室温，加入20 mL H2O稀释，用HCl中和，除水，真空干燥，得微黄色物质，加少量水溶解，过葡聚糖凝胶柱(G-25)除盐纯化，得到4.3g微黄色产物。比旋度[α]D20=+325(2g/L水溶液)。元素分析:实测值wC32.80%，wH8.68%,wS5.77%，wC/wS=5.68，计算值(取代度为3.8)，wC/wS=5.64。
（四）工艺路线4--单取代磺丁基-β-环糊精(SBE(1)-β-CD)的合成
合成步骤同上，10gβ-CD(8.8mmol)，25mL250g/LNaOH溶液加热搅拌至溶解，慢慢加入1.8mL(2.4g，ρ=1.331g/cm3，17.6mmol)磺丁内酯，同时激烈搅拌，数小时后,反应物呈均相，停止反应，冷却至室温，加20mLH2O稀释，用HCl中和，过滤除去未反应的β-CD，滤液浓缩，过葡聚糖凝胶柱(G-25)除盐纯化，得0.9g微黄色产物。[α]D20=+580(2g/L水溶液)。元素分析:实测值wC36.71%，wH6.22%，wS2.77%，wC/wS=13.25，计算值(取代度为1.3)wC/wS=13.62
四、质量研究及质量标准
(一)质量控制方法研究
第一部分SBE-7-β-CD单一取代组分的分离和制备
目的：分离、纯化和制备SB-7-β-CD单一取代组分，确证其取代度。 方法：采用DEAE SephadexA-25葡聚糖凝胶为填料，玻璃砂芯色谱柱（29cm×4cm）为填装柱，自制分离柱，通过硫酸钠浓度梯度（0~1.4mol/L）洗脱对SBE-7-β-CD进行分离，得到单一取代组分。采用SephadexG-25葡聚糖凝胶为填料，玻璃砂芯色谱柱（40cm×18mm）为填装柱，自制脱盐柱，通过去离子水的洗脱将各单一取代组分脱盐纯化。分别采用核磁共振波谱法和质谱法对得到的
各单一取代组分进行取代度的测定。
结果：共得到6种SBE_7-β-CD单一取代组分，其取代度分别为3、4、5、6、7、8。核磁共振波谱法和质谱法取代度检测结果一致。
结论：本实验成功分离、纯化和制备了6种SBE-7-β-CD单一取代组分，为SBE_7-β-CD的组分分析和平均取代度的测定奠定了物质基础。
第二部分SBE7-β-CD的高效毛细管电泳-间接紫外法组分分析和平均取代度测定
目的：建立SBE-7-β-CD的组分分析和平均取代度测定方法。
方法：采用高效毛细管电泳-间接紫外检测分析方法。未涂层熔融石英毛细管柱（60.2cm×50μm×50cm）；运行缓冲液30mmol/L苯甲酸-Tris缓冲液（pH7.5）；温度25℃；压力进样6s（0.5psi）；分离电压30kV；检测波长214nm，间接检测模式。
平均取代度的计算：
通过比较校正峰面积百分比对各单取代组分进行组分分析。采用所建立的方法对11批供试品进行了测定，并与美国药典论坛（PharmacopoeiaForum，PF）规定的标准进行比较。
结果：SBE-7-β-CD中各组分的分离度符合要求，峰形和基线良好；该方法精密度和重复性良好，供试品溶液在8h内基本稳定；SB-7-β-CD中检测到取代度分
别为2~11的10种单取代组分，11批SBE-7-β-CD供试品的平均取代度为6.7~6.9，符合PF中的规定，但其组分分析结果与PF的标准规定有一定的差异。 结论：该方法准确、快速、分析成本低，能够评价不同批次供试品的差异，为 SBE-7-β-CD合成工艺的改进提供了帮助。
第三部分 毛细管气相色谱法测定SBE-7-β-CD中杂质1,4-丁烷磺内酯 目的：建立SBE-7-β-CD中的杂质1,4-BS的测定方法。
方法：采用气相色谱法。色谱柱：DB1701（30m×0.32mm×0.25μm，Agilent Technologies）；氢火焰离子化检测器；载气为氮气（纯度99.999%），燃气为氢气，助燃气为空气；载气流速30ml/min；进样口温度为200℃；柱温为程序升温：初始温度100℃，以10℃/min的升温速率升到200℃，恒温0min，再以30℃/min的升温速率升到260℃，恒温3min；检测器温度为270℃；柱前压为9.9psi；分流比为10:1；进样1μl。采用二乙砜作为内标。供试品处理：取SBE_7-β-CD供试品约0.2g，精密称定，置10ml离心管中，精密加入水1ml，涡旋溶解，再精密加入二氯甲烷1ml，涡旋1min，静置分层，取有机相，进样分析，以标准曲线法计算含量。
结果：二乙砜与1,4-BS的保留时间分别为6.131min和8.615min，分离度远大于1.5；1,4-BS的检测限为0.1126ng，定量限为0.2599ng；1,4-BS在2.984μg/ml~8.952μg/ml范围内线性关系良好（r=0.9989）；仪器精密度（n=9）的RSD为4.7%；高、中、低三种浓度的加样回收率分别为101.5%、99.3%、100.3%，精密度分别为1.6%、1.2%、1.2%；1,4-BS高、中、低三种浓度的平均萃取率分别为68.7%、68.4%、70.0%，RSD分别为15.2%、23.5%、17.4%；二乙砜高、中、低三种浓度的平均萃取率分别为56.1%、57.7%、52.8%，RSD分别
为18.8%、24.8%、13.9%。
结论：本实验所建立的方法简单、快速、准确，灵敏度可满足检测要求，避免了PF规定的标准加入法的繁琐计算，可作为SBE-7-β-CD中的杂质1,4-BS的有效检测方法。
第四部分 高效液相离子对色谱-液质联用同时测定SBE-7-β-CD中杂质4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠
目的：建立SBE-7-β-CD中的杂质4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠的测定方法。
方法：采用高效液相离子对色谱-液质联用法。
色谱柱：ODS-SPC18(4.6×250mm，5μm，GL Sciences Inc. Inertsil)，柱温为30℃；
流动相：甲醇-10mmol/L正戊胺水溶液（pH5.45）（30:70）；流速1.0ml/min，进样量10μl。离子源：电喷雾离子（ESI）源；检测方式：多反应监测（MRM）模式；负离子监测模式。4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠的监测离子对分别为m/z153.0/79.8和m/z289.0/152.9。
结果：4-羟基丁磺酸钠与二磺烷基化醚钠的保留时间分别为3.41min和4.24min，能够完全分离；4-羟基丁磺酸钠的检测限为0.005294ng，定量限为0.01018ng，定量限的回收率在101.9%~108.8%之间，RSD为3.4%；二磺烷基化醚钠的检测限为0.02054ng，定量限为0.03950ng，定量限的回收率在97.3%~107.8%之间，RSD为4.0%；4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠分别在1.018ng/ml~3.583ng/ml和3.950ng/ml~13.90ng/ml范围内线性关系良好，r分别为0.9997和0.9996；方法精密度（n=6）的RSD不大于3.8%；加样回收率（n=6）为9
5.4%~96.2%，RSD不大于4.2%；仪器精密度（n=6）的RSD不大于3.5%。 结论：该方法专属性强、灵敏度高，是一种新的4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠的检测方法，同时也为其他烷基磺酸钠盐化合物的分析提供了参考。 第五部分 高效液相凝胶色谱-示差折光检测法测定SBE-7-β-CD的含量 目的：建立SBE-7-β-CD的含量测定方法。
方法：采用高效液相色谱法。Phenomenex PolySep-GFC-P3000凝胶柱，柱温35℃；示差折光检测器，检测温度35℃；流动相：乙腈-0.1mol/L硝酸钾水溶液（35:65），流速1.0ml/min；进样量10μl。
结果：SBE_7-β-CD的保留时间为6.8min，主峰与相邻杂质峰的分离度均不小于1.94；方法的检测限为0.32μg，定量限为0.48μg；SBE-7-β-CD在0.4985mg/ml~1.495mg/ml范围内线性关系良好（r=0.9998）；方法精密度（n=6）的RSD为
1.4%；平均回收率（n=6）的平均值为98.0%，RSD为1.3%；6批供试品的含量均在95.8%~99.3%之间。
结论：该方法准确度和重复性良好，适合SBE-7-β-CD的含量测定，为SBE_7-β-CD质量标准的建立奠定了基础。
（二）离子色谱法测定磺丁基醚-β-环糊精中4-羟基丁磺酸
目的:建立磺丁基醚-β-环糊精中4-羟基丁磺酸的离子色谱检测方法。
方法:采用IonPac AS23阴离子型交换柱(250mm×4mm)为分析柱，IonPac AG23(50mm×4mm)为保护柱，7mmol.L-1NaHCO3水溶液为淋洗液，流速为1.0 mL.min-1,以电导检测器检测。