E.翻译过程是在溶酶体进行的 合，使起始密码准确定位于翻译起始点，称为SD序列。 21．下列有关遗传密码的叙述正确的是 5．分子伴侣是广泛存在于原核生物和真核生物细胞中的一类A.翻译时密码子的第三个碱基和反密码子的第一个碱基之间保守蛋白质，可识别肽链的非天然构像，促进各功能域和整可以形成不稳定配对 体蛋白质正确折叠。 B.突变引起一组密码子的第三个碱基改变与引起第一个碱基
五、【简答题】 改变相比较，引起氨基酸顺序改变的可能性较小
C.反密码子的5‘端时常出现稀有核苷酸
D.突变引起一组密码子的第三个碱基改变与引起第一个碱基1．简述三种RNA在蛋白质合成中的作用。 2．试述复制、转录、翻译的方向性。 改变相比较，引起氨基酸顺序改变的可能性更大
3．简述原核生物蛋白质翻译延长过程。 22．下列氨基酸不参与蛋白质合成的是
4. 列举并简述小RNA的种类及其作用。 A.瓜氨酸 B.脯氨酸 C.亮氨酸
简答题参考答案 D.鸟氨酸 E.天冬氨酸
1．（1）mRNA的作用：以一定结构的mRNA作为直接模板23．与蛋白质生物合成有关的酶是
合成一定结构的多肽链时，就是将mRNA上带有遗传信息的A.氨基酰-tRNA合成酶 B.转位酶 C.转肽酶，
核苷酸顺序翻译成氨基酸顺序的过程，即mRNA是通过其模D.转氨酶 E.转硫酶
板作用传递遗传信息，指导蛋白质的合成。 二、【不定项选择题参考答案】
1．AC 2．ABC 3．BD 4．ABC 5．ABC 见page114图4-4. 6．CD （2）tRNA的作用：tRNA是转运氨基酸的工具。作为蛋白解释：新加入的氨基酸 7．ACDE解析：原核生物翻译与转质合成原料的20种氨基酸各有其特定的tRNA，而且一种氨录无核膜间隔，均在胞质，所以是边转录边翻译，二者偶联。基酸常有数种tRNA来运载。 真核与原核蛋白质合成起始阶段均需GTP。原核延长阶段进（3）rRNA的作用：它和蛋白质结合成核蛋白体，是蛋白质位有EFT、EFG参与，而EFT是由EF-Ts和EF-Tu两个亚基合成的场所。 （1）复制的方向性：DNA复制的起始部位称复制子。每组成。原核mRNA翻译起始密码的上游以??AGGA?为核2．心的序列为S-D序列（因发现者而得名），mRNA通过S-D个复制子可形成两个复制叉，如模板单链DNA3‘→5‘的方向序列与16S rRNA3‘－末端相应序列互补结合，所以S-D序列与复制叉方向相同，则是连续复制；如果模板方向和复制叉又称为核蛋白体结合位点（RBS），是mRNA与小亚基结合方向相反，则DNA合成为不连续合成。 的结构基础。多肽链有两端，即氨基末端（N-末端）和羧基（2）转录的方向性：DNA模板方向是3‘→5‘转录为RNA的末端（C-末端），按照惯例，命名从N→C，其合成方向也是方向是5‘→3‘。 N→C端。 8．AB 9．ABCD 10．CE 11．ABCDE 12．ABC （3）翻译的方向性：核蛋白体沿mRNA从5‘→3‘方向进行13．AC 14.ABCDE15．ABCD 16．CD 17．ABC 18．ABCDE 翻译，所合成的多肽链方向是由N端向C端进行。 3．（1）进位：氨基酰-tRNA根据遗传密码的指引，进入核糖19．ACE 20．ACE 21．ABC 22．AD 23．ABC
体A位； （2）转肽（成肽）：在转肽酶作用下，将P位点上肽酰基转三、【填空题】
移到A位点氨基酰-tRNA上，在A位形成肽键，肽链延长； 1．多聚核糖体由______个mRNA与______个核糖体组成。 （3）转位（移位）：游离tRNA离开P位点，在A位上新形2． 在蛋白质合成中需要起始tRNA，在原核细胞为______，成肽酰-tRNA又移到P位上，同时核糖体在mRNA上以5‘在真核细胞为______。 →3‘移动三个核苷酸距离，下一个密码子置于A位点。 3．蛋白质生物合成中，译读mRNA的方向是从______端到六【超难度论述题】 ______端，多肽链的合成从______端到______端。 1. 真核生物与原核生物蛋白质合成过程的不同点是什么？ 真核生物 原核生物 4． 转肽酶在蛋白质合成中的作用是催化______生成和 mRNA (1) 翻译与转录不偶翻译与转录偶联 ______水解。
联，mRNA需加工修饰 5． 遗传密码中，既作为起始密码又是蛋氨酸密码的是，(2) 有“帽”及聚A 无“帽”与聚A“尾”______，终止密码有______、UAG和UGA。 “尾”，无S-D序列，但 5‘-末端起始密码上【填空题答案】：1．1；多2．（N-）甲酰蛋（甲硫）氨酰-tRNA ；游有S-D序列，为多顺为单顺反子 反子 蛋（甲硫）氨酰-tRNA
(3) 较稳定，易分离 半寿期短，不稳定，不3．5‘；3‘；N；C；4.肽键;肽酰-tRNA；5．AUG ；UAA
四、【名词解释】
1．遗传密码与反密码：从mRNA分子的5‘端AUG开始，每
相邻的三个核苷酸为一组，代表某种氨基酸或其它信息，这就是遗传密码或密码子。每种tRNA的反密码环的顶端都有一组由三个核苷酸组成的反密码子，后者能与mRNA上相应的密码子互补结合。 2．在蛋白质合成过程中，氨基酸与tRNA结合为氨基酰-tRNA的过程称为氨基酸的活化。
3．密码与反密码子之间相互结合时，反密码子的第1核苷酸和密码子的第3核苷酸之间的结合，并不严格遵循碱基配对原则，即除A—U、G—C配对外，U—G、I—U、I—C或I—A也可以配对。这种不严格的碱基配对，称为不稳定或摆动配对。
4．原核生物mRNA起始密码子上游8～13个碱基处存在一段一致性序列，可与小亚基16S-rRNA3‘端互补序列配对结
核蛋白体 tRNA 合成过程：起始 延长 (1)沉降系数为80S (2)小亚基是40S，含18S rRNA及33种蛋白质 (3)大亚基为60S，含5S、5. 8S、28S三种rRNA及49种蛋白质 (4)小亚基上的18S rRNA无与mRNA相结合的区域 具有起动作用的tRNA是非甲酰化的Met-tRNA imet （1）起始因子（eIF）10余种 （2）小亚基先与非甲酰化的Met-tRNAimet结合，再与mRNA结合 协助氨基酰-tRNA进入易分离 70S 30S，含16S rRNA及21种蛋白质 50S，含5S、23S两种rRNA及31种蛋白质 16S rRNA3‘末端有与mRNA5‘-末端的S-D序列相互补的碱基序列 甲酰化的Met-tRNAmet (fMet-tRNAfmet) IF有三种 小亚基先与mRNA，再结合fMet-tRNAfmet 进位是EFT（由Tu和Ts16
终止 A位的是eEF1，移位的因子称eEF2 只有一种释放因子（RF），识别三种终止密码 两个亚基组成），移位需EFG 有三种RF，RF1识别UAA、UAG；RF2识别UAA、UGA；RF3协助二者起作用。 14. √ 15. ×应该是形成EF-Tu·GTP-AA-tRNA复合物，随后GTP水解16. ×EF-Ts是一种循环因子，可使失活的EF-Tu·GDP变成为有活性的EF-Tu·GTP 17. √ 18. √ 19. √ 20. √
二、【填空题】
1. 翻译过程中，（ ）是合成的场所，（ ）是合成的模板，（ ）是模板与氨基酸之间的连接分子。
2. 原核生物和真核生物细胞内，蛋白质的合成起始密码子一般都为（ ）只有少数原核生物以（ ）为起始密码子。
一、【是非题】 3. 蛋白质的生物合成主要通过（ ）循环来实现的。包
括（ ），（ ）,（ ）三个阶段。
1．AA-tRNA合成酶除激活及转移氨基酸到tRNA上外，还 4. 在研究蛋白质的生物合成时，Nirenberg等以多聚U作模
有催化AA-tRNA脱酰基作用。 板加入无细胞体系时，意外发现所合成的多肽是多聚（ ）
2.已知生物体内，蛋白质生物合成的起始因子是从而推断出（ ）是（ ）的密码子。
IF-1,IF-2,IF-3。它们全是一种热不稳定的蛋白质。 5. 以含有两种核苷酸的共聚核酸作模板、任意排列时可出现
3．IF-3有IF-3a，IF-3b两种形式,是一种双功能蛋白质，其功（ ）种三联体。
能是促进mRNA与30s 亚基的结合,以及保持30S亚基的稳 6. 查阅密码子表，以特定的多聚（UG）为模板合成的是多
定性。它不与50S结合成70S颗粒。 聚（ ）多肽。
4. 在翻译过程中，负责肽基tRNA从核糖体A位向P位移动 7. 一般氨基酸的密码子至少有两个，只有（ ）和（ ）
的延长因子，在原核生物中为eEF-2,真核生物中为EF-G。 仅有一个密码子。
5．原核生物中蛋白质合成的起始阶段，所形成的起始复合物 8. 对蛋白质生物合成的研究，至今为止，所研究过的有机体
为70S.mRNA.Met-tRNA。 氨基酸（ ）密码和（ ）密码都是相同的,这说明生物界
6．真核生物蛋白质在合成的起始阶段、形成的起始复合物为的密码子具有（ ）性质。
80S·mRNA·Met-tRNA。 9. 在蛋白质的生物合成过程中，（ ）为每个三联体密码翻
7．核糖体由大、小两个亚基构成，它们之间存在着功能的差译成氨基酸提供了接合体。
别，A位、P位、转肽酶中心等基本都在大亚基上。 10. 在蛋白质的生物合成过程中，氨基酸必须接合到（ ）
8．核糖体由几种rRNA和一种蛋白质组成的亚细胞颗粒。 上，生成的（ ）才能被带到mRNA-核糖体复合物，并被
9．核糖体的P位可与新掺入的氨基酰-tRNA结合、A位可与放在多肽链的适当位置上。
延长中的肽酰-tRNA结合。 11. 同功tRNA既要有不同的（ ），以便识别氨基酸的各种
10．遗传信息是以能被翻释成单个氨基酸的三联体密码形式同义密码子，又要有某种结构上的共同性，能被（ ）酶识
编码的。 别。
11.以多聚二核苷酸为模板可合成由多个aa组成的多肽。 12. ?EF-Tu是原核生物蛋白质合成的（ ）因子，它的功能
12．原核生物蛋白质合成的起始密码子多是GUG，真核生物是按照mRNA上的编码顺序把AA-tRNA带入（ ）位的,
是AUG。 使EF-Tu·GDP再生成EF-Tu.GTP，继续参加肽链延伸的是
13．核糖体的两个亚基只有结合成稳定的核糖体，才能参加（ ）因子。
蛋白质的合成。 13. 蛋白质肽链合成过程中，每增加一个氨基酸，肽基-tRNA
14．蛋白质的肽链延长因子分为两类：一类帮助AA-tRNA进都要从A位移至P位；（ ）是负责这种延伸机制的移位过
入核糖体与mRNA结合；另一类负责肽基-tRNA从核糖体A程的。
位向P位移动。 14. 蛋白质合成的终止因子是用（ ）表示。
15．EF-Tu功能是：按照mRNA上的编码顺序将AA- tRNA15. 在（ ）的催化下，P位fMet-tRNAMet上的肽基转移至
带入A位上，在GTP存在下它与AA-tRNA形成复合物A位的AA－tRNA的氨基上，形成肽键。
EF-Tu·GDP-AA-tRNA。 16. 蛋白质生物合成过程中，肽链的延伸是许多循环组成的，
16．EF-Ts的功能是使EF-Tu·GTP再生成EF-Tu·GTP,继续参每次循环消耗（ ）ATP。
加肽链延长。 17．所谓―摇摆概念‖就是认为碱基配对除标准的配对以外，
17．蛋白质合成过程中肽键每增加一个氨基酸。肽基-tRNA还可以有非标准的配对。按照这个概念，密码子的第三个碱
都要从A位移至P位，核糖体与mRNA相对移动三个核苷酸，基就可以有一定的灵活性。按照―摇摆概念‖G能与（ ）或
即一个密码距离，这个过程需EF-G和GTP。 （ ）配对，I能与（ ）,（ ）或（ ）配对。
18．蛋白质生物合成过程中，识别mRNA上终止密码的是释18．在转译时，tRNA对于mRNA的识别只和tRNA上的（ ）
放因子RF。 有关，和（ ）无关。
19．肽链合成过程中的移位是一个消耗能量过程，原核生物19．在真核生物的mRNA中的5-＇末端发现都有（ ）帽
靠EF-G水解GTP供能。 子结构，3＇-末端都有（ ）。
20．用同位素标记法证明,多肽链的合成是从氨基端开始向羧20．各种tRNA接受臂的3＇-末端都是CCA这三个核苷酸，
基端进行的。 在形成氨基酰tRNA时，由氨基酸的（ ）与tRNA3＇-末端
【是非题参考答案】 A的（ ）形成酯键。
1. √ 2. × 3. √ 4. ×原核生物延伸因子为EF-Tu、EF-Ts、EF-G【填空题参考答案】
而真核生物延伸因子为两个EF-1、EF-2. 5. ×应为1.核糖体,mRNA,tRNA 2.AUG,GUG 3.核糖体,起始,延伸,终
70S.mRNA.fMet-tRNAfMet 6. √ 7. √ 8. × 9. ×恰好颠倒了 10. 止 4.Phe,UUU,Phe或苯丙氨酸5. 8 6.Cys-Val 7.Trp,Met 8.
√ 11.× 见page110比如GUGUGUGU只能形成两种氨基酸起始,终止,密码,统一 9.tRNA 10.tRNA,aa-tRNA 11.反密码
组成的多肽，这里是val-cys；12. ×原核生物的起始密码子是子,aa-tRNA 合成 12.延
AUG和GUG 13. ×核糖体再翻译的起始阶段需要游离的亚伸,A,EF-Ts 13.EF-G 14.RF,RF-1 15.肽基转移酶 16. 2
基，随后才结合成70S/80S颗粒，开始翻译进程，见page126 17 第四章生物信息的传递下-从mRNA到蛋白质练习题2 个 17.U,C,A,U,C 18.反密码子,氨基酸 19. m7Gppp,poly 或GGC做模板加入无细胞体系测其合成的多肽是由什么氨A 20.羧基,羟基或3‘-OH 基酸构成即可推知每个三联体的密码。
5. 答：蛋白质合成的过程分5步：氨基酸的活化；肽链合成
三、【单项选择题】 的起始；肽链的延伸；肽链合成的释放与终止；肽链合成后
的加工与处理。
1．以多聚C作模板加入无细胞合成体系时，新合成的多肽链是A.多聚Phe B.多聚Tyr C.多聚Pro D.多聚Ser 第四章生物信息的传递下-从mRNA到蛋白质2．对照密码表，当用UUGUGUGGU一段共聚核苷酸为模板
练习题3 时，所合成的多肽链是
A.Phe-Leu-Val B.Val-Cys-Gly C.Leu-Val-Cys D.Leu-Cys-Gly
【名词解释：】 3．下列三联体密码中，合成蛋白质的起始密码是
A.AUU B.AUG C. UAA D.CAA
1. 转译（translation）:以信使RNA为模板，以20种氨基酸为
4．AUG是唯一识别甲硫氨酸的密码子，它具有下列哪种重
原料，在蛋白质合成酶系的作用下合成蛋白质的过程。其过
要作用？
程包括氨基酸的活化与转运、肽链的起始、肽链的延长、肽
A.作终止密码子 B.作起始密码子
链合成的终止及合成后的加工与处理。
C.作肽链释放因子 D.识别tRNA部位
2. 遗传密码（genetic code）:核酸的碱基顺序与蛋白质的氨
5．与mRNA的ACG相对应的tRNA的反密码子是
基酸顺序之间的关系，即每三个碱基一组相应于一个氨基酸A.UGC B.TGC C.GCA D. CGU
或一个起始信号或一个终止信号（故又称三联体密码）。氨基6．对应于mRNA密码ACG的tRNA反密码应为
酸的特异密码子组携带着蛋白质合成的信息。它具有以下特A. AUG B. TGC C. GCA D. CGU
点：密码是无标点符号的；密码是不重叠的；密码具有简并7．蛋白质合成过程中,将发生
性；密码的第三位碱基具有较小的专一性；密码是近于通用 A. 氨基酸随机结合在tRNA上 B. 合成是从C端开始
的。 C. 肽链的延长有转肽酶的参与 D. 以上无正确答案
3.密码的简并性（degeneracy）:大多数氨基酸都可以具有几组8. 蛋白质的合成方向为:
不同的密码子，如UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG 6 A. 从C端→N端 B. N端→C端
组密码子都编码亮氨酸。这一现象称密码的简并。可以编码C. 定点双向进行 D. 以上都不对
相同氨基酸的密码子称为同义密码子（synonymcodon）。密码9．tRNA的反密码子GCC对应的密码子是：
的简并性具有重要的生物学意义，它可以减少有害的突变； A. 5‘-GGC-3 B. 5‘-TGC-3‘ C. 5‘-GCA-3‘ D. 5‘-CGT-3‘
也可使DNA上碱基组成有较大的变化余地，而仍然保持多肽10．正常出现肽链终止是因为：
上氨基酸序列不变，所以密码简并性在物种的稳定上起一定 A. 一个与链终止三联体相应tRNA不能带氨基酸
作用。 B. 不具有与链终止三联体相应的反tRNA
4.多核糖体（polyribosome）:是由RNA分子与一定数目的单 C. mRNA在链终止三联体处停止合成 D. 以上无正确
个核糖体结合而成的，形成念珠状。两个核糖体之间有一段答案：1.C 2.D 3.B 4.B 5.D 6.D 7.C 8.B 9.A 10.B
裸露的RNA。每个核糖体可以独立完成一条肽链的合成，所
四、【简要答题】 以在多核糖体上可以同时进行多条肽链的合成，提高了翻译
的效率。
1．简答核糖体的结构与功能。 5.氨基酸的活化（activation）: 氨基酸在掺入肽链之前必须活2．简答tRNA在蛋白质合成过程中的功能。 化以获得额外的能量。活化反应是在氨酰-tRNA合成酶3.什么是―三联体密码‖？mRNA上的遗传密码为（aminoacy–tRNA synthetase）催化下进行的。活化必须由ATPAUGGACGAAUAGUGA时，多肽链的氨基酸排列顺序为 ? 提供能量，活化后产生氨酰-tRNA。氨酰-tRNA合成酶具专4．以G、C两种多个核苷酸任意排列的共聚多核苷酸作模板一性，主要表现在：一是对氨基酸有极高的专一性，每种氨时，可出现哪几种三联体？怎样测知每个三联体所代表的密基酸都有一个专一的酶；二是只作用于L-氨基酸，不作用于码氨基酸？ D-氨基酸。 5．简述蛋白质生物合成的过程。 6.起始复合物（initiation complex）:在蛋白质合成期间形成【参考答案】：1. 答：核糖体是由多种蛋白质和核糖体RNA的复合物，它包括信使RNA，核糖体的大小亚基，N-甲酰甲结合而成的核蛋白体颗粒,有大小两个亚基组成.其功能是参硫氨酸-tRNA或 甲硫氨酸-tRNA（占居核糖体的肽基部位，与蛋白质的合成的启动,肽链的延伸、终止等过程，但这种合即P位）。复合物的形成是GTP提供能量和起始因子的作用成过程必须与mRNA结合后才能发挥作用，即核糖体的小亚下完成的。
基有与mRNA结合的能力，负责对顺序的特异识别。大亚基7.信号肽（signal sequence）:在某些蛋白质合成过程中，在氨上有两个结合tRNA的位点，一个为供位或称肽酰基位（P基末端额外生成15-30个氨基酸组成的信号序列，用以引导位点）可与延伸中的多肽酰-tRNA结合；另一种称受位或氨合成的蛋白质前往细胞的固定部位。这种信号序列称为信号基酰位点（A位点），可与新掺入的氨酰-tRNA结合。两位点肽。其特点有：氨基端至少有一个带正电荷的氨基酸；中部是活化氨基酸准确地入座和形成肽链的位置。 具有高度疏水性的氨基酸组成；C-端有一个可被信号肽酶识2. 答：识别特异性很强的AA-tRNA合成酶，并在此酶的作用别的为点。现研究发现，信号肽的位置也不一定在新生肽的下结合氨基酸；识别核糖体，将带有氨基酸的tRNA结合到N-端。有些蛋白质（如卵清蛋白）的信号肽位于多肽链的中核糖体上面；以其反密码解读mRNA上的密码，以将携带的部，但其功能相同。 氨基酸放在多肽链的适当位置；识别起始密码子和校正 mRNA上因缺少或插入一个核苷酸发生无义或错义突变。 第五、六章 分子生物学研究方法练习题1 3. 答：mRNA上每三个核苷酸释成蛋白质多肽链上的一个氨
基酸，称这三个核苷酸为三联体密码。多肽链的顺序为：一、【单项选择题】 Met-Asp-Glu。
4.答：出现GGG、GGC、GCG、CGC、CCC、CCG、CGG、1.一般的限制性核酸内切酶II作用的特点不包括 GCC等八种三联体。以多聚C或G和特定多聚CG或CCGA.在对称序列处切开DNA 18
B.DNA两链的切点常不在同一位点 14.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是 C.酶切后产生的DNA片段多半具有粘性末端 A.大肠杆菌表达体系 B.原核表达体系 D. DNA两链的切点常在同一位点， C.酵母表达体系 D.昆虫 E.酶辨认的碱基一般为4-6个 E.哺乳类细胞表达体系， 2.限制性核酸内切酶 15.限制性核酸内切酶切割后产生 A.可将单链DNA任意切断 A. 3‘-磷酸基末端和5‘-羟基末端 B.可将双链DNA序列特异切开， B. 5‘-磷酸基末端和3‘-羟基末端, C.可将两个DNA分子连接起来 C. 3‘-磷酸基末端和5‘-磷酸末端 D.不受DNA甲基化影响 D. 5‘-羟基末端和3‘-羟基末端 3.cDNA文库包括该种生物的 E. 3‘-羟基末端和5‘-羟基末端及磷酸 A.某些蛋白质的结构基因, 16.下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是 B.所有基因组 A.小型环状双链DNA C.结构基因与不表达的调控区 B.携带有某些抗生素抗性基因 D.内含子和调节区 C.在细胞分裂时恒定地传给DNA E.内含子和外显子 D.具有自我复制功能, 4.下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的 E.获得目的基因 A.从特定组织或细胞中提取mRNA 17.在分子生物学上“分子克隆”主要是指 B.将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬A.DNA的大量复制， B.DNA的大量转录 C.DNA的菌体或质粒中, 大量剪切 D.RNA的大量剪切 C.用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNA E.RNA的大量反转录 D.用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA 18.在分子生物学上“重组DNA技术”又称为 5.限制性核酸内切酶的通常识别序列是 A.酶工程 B.蛋白质工程 C.细胞工程 A.粘性末端 D.发酵工程 E.分子克隆技术， B.RNA聚合酶附着点 19.在重组DNA技术中通常不涉及的酶是 C.回文对称序列, A.限制性核酸内切酶 B.DNA聚合酶 D.多聚腺苷酸 C.DNA连接酶 D.反转录酶 E.DNA解链酶， E.甲基化的―帽‖结构 20.多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为 7.用于转染哺乳类细胞的常用载体是 A.平行末端 B. 3‘-突出末端 A.质粒 B.噬菌体 C.逆转录病毒RNA, C.5‘-突出末端 D.粘性末端， E.缺口末端 D.结构基因 E.乳糖操纵子 21.cDNA是指 8.转化常指 A.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA， A.噬菌体感染 B.基因转位 B.在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA C.摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变, C.在体外经转录合成的与DNA互补的RNA D.产生点突变 E.产生移码突变 D.在体外经反转录合成的与RNA互补的RNA 9.基因工程的操作程序可简单地概括为 E.在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA A.载体和目的基因的分离、提纯与鉴定 22.基因组代表一个细胞或生物的 B.分、切、连、转、筛， A.部分遗传信息 B.整套遗传信息， C.可转录C.将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株 基因 D.将载体和目的基因接合成重组体 D.非转录基因 E.可表达基因 E.限制性核酸内切酶的应用 23.在基因工程中通常所用的质粒存在于 10.用于基因治疗较为理想的载体是 A.细菌染色体 B.酵母染色体 A.质粒 B.噬菌体 C.经改造的逆转录病毒， C.细菌染色体外， D.酵母染色体外 D.人类DNA E.酵母质粒 E.病毒DNA外 11.常用质粒有以下特征 25.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是 A.是线性双链DNA A.化学合成法 B.基因组文库法 C.cDNA文库法 B.插入片段的容量比λ噬菌体DNA大 D.PCR E.差异显示法 C.含有抗生素抗性基因， 26.EcoRⅠ切割DNA双链产生 D.含有同一限制性核酸内切酶的多个切口 A.平端 B. 5‘突出粘端，C. 3‘突出粘端 E.不随细菌繁殖而进行自我复制 D.钝性末端 E.配伍末端 12.在重组体中切出插入片段最常用的方法 27.PCR主要的酶是 A.以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出， A.DNA连接酶 B.反转录酶 B.用其它限制性酶将其切出 C.末端转移酶 D.碱性磷酸酶 C.用S1核酸酶将其切出 E. Taq DNA聚合酶 D.用DNA酶将其切出 28.重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶 E.用多种限制性核酸内切酶将其切出 A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶 13.利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是 C.DNA连接酶 D.RNA连接酶 A. 反应体系内存在特异DNA片段 E.限制性核酸内切酶 B. 反应体系内存在特异RNA片段 29.以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称 C. 反应体系内存在特异RNA引物， A.转化 B.转染 C.感染 D.转导 E.转位 D. 反应体系内存在特异DNA引物 30.最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是 E.反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列A.营养互补筛选 B.抗药性筛选， 的作用 C.免疫化学筛选 D.PCR筛选 19
E.分子杂交筛选 C.只与靶核酸序列杂交
33.用于重组DNA的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的 D.探针长度可以是几十个碱基到几千个碱基不等 E.A.正超螺旋结构 B.负超螺旋结构 高灵敏度 C.α-螺旋结构 D.回文结构， E.锌指结构 48.探针的种类包括 34.构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的 A.基因组DNA探针 B.cDNA探针 A.染色体DNA B.线粒体DNA C.寡核苷酸探针 D.RNA探针 E.以上均是， C.总mRNA D.tRNA E. rRNA 49.常用的标记物没有 36.在基因工程中可用碱性磷酸酶 A.放射性核素 B.生物素 C.荧光素 A.防止DNA的自身环化， D.地高辛 E.NTP B.同多核苷酸激酶一起进行DNA3‘-羟基末端标记 50.用于标记核酸探针的放射性同位素没有 C.制备突出的3‘-末端 A.32P B.35S C.3H D.125I E.14C， D.特异切除DNA或RNA的3‘-羟基末端 51.非放射性同位素标记物 E.水解特异的核苷酸片段 A.生物素 B. 荧光素 C. 地高辛 37.S1核酸酶的功能是 D.某些特殊酶类 E.核酸 A.切割双链的DNA B.切割单链的RNA， C.52.PCR技术主要应用于 切割发夹环， A.目的基因的克隆 B.基因表达与调控 C.DNA微D.切割单链DNA E.以上有两项是正确的， 量分析D.遗传病与传染性疾病的诊断 38.DNA聚合酶的主要用途 E.以上均可以 A.利用它的3‘→5‘聚合活性，合成ds-DNA第二条链 53.关于PCR停滞的原因取决于很多因素，但除外 B.对DNA的5‘端进行填补或末端标记 A.样品模板的拷贝数
C.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移，制作DNA标记探B.PCR扩增效率 C.DNA聚合酶种类及活性 针 D.dNTP的大量消耗 E.非特异性的竞争因素 D.DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序 54.用于鉴定转化子细胞是否含有重组DNA的最常用方法是 E.TaqDNA聚合酶用于PCR A.抗药性选择 B.分子杂交选择 C.RNA反转录 39.基因工程中作为载体应具备以下特点 D.免疫学方法 E.体外翻译 A.能在宿主细胞中复制繁殖 B.容易进入宿主细胞 55.下列哪一步是DNA芯片技术的最关键环节 C.具有多克隆位点 A.样品的准备与标记 B.芯片的制备 C.信号的检D.容易从宿主细胞中分离出来 E.以上均是， 测 40.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大 D.数据的分析处理 E.杂交 A.质粒 B.粘粒 C.酵母人工染色体， 57.质粒pBR322含有耐四环素(tet-r)和耐氨苄青霉素(amp)基D.λ噬菌体 E.cDNA表达载体 因,如将目的基因插入tet-r基因构成重组体,转化宿主菌,则筛42.Southern印迹的DNA探针杂交 选结果是,含此重组体的转化菌 A.只与序列完全相同的RNA片段 A.在含tet或amp的培养基中均能生长 B.可与任何含有相同序列的DNA片段 B.在含tet或amp的培养基中均不能生长 C.可与任何含有互补序列的DNA片段， C.在含tet的培养基中能生长,在含amp的培养基中不能生长 D.可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段 D.在含amp的培养基中能生长, 在含tet的培养 E.只与含有互补序列的RNA片段 基中不能生长 43.利用基因工程可以进行 E.在不含tet或amp的培养基中生长不良 A.建立染色体基因文库 【单项选择题参考答案】 B.分析基因的结构和功能 一、选择题 C.疾病的发生、发展及治疗的分子机制 1.D 2.B 3.A 4.B 5.C 7.C 8.C 9.B D.疾病的诊断和基因治疗 10.C11.C 12.A 13.C 14.E 15.B 16.D 克隆载体强调E.以上均可以， 的是克隆即大量复制 17.A 18.E 19.E 20.D21.A 22.B 44.下列哪个不是Southern印迹的步骤 23.C 25.D 26.B 27.E 28.C 29.A 30.B 33.D A.用限制性核酸内切酶消化DNA 34.A 36.A 37.ES1核酸酶的主要功能是，催化RNA和B.DNA与载体连接， 单链DNA分子降解成为5′单核苷酸。同时它也能作用于双链C.用凝胶电泳分离DNA片段 核酸分子的单链区，并从此处切断核酸分子 38.E 39.E D.DNA片段转移至硝酸纤维膜上 40.C42.C 43.E 44.B 45.E 46.E 47.B 48.E 49.E E.用一个标记的探针与膜杂交 50.E 51.E 52.E 53.D 55.B 57.D 58.E 45.下列哪个不是Northern印迹的步骤
二、【名词解释】 A.从细胞和组织中提取RNA
B. 用凝胶电泳分离RNA
1.DNA重组：不同来源的DNA分子可以通过末端共价连接C.将RNA转移到支持物上 D.用探针进行杂交
（磷酸二酯键）而形成组合的DNA分子，这一过程称为DNAE.将RNA反转录合成DNA，
重组。 46.原位杂交具有以下特点
A.不需要从组织和细胞中提取核酸
2.基因工程：利用重组DNA技术将目的DNA片段与载体
B.对靶序列有很高的灵敏度
DNA连接并导入宿主细胞，在受体细胞中复制、扩增、以获
C.可完整保护组织与细胞的形态
得单一DNA分子的大量拷贝。这种有单一DNA重组体的无
D.准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态
性系称为克隆。其中，将基因进行克隆，并利用克隆的基因
E.以上均是
表达、制备特定的蛋白或多肽产物，或定向改造细胞乃至生
47.下列哪项不是探针的特点
物个体的特性所用的方法及相关的工作统称为基因工程
A.要加以标记 B.应是双链DNA， 20