血常规检验 一、【检验方法】: CD—1700 血细胞分析仪 二、【原理及意义】: (一)Hb 1、原理:
红细胞被溶血素溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白被SLS的亲水性的烷基部分所改变,由亚铁血红蛋白形态转变为高铁血红蛋白形态,形成SLS-Hb的正铁血红蛋白化合物,在555nm处有吸收峰,通过仪器内部的比色系统比色,可以测定Hb的浓度。该方法利用了氧化血红蛋白法和氰化血红蛋白法的优点。一方面,SLS-Hb法具有和氧化血红蛋白法一样的检测快速、无毒性成分的优点;另一方面也具有氰化血红蛋白法检测结果精确、重复性好的特点。 (二)RBC、MCV、MCH、MCHC、HCT、RDW-CV、RDW-SD 1、原理:
血液被稀释液稀释后,细胞一个一个通过狭缝,狭缝内外是有直流电的电解质环境,当细胞通过时会引起瞬时的电位变化,形成电脉冲,电脉冲的个数反应细胞的个数,大小反应细胞的大小。细胞体积在一定范围内划为红细胞;在某个范围划为血小板。同时通过仪器内部的数据分析系统换算出MCV、MCH、MCHC、Hct 和统计学处理得出RDW-CV、RDW-SD分析数据。
(三)WBC计数、及其分类 1、原理(电阻检测法):
仪器吸取样本,用一定量的试剂和稀释液稀释后,让白细胞一个个依次通过计数池的微孔,利用细胞通过微孔时瞬间的电阻变化产生脉冲电流而计数。脉冲信号经放大、甄别后,微机处理数据得到其体积分布直方图。 淋巴细胞群为:35-90fl 中间细胞群为:90-160fl 粒细胞群为:160-300fl 三、【试剂品牌】:
稀释液:Sandem 氯化钠6.38g/L 硼酸1.0g/L 四硼酸钠0.2g/L EDTA-2K 0.2g/L
Hb溶血素:SULFOLYSER (SLS-200A) 月桂洗硫酸钠 1.7g/L
清洗液:SANDEM CELLCLEAN STACCLEANER-SYS 次氯酸盐 5%
4、抗凝剂: KEDTA·2HO(1.5-2.2mg每毫升血液) 四、【仪器】:
CD—1700 血细胞分析仪 五、【操作步骤】: ㈠开机:
插上电源,打开CD—1700 血细胞分析仪电源开关
仪器进入自动检测系统,自动检测各系统参数,同时测定本底参数。
当仪器显示窗口出现“Run Ready,说明仪器处于待测标本状态,进行血液质控品测试,通过后可以正常测定血常规标本。
打开中文报告处理电脑和打印机,进行中文处理系统,登录. ㈡关机:
仪器使用完毕,依次按”main”,”special protocol””more”进入””start clean”将清洗液置于针下,按键开始吸样,约十分分后清洗完毕,再按“Shut Down”键。
自动血细胞计数仪进入自动冲洗状态,当自动血细胞仪显示窗口出现“stand by”时可以安全关机,关闭仪器开关,关闭电脑。 ㈢血细胞分析仪的保养(每周一次)
按“main”键,选择drain bath项,按键进入,然后再按一次充满,。 选择“start clean”项,按键。
,在“RBC”和“WBC”计数池中各加1毫升专用清洁液,浸泡十分钟
按“main”键,选择drain bath项,再按一次,再按”clear orifice”,仪器自动清洁保养。 仪器表面需经常擦洗,保持仪器整体清洁。 ㈣每日质控
在每天样本检测前,取专用血液质控品做质控,并做好登记。若检测结果均在范围内,则可进行样本检测,若有失控出现,则需重新定标。 六、【参考范围】:
(1)白细胞(WBC)计数:成人(4 –10)×109/L 儿童(5 -12) ×109/L 新生儿(15-20) ×109/L
(2)白细胞分类(成人):中性粒细胞 50-70% 淋巴细胞 20-40% 嗜酸性粒细胞 0.5-5% 嗜碱性粒细胞 0-1% 单核细胞 3-8%
2.红细胞(RBC):男(4-5.5) ×1012/L 女(3.5-5) ×1012/L 新生儿(6-7) ×1012/L 血红蛋白(HGB):男120-160g/L 女110-150g/L 新生儿170-200g/L
4.血小板(PLT):(100-300) ×109/L 5.血球压积(HCT):男0.42-0.49 L/L 女0.37-0.43 L/L
6.平均红细胞体积(MCV):82-95fl MCV(fl)=
每升血液中血细胞比容(L/L)×1015
每升血液中红细胞总数
7.平均红细胞血红蛋白含量(MCH):27-31pg MCH (g/L)=
每升血液中血红蛋白浓度(g/L)
每升血液中红细胞总数
平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC):320-360g/L
MCHC (g/L)=
每升血液中血红蛋白浓度(g/L)
升血液中血细胞比容(L/L)
9.RDW-CV、RDW-SD: RDW-CV:11.6%-14.0%; RDW-SD:39.0-46.0fL。 10.PDW(15.05-18.1)% MPV(9.4-12.5)fl; P-LCR(13-43)%。 七、【临床意义】: 1.白细胞
(1)白细胞计数
①生理性增加新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。
②病理性增加类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等。
③减少伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎(亦可增多)、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败血症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Che^diak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。 (2)白细胞分类计数:见下表 各种白细胞增多、减少的临床意义 细胞类别
增多 减少
中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞
类白血病、白血病、化脓性细胞感染、溶血性贫血、急性出血、急性溶血、手术后、恶性肿瘤、组织损伤、皮肤病、真性红细胞增多症、脾切除术后。 参见嗜酸性粒细胞计数
慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等。
百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病
单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染
伤寒、副伤寒、流感、麻疹、再生障碍性贫血、黑热病、病毒感染、原虫感染、病毒性肝炎、脾功能亢进、贫血、原发性中性粒细胞减少症、肝硬化
急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷 使用皮质类固醇激素、再生障碍性贫血、多毛细胞白血病.
2.红细胞(RBC):
①生理性减少见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。
②病理性减少造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。 ③相对性增多主要因血浆容量减少所致,见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。
④代偿性增多主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等。
⑤绝对性增多克隆性真性红细胞增多;非隆性红细胞增多,与促红细胞生成素产生过多有关,见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。
3、血红蛋白(Hb):
生理性增加:新生儿、高原居住者。
病理性增加:真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症(如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水)。
减少:各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血。
红细胞比积(HCT) :与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同。 血小板(PLT):
(1)生理性正常人血小板在一天内可有6%-10%变化;表现为早晨低,午后较高;春季低,
冬季略高;平原较低,高原较高;静脉血比毛细血管血高10%;月经前低,后升高;妊娠中晚期升高,分娩后减低;运动后升高,休息后恢复。 (2)病理性 减少:除创伤之外,血小板减少是引起出血的常见原因。常见疾病有:①、血小板生成障碍,如急性白血病、再生障碍性贫血;②、血小板破坏过多,如ITP、脾功能亢进,系统性红斑狼疮;③、血小板消耗过多,如DIC、血栓性血小板减少性紫癜。 增多(血小板大于400×109/L):①、骨髓增生性疾病:慢性粒细胞白血病,真性红细胞增多症;②、原发性血小板增多症;③、急性大出血,急性溶血,急性化脓性感染;④、脾切除手术后。
6.MCV、MCH、MCHC
主要用于贫血的形态学分类,见下表: 贫血的形态学分类
MCV(fL)
MCH(pg)
MCHC(g/L)
大红细胞性贫血 正红细胞性贫血 单纯小细胞性贫血 小细胞低色素性贫血
100-160 80-100 72-80 50-80
35-50 27-35 21-26 12-30
310-370 310-370 300-370 240-300
7.RDW-CV、RDW-SD:
(1)用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察,缺铁性贫血时RDW增大,经治疗后可恢复正常。 (2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别,缺铁性贫血时RDW增大,而轻型珠蛋白生成障碍性贫