(c)啮齿类动物显性致死因子的研究,(方法 B.22) (d)小鼠遗传性变异测定,(方法 B.25) 遗传性作用 – 对DNA 影响
遗传毒性, 确认为在遗传基因的材料上的有害作用未必与诱变性有关, 因为其没有对 DNA 的伤害直接的证据。 以下使用真核微生物或哺乳动物细胞的方法可适当地用于此项调查: (a)啤酒酵母的有丝分裂的重组,(方法 B.16)
(b) DNA 损坏和修复- S期外DNA合成 - 哺乳动物细胞 -体外。(方法 B.18)
(c) 哺乳动物样品细胞中姐妹染色体交换 -体外,(方法 B.19) 调查致癌潜在性的替代方法
哺乳动物细胞的变化分析对于测量物质在细胞培养时对它的形态和行为的诱导是有用的，这和体内恶性肿瘤细胞的迁移有关(方法 B.21)。 许多的不同细胞类型和标准可能在测试时被用到。 哺乳动物遗传效应的危险评估
许多基因（点）突变方法可以用来测量哺乳动物样品的遗传效应,例如小鼠特性现场测定, 为了测量第一代生殖细胞突变，( 不包含在这一个附属物中), 或为染色体变异,例如小鼠可遗传突变的测定,.(方法 B.25) 当估计一物质对人遗传基因的危害的时候 , 可以用这种方法。 然而,这些复杂性的测定及这些测定需要非常大量的动物,特别是实验
需特殊场所，故在实施这些研究时需要充分的论证。
B.3致癌物质
化学药品依据作用机制分，可以描述为神经毒性或非神经毒性致癌物质。
现在关于神经毒性物质的致癌潜在性信息可能是从诱变性/神经毒性研究获得。从重复的剂量实验，亚慢性的或慢性的毒性测定,重复的剂量毒性测定中可获得附加的实验数据。
方法 B.7 和比较长的重复剂量研究包括在在重复的剂量毒性测定中观察以评估生理的变化。例如某些组织的增生应该得到关注。这些研究和毒物动力学实验数据可能帮助识别化学药品致癌潜在性, 这些可能需要在致癌性测定 (方法 B.32) 或经常的慢性毒性/致癌性的综合性研究中获得。(方法 B.33)
B.4生殖毒性
生殖毒性可以用不同的方法检测。例如男性和女性生殖功能的损害,确认为?在生殖力方面的影响', 或归纳为后裔不可遗传的有害的作用，分泌乳汁期间的致畸性和作用也被确认为“发展的毒性“'。 对致畸性的研究,作为正在发展的毒性测定的部份,测定方法(方法 B.31)主要通过口饲途径。 另外，其他的途径依靠测定物质的物理性质以及人类接触途径。 在此种情况下，测定方法应该适合应用于 28 天的测定。第三代的生殖 (生殖力) 测定是需要的,二代的生殖的测定
描述方法 (方法 B.35),可延伸至第三代。
B.5. 神经毒性
神经毒性可以以不同的方式来检测，例如中枢或周围神经系统方面的功能的变化和/或结构的生物化学变化。神经毒性的早期迹象可以从急性毒性测定中获得。为了获得很多的实验数据，必须采用重复剂量毒性测定方法 B.7, 包括神经毒性作用的评估 , 仔细的观察动物样品的临床表现。 方法应该帮助识别有神经毒性化学药品，这可能需要对这一个方面进行比较深入的调查。 此外，必须着重考虑物质的潜在的引起特定的神经毒性作用，这些潜在的作用在其他的毒性研究中不能被发现。 例如, 某有机磷物质可延缓神经毒性作用并且可以在方法 B 37 和 B.38 中被评估。
B.6免疫毒性
免疫毒性可用多种方法检测，如免疫抑制剂法和/或超敏反应或应激自动免疫增强信号法。重复剂量毒性测定，B.7方法，包括免疫毒性因子的评估。该方法有助于识别潜在的免疫毒性化学物质，但有待于进一步讨论。
B.7 毒性动力学
毒性动力学的研究有利于对毒性的阐述和评价。这些研究是为了通过测定阐明化学药品毒物的特性以及对未来毒性研究带来帮助. 并不是在每一种情况下所有的参数都要被测定。只有在极少的情况
下，整个系统的毒性影响参数（吸收，排泄，分布和新陈代谢）才都需要测定。对于某些特定的化合物来说，这一系列的因素的变化可以是有帮助作用的或者某一特定单独计量研究可以是很充分的。（方法B.36）
关于化学结构和物理化学性质的信息可以通过指定路线的药剂使用方法和新陈代谢组织分布的可能性来提供关于吸收性质的说明。通过先前有关毒性和毒性扩散的研究，也可以得到的有关毒性控制因素的信息。
C.测定物质的性质
在任何毒性研究开始前，我们必须了解实验物质的组成。它包括主要成分的不纯程度和包含稳定性在内的物理化学性质。
实验物质的物理化学性质为实验方法的选择，每个特定研究的设计和实验物质的处理和储存提供了重要信息。
在开始实验前，我们要设计出实验物质在药剂介质和生物材料中定性定量分析的方法。
所有有关论证，物理—化学性质、纯度和实验物质的行为的信息都应在实验结果报告中给出。
D.动物样品的饲养
在毒性实验中，对饲养环境条件进行严格的控制和合适的饲养动物样
品的技术是必须的。 (i)饲养环境
在实验动物样品的笼子中，要提供适合该实验动物种类生存的环境条件。对于大鼠、小鼠和天竺鼠而言，合适的条件为笼子温度为22℃±3℃,相对湿度为30%~70%；对兔子而言，温度为20℃±3℃，相对湿度为30%~70%。
有些技术对温度的作用特别敏感，在这种情况下，有关合适的测定条件的细节会在实验方法的描绘中有所说明。在所有关于毒性作用的研究中，温度和湿度的信息都应被监控、记录并写在最终的实验研究结果报告中。
光照条件应被人工控制为12小时白天，12小时黑夜。光照类型的细节应该记录并写在最终的研究实验结果报告中。
除非在实验方法中有特别的说明，动物一般可以分别饲养或把少量的同性别的动物共同饲养；对于共同饲养来说每个笼子中的动物数量不应超过5只。
在关于动物样品的实验结果报告中，在化学分析和任何结果观察阶段，把关养类型和每个笼子中关养动物样品的数目交代清楚是很重要的。
（ii）喂养条件
食物应该满足被实验的动物样品的所有的营养需求。当实验物质在食