血时RDW正常。
(3)RDW与MCV结合可将贫血分为6种。①小细胞均一性:MCV下降,RDW正常,如轻型珠蛋白生成障碍性贫血。②小细胞不均一性:MCV下降,RDW增大,如缺铁性贫血。③正常细胞均一性:MCV、RDW均正常,如某些慢性疾病。④正常细胞不均一性:MCV正常,RDW增大,如早期缺铁性贫血。⑤大细胞均一性:MCV增大,RDW正常,如再生障碍性贫血。⑥大细胞不均一性:MCV、RDW均增大,如巨幼细胞性贫血。 8.MPV、PDW、P-LCR:
①MPV 其临床意义要结合PLT的变化才有价值。①、鉴别血小板减少的原因:当骨髓造血功能损伤致血小板减少时,MPV减少;当血小板在周围血液中破坏增多时,导致血小板减少,MPV增大;血小板分布异常致血小板减少时,MPC正常。②、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征:骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降;造血功能抑制越严重,MPV越小;当造血功能恢复时,MPV增大常先于PLT升高。③、其它:MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血;MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。
②PDW 是反映血小板体积大小的异质性参数,增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等;可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症,前者PDW增加,后者PDW正常。
③P-LCR 代表血小板计数中体积>12fL的血小板的比值或数量,有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片,并可监测骨髓的造血功能。 八、【标本采集】: 随机采取病人静脉血,用40g/L EDTA-K2 抗凝(50ul抗凝1ml血,相当于2mgEDTAK2/1ml血)。 九、【注意事项】:
1、血细胞计数应用EDTA-K2为抗凝剂,用量为EDTA-K2*2H2O1.5—2.0mg可抗凝1ml血,不能用肝素或枸橼酸钠等抗凝剂。
2、采集后在室温中贮存不应超出6h;如需制用血涂片应在2h内完成。
3、测定前抗凝血应充混匀,任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数。
4、注意病理因素对血液分析仪使用的影响,特别是各系统的报警提示。如是否有大血小板对血小板计数的影响;有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。 5、如有冷凝集现象,将血置37℃水浴箱10min后立即测试。 十、【质量控制】:
每日工作开始应先做全血质控品,。
出现失控,应校正后并重做质控,直至符合质控要求。 按要求做好仪器校正和仪器对比工作。 做好质控、失控和校正登记。 十一、【报告复查】:对以下情况的样本进行复查(仪器及手工); (1) 白细胞低于3.0×109/L;
(2) 红细胞数与血红蛋白明显不符; (3) 血小板低于50×109/L;
(4) 白细胞分类时,中间细胞>15%,以及机器未能分出的样本需手工分类。 白细胞计数:
原理:血液经稀酸溶液稀释后,红细胞被破坏,放入血细胞计数池内,置显微镜下计数,求得每微升中的白细胞数。 试剂:
冰醋酸 10ml
蒸馏水 加至500ml
10g/L美蓝 3滴
器材:20微升吸管,血细胞计数板,显微镜。
操作:加计数试剂0.38ml于小试管内,取血20微升吹入试剂,混匀。静置1-2分钟。低倍计数,计数4角得4大方格,计数总数乘以50即为白细胞/微升。 血小板计数:
原理:血液用血小板计数试剂稀释后,在显微镜下计数。 试剂
草酸铵稀释液草酸铵1.0g,乙二胺四乙酸二钠0.014g,40%甲醛溶液0.1ml加水至100ml,加亚甲蓝少许,过滤后置冰箱备用。
许汝和稀释液尿素9g,乙二胺四乙酸二钠0.5g,巴比妥钠0.3g,加蒸馏水水至100ml,过滤后置冰箱备用。
Barr稀释液白皂素0.25g,枸橼酸钠3.5g,煌焦油蓝0.1g,40%甲醛溶液1.0ml,加水至100ml,过滤后置冰箱备用。 操作
选上述任一试剂(本科室用2液),每管加0.38ml,加入全血20微升,充分混匀。
用改良牛鲍计数板,将血液稀释液充池后,置于有滤纸得培养皿内,放置至少10min,待血小板沉降后计数。
计数中央大方格内5个中方格得血小板数,其结果乘1000,即得每微升血液中血小板数。 手工白细胞分类计数: ㈠、原理
把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用复合染料染色,根据各类白细胞形态特征予以分类计数,得出相对比值(百分率),以观察数量、形态和质量的变化,对疾病有辅助诊断意义。 ㈡、试剂
瑞姬氏复合染色液 Ⅰ液:取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g,置洁净研钵中,加少量甲醇(分析纯),研磨片刻,吸出上层染液。再加少量甲醇,继续研磨,再吸出上液。如此连续几次,共用甲醇500ml。收集于棕色玻璃瓶中,每天早、晚各振摇3分钟,共5天,以后存放一周即能使用。 Ⅱ液:pH 6.4-6.8磷酸盐缓冲液 磷酸二氢钾(无水) 6.64g 磷酸二氢钠(无水) 2.56g
加少量蒸馏水溶解,用磷酸盐调整pH,加水至1000ml ㈢、操作
采血后推制厚薄适宜的血膜片应呈舌状,头、体、尾清晰可分。
推好的血膜在空气中晃动,以促使快干。天气寒冷或潮湿时,应于37℃温箱中促干,以免细胞变形缩小。
染色。平置玻片于染色架上,滴加染液3-5滴,使其迅速盖满血膜,约1分钟后,滴加缓冲液5-10滴,轻轻摇动玻片或对准血片吹气,与染液充分混合,5-1分钟后用冲去染液,待干。 选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,在油镜下计数100个白细胞,按其形态特征进行分类计数,求出各类细胞所占比值(百分率)。
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