的消偏振特性，将嗜酸性细胞直接分离出来。计算机综合4 个角度的光信号， 将白细胞分类，并提供提示信息和相关图谱。③电阻抗与射频技术分类法（radio frequence ，RF）：这类血细胞分析仪通过4 个不同的检测系统来完成白细胞的分类：嗜酸性细胞、嗜碱性细胞利用其特有的抗酸和抗碱能力，在各自特殊试剂的作用后，进入独立通道直接计数；在直流电和交流电的同时作用下，仪器根据细胞大小以及细胞内部的核结构、核浆比例、胞浆颗粒等信息对中性、淋巴、单核细胞加以区分；幼稚细胞由于其膜上脂质成分比成熟细胞少，在硫化氨基酸的保护下具有一定的抗溶血能力，在独立的通道内可以直接计数。④光散射与细胞过氧化物酶染色法（peroxidasestain ，PO X）：血标本进入仪器，在一系列的预处理液和白细胞过氧化物酶染色后流经检测器。每个细胞在激光束的照射下，各类细胞因过氧化物酶含量不同，具有不同的光吸收信号；根据每个细胞的前向角大小可以得到细胞的体积数据，同时仪器有单独的嗜碱性细胞直接计数通道，计算机根据这些信息得出细胞分类结果。
（二） 红细胞检测原理
1．红细胞（R BC） 计数、红细胞体积（M C V）、血细胞比容（H CT）、红细胞分布宽度（R D W ） 检测一般采用电阻抗法。原理同白细胞计数。
2．血红蛋白浓度（H G B） 测定
大多数的血细胞分析仪均采用溶血比色法。血标本在溶血素的作用下，
红细胞破坏，溶血素与血红蛋白结合成稳定的氰化高铁血红蛋白（或H G B － 季胺盐衍生物）。溶血液在流经比色池时仪器根据吸光度计算出H G B 的含量。
3．红细胞平均血红蛋白含量（M C H ）、红细胞平均血红蛋白浓度（M C H C） 检测根据R BC 、H CT 、H G B 计算而得。 【注意事项】
（1） 用仪器测定的血细胞比容是每个细胞信号的累加， 与手工测定的结果有差异，前者略低。
（2） 不同类型的血细胞分析仪使用的溶血剂成分略有不同，但主要成分是季胺盐。
（3） 对不同的仪器，红细胞分布宽度有两种表示方法———s 或C V ％。
（三） 血小板检测原理
血小板测定与红细胞计数原理一致，仪器将直径2 ～30fl 的颗粒统计为血小板，大于36fl 的颗粒统计为红细胞。 （四） 网织红细胞检测原理
网织红细胞内残留的R N A 与特殊的染料结合后在通过激光检测器时仪器根据细胞的反射光信号（或发射光信号） 将其与成熟红细胞和其他细胞区别并计数。根据染料性质的不同可分为反射光测定法和发射光测定法。
（1） 反射光测定法：网织红细胞经亚甲蓝染色后，胞浆内的R N A 与染料结合形成蓝色颗粒。这些颗粒在激光的照射下会产生特殊的反射
光，而成熟红细胞则没有这一特性。仪器根据反射光信号可以计数网织红细胞的百分比（Ret ％）、绝对值（Ret ＃）、网织红细胞成熟指数（R MI） 等相关指标。
（2） 发射光测定法：网织红细胞内的R N A 与吖啶橙、碱性槐黄等荧光染料结合后在一定波长的激光照射下会发出固定波长的荧光。仪器根据发光细胞的数量和光强度信号以及红细胞测定的相关参数可以得到网织红细胞绝对值、高荧光强度网织红细胞（H FR） 百分比、中荧光强度网织红细胞（M FR ） 百分比、低荧光强度网织红细胞 （LFR） 百分比、网织红细胞平均体积（M C Vr）、网织红细胞分布宽度（R D Wr）、网织血红蛋白分布宽度（H D Wr）、网织血红蛋白浓度（H Cr）、网织红细胞平均血红蛋白浓度（M C H Cr） 等参数。 【注意事项】
散射光测定法测定网织红细胞易受增多的白细胞和血小板、嗜碱性点彩红细胞、脂浊、疟原虫等影响，发射光测定法则不易受增多的白细胞和血小板、溶血、凝血、脂浊的影响，但易被疟原虫和豪－乔小体干扰。
第二节 ABO 血型系统鉴定
A B O 血型是最早发现的一个血型系统，在输血工作中极其重要。这是因为， 一个人的红细胞上若缺乏A 抗原或B 抗原，其血清中则
有抗A 抗体或抗B 抗体， 因此，如果在输血中忽视了A B O 血型鉴定，就会发生血型不合的输血而导致溶血性输血反应。 一、ABO 血型鉴定
常规的A B0 血型鉴定，应包括用已知的特异性抗体试剂检查红细胞的抗原（正向定型） 和用已知的试剂红细胞检查血清中的抗体（反向定型）。常用的方法有试管法、搪瓷板法。近年又有凝胶微柱法。本节介绍前两种方法，后者可参考市售配套试剂和器材说明书进行操作。 （一） 试管法 【原理】
用标准抗A 抗体、抗B 抗体及抗A 、B 抗体分型血清测定红细胞上有无A 抗原或（和） B 抗原（正定型），或用已知A 型、B 型及O 型红细胞测定血清中有无相应的抗A抗体或（和） 抗B 抗体（反定型） 来鉴定A B O 血型。 【试剂】
（1） 抗A 抗体、抗B 抗体（效价均不低于1 ：128） 及抗A 、B 抗体（O 型） 分型血清。
（2） 已知A 型、B 型及O 型红细胞悬液。 （3） 受检者血清。
（4） 受检者2 ％红细胞悬液。 【操作】
（1） 取洁净小试管3 支，分别标明抗A 抗体、抗B 抗体和抗A 、B 抗
体，用滴管分别加入相应的分型血清，再分别加入受检者2 ％红细胞悬液1 滴，混匀（正定型）。
（2） 另取洁净小试管3 支，分别标明A 、B 和O ，用滴管分别加受检者血清各1 ～2滴于试管底部， 再分别以滴管加入2 ％ 已知A 型、B 型和O 型红细胞悬液1 滴， 混匀（反定型）。
（3） 立即以1000r／min 离心1 min ，轻轻摇动试管，使沉于管底的红细胞浮起，肉眼及显微镜观察有无凝集或溶血现象。 【结果判断】
受检者红细胞加分型血清及受检者血清加试剂红细胞后根据表2 －2 －1 判断受检者血型。
【注意事项】
（1） 分型血清的质量必须符合要求，市售的应有批准文号；用后应立即放人冰箱保存以免其效价下降及细菌污染。 （2） 试管、滴管必须清洁干燥，防止标本溶血。
（3） 离心时间过长或速度过快，易出现假阳性结果，反之易出现假