物中给动物使用时，食物的营养价值可能因实验物质与食物成分的相互作用而降低了其营养价值。在得出实验结果时，这种相互作用的可能性应该被考虑。可以不断地提供饮用水来组成实验室的便利食品。在用这种方法是用实验物质时，食物的选择可能为确定某种实验物质的某种特定状态的需要而被影响。
已经确认能够产生毒性影响的食物污染物不应该作为干扰因素。
E.动物样品的保护
当设计实验方法时，我们必须考虑如何减轻动物痛苦的问题。下面将给出一些例子，但并不全面。准确的说明或条件应该能在方法的全文中找到：
- 对于急性口饲毒性实验，“固定剂量实验方法”和“急性中毒分级方法”这两种方法应被考虑。“固定剂量实验方法”并不利用死亡作为终点，它使用的动物数量很少。“急性中毒分级方法”使用的动物样品的数量平均比B.1法少70%。这两种方法比传统的方法能造成较少的痛苦。
- 使用的动物数量减少到科学上可以接受的最小的数目。对于方法B.1和B.3来说，每个计量等级只测定同种性别的5只动物；对于用天竺鼠（方法B.6）来做皮肤致敏的测定实验的最大化的方法，也只有10只动物被使用（只有5只作为阴性对照组）；当测定体内的突变性时用作阳性控制组所需的动物量也减少了。（方法B.11
和方法B.12）
- 在实验过程中应该把动物样品的疼痛和痛苦减到最小；对非常痛苦的动物应该采取人道主义的方法宰杀；在定量实验中由于腐蚀或刺激导致显著疼痛的物质最好不要采用（方法B.1，方法B. 2和方法B.3）。
- 不仅在急性中毒实验（方法B.1,B.2和B.3）,而且在体内的突变性实验中，用无联系的高剂量进行测定都应当通过极限实验的说明来避免。
- 当能够提供充足的科学证据时，对刺激测定的方案现在允许非行动测定或减少到用单个动物个体的研究。
这些科学证据可以基于物质的物理化学性质，即其它有效实验的结果，或是在体外实验中获得的良好结果上。例如, 一个皮试急性中毒测定在限制性剂量水平下进行，并且没有观察到皮肤敏感度现象，就不需要进行进一步测定了。在皮试过敏测定中确认有腐蚀性或导致严重皮肤敏感度的物质（方法B4）不应进一步去做眼睛过敏的实验。（方法B5）
F 其它测定方法
欧盟的一个科学目标是研究出一种有效的替代技术。它能像现有的动物测定方法一样提供同水准的信息，却用很少的动物，引起较少的痛苦甚至完全不用动物。
当这种技术变得可行时，就得考虑是否能用来划分物质的危险性及其其带来的影响以及用做潜在危险的标识。
G 实验结果评价与分析
当实验结果评价与分析时，必须考虑测定结果可以在何种程度上推广到人的情况。因此，在人身上的副作用，如果可能，就可作为测定结果的确证。
用这些方法测定的结果可以用于分类、标识现有以及新的对人类的健康有作用的化学药剂。对应的附件Ⅵ中分类与标识标准也和这些测定方法中的测定原理根本上相似。
这些结果也可以用在风险评估性的测定中。对于新的和现有的化学药剂，在相应的参考文献中应能找到合适的测定方案。
H.文献注释
这些方法绝大多数都是在为世界经济合作和发展组织项目框架下建立起来的“实验指导”下发展起来的。为了确保实验数据的尽可能的相互认可，使用这些方法时必须遵循“实验室良好行为规范”的原则。 其它的信息可以在经济合作和发展组织指导方针的注释里面以及相关的文献中找到。