阴性结果。
(4) 如室温过低, 应提高室温至20 ? 左右, 或将试管放入37 ? 水浴保温, 但是37 ?环境可使反应减弱。
(5) 判定结果后,应立即记录并仔细核对,以防笔误。
(6) 操作时一般应先加血清,后加红细胞悬液,便于核对是否漏加血清。
(7) 正反定型不一致时,需进一步鉴定,以确定不一致的原因。
(二) 搪瓷板法
【原理】 同试管法。 【试剂】
抗A 抗体、抗B 抗体及抗A 、B 抗体分型血清。 【操作】
(1) 在搪瓷板方格内滴加抗A 抗体、抗B 抗体及抗A 、B 抗体分型血清各1 滴,在分型血清旁滴加相当于分型血清1/10 体积的受检者全血。
(2) 用玻棒充分混匀分型血清和受检血标本,在室温(18 ~22 ?) 中停留1 min 后,轻轻摇动瓷板,观察凝集结果。 【结果判断】 同试管法。 【注意事项】
夏季气温较高时,水分蒸发快,为防止血滴蒸发干燥,要及时观察结果,或在血滴上加1 滴9g/L 氯化钠溶液,以防检测出现假阳性结果。 二、A1 和A2 亚型鉴定 【原理】
A 型和A B 型一般可分为A 1 、A 2 、A 1B 和A 2B4 种亚型。B 型人血清中含有抗A 抗体、抗A 1 抗体两种抗体,抗A 抗体可凝集A 1 型、A 2 型、A 1B 型和A 2B 型红细胞,而抗A 1 抗体只能凝集A 1 型和A 1B 型红细胞。 【试剂】
抗A 1 抗体分型试剂(人源或植物种子血凝素)、受检者2 %红细胞悬液、已知A 1 和A 2 型2 %红细胞悬液。 【操作】
(1) 取洁净玻片2 张,1 张供测定受检红细胞用,另1 张标明A 1 型和A 2 型,供对照用。
(2) 将抗A 1 抗体分型血清各1 滴,分别滴在受检者玻片上、对照的A 1 型和A 2 型玻片上。
(3) 分别将受检者红细胞悬液及已知A 1 型和A 2 型红细胞悬液1 滴,滴在上述抗A 1抗体分型试剂上,用玻棒将分型试剂和红细胞悬液混匀。
(4) 轻轻转动玻片,在室温中放臵10 min ,观察结果。 【结果判断】
如已知的A 1 型红细胞凝集,已知的A 2 型红细胞不凝集,而受检者
红细胞凝集是A 1型,不凝集是A 2 型。 【注意事项】
(1) 新生儿红细胞A B O 血型抗原较弱,不宜作亚型检定。 (2) 检查时必须按说明书掌握反应时间。
(3) 如A 1 型和A 2 型已知红细胞均与抗A 1 型抗体分型试剂凝集,说明抗A 1 型抗体分型试剂有问题;若A 1 型和A 2 型已知红细胞均不凝集,应再观察一些时间,若始终不凝集,也说明抗A 1 型抗体分型试剂有问题。