人类基因组计划,到目前为止的进展情况如何? A. 仅完成23对染色体的遗传图谱和物理图谱 B. 仅测定了7,10合22号染色体的核苷酸序列
C. 测定了人基因组3X10^9碱基的全序列,但只是一部\天书\无法知道它的全部意义 D. 测定了人基因组全序列,分析了他们代表的遗传信息,已经了解大部分基因的功能
25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是: A. 磷酸吡哆醛 B. 泛酸 C. 烟酰胺 D. 硫氨素
三、填空题(每空一分)
1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为__________然后是胰岛素的前体,称为_________
2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋,这是一种____结构,其中每一股又是一种特殊的____结构.
3. 有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_________型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_____
4. \蛋白质组\是指____________________
5. 蛋白激酶A的专一活化因子是Camp,蛋白激酶C的专一活化因子是__________,此外还有某类型的蛋白激酶可以由_______作为专一激活因子
6. 已阐明原子分辨率三维结构的膜固有蛋白有______________,__________________等(仅写两个)
7. 霍乱毒素的受体是一种____________化合物
8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成ATP的F1F0酶的F1部分的亚基组成的结构是__________ 9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外,影响膜脂流动性的主要因素是_____________
10. 左旋的Z-DNA与右旋的B-DNA相比,前者的每对核苷酸之间的轴向距离____于后者;前者的直径___于后者
11. 已知二类核糖体失活蛋白(RIP)都是通过破坏核糖体大亚基RNA而使核糖体失活,这二类蛋白质分别具有___________和____________活性
12. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与___和___
氨基酸代谢有关.
13. 大肠杆菌的启动子序列包含有___________,_______________及____________等信息. 14. 逆转录病毒含有单链RNA,感染细胞后转变成双链DNA,这种DNA必须__________,才能发生病毒的复制.
15. 真核RNA聚合酶I主要位于细胞__________中,合成大分子核糖体RNA前体 四.问答题(5X6)
1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪5个阶段?(仅需写出阶段名称)
2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减少酶活性的损失,因此操作过程通常要求在低温下进行.如果醇化一个热稳定(耐温)的酶,是否不需要在低温条件下操作?请简述你的见解. 3. 写出核酸降解的主要步骤（A卷）
4. 简述RNA剪接和蛋白质剪接
5.真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是什么？ 中科院2001年攻读硕士学位研究生入学试题答案 一、是非题
1、-2、-3、-4、+5、-6、+7、-8、-9、+10、-11、+12、+13、+14、+15、-16、-17、+18、+19、-20、- 二、选择题
1、C；2、A；3、A；4、B；5、C；6、B；7、A；8、B；9、C；10、C；11、B；12、B；13、D；14、B；15、D；16、A；17、A；18、B；19、B；20、B；21、B；22、A；23、D；24、C；25、A 三、填空题
1、前胰岛素原、胰岛素原；2、三条肽链组成的右手螺旋、左手螺旋；3、Kcat、自杀性底物；
2+
4、生物体所拥有的全套蛋白质或基因组所编码的全部蛋白质；5、二酰基甘油、Ca；6、细菌视紫红质、孔蛋白；7、糖脂类；8、α3β3γеd；9、脂肪酰链的不饱和度；10、大、小；11、RIP、磷酸二酯酶、N-糖苷酶；12、PRPP、组氨酸、色氨酸；13、操纵基因结合、RNA聚合酶结合、转录起始；14、整合人宿主染色体；15、核仁 四、问答题
1、⑴肽链的选择性断裂，用特异性较强的蛋白酶或化学试剂⑵对得到的肽链进行分离⑶分别测定每个肽段的氨基酸序列⑷用另一种方式断裂台联，并重复前三个步骤，测定另一组肽段的氨基酸序列⑸利用两组肽段的序列，进行重叠从而得到肽链的全序列。
2、在低温进行蛋白质（包括酶）的分离纯化，既可以防止蛋白质的变性而失活，又可以避免长菌而污染。但有些寡聚蛋白在低温时，反而会解聚而失活。特别是一些热稳定的酶的疏水作用可能起到相当重要的作用。因此在防止微生物污染的前提下，应该避免使用低温条件。
3、核酸→寡核苷酸→核苷酸→核苷→碱基+戊糖-1-磷酸 ⑴ ⑵ ⑶ ⑷