重庆市华鼎现代生物制药有限责任公司 Chongqing Huading Modern Biological Pharmaceutical Co.,LTD
标准操作规程
岛津LC-10ATvp色谱工作站操作规程 登记号 编制者/日期 审核者/日期 批准者/日期 变更记录 修订号： 批准日期： 执行日期： HD-WS-03-590-00 共 8 页 生效日期 回顾日期 颁发部门 GMP认证小组 变更原因 Copy NO. 分发部门 财 务 部 [ ] 审 计 部 [ ] 行 政 部 [ ] 营 销 部 [ ] 物料管理部 [ ] 质量管理部 [√] 设备动力部 [ ] 生产技术部 [ ] 水针剂车间 [ ] 原料药车间 [ ] 固体制剂车间[ ] 重庆市华鼎现代生物制药有限责任公司 HD-WS-03-590-00 8-1
1 目的：制定岛津LC-10Atvp色谱工作站操作规程，确保操作人员正确使用色谱仪。
2 适用范围：适用于岛津LC-10Atvp色谱工作站操作。 3 责任者：岛津LC-10Atvp色谱工作站操作者。 4 正文：
4.1仪器组成及开机
4.1.1仪器组成 LC-10Atvp泵、SIL-10Advp自动进样器、SCL-10Avp系统控制器、CTO-10Avp柱箱控制箱、SPD-10AvpUV-VIS紫外-可见检测器、CLASS-VP （Ver.6.12）LC工作站、EPSON Stylus C41打印机，各仪器均有独立电源开关。
4.1.2 开机 依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器、打印机、系统控制器、工作站的电源开关。 4.2 工作站启动及仪器配置 4.2.1 工作站启动
电脑自检后，在Windows98开始菜单下，双击CLASS-VP窗口，显示Shimadzua CLASS-VP主菜单，双击Instrument 1,显示仪器注册对话框，输入用户名及密码，然后Login ,进入仪器模式窗口，将会有“滴”的一声，表示工作站已经通过系统控制器与各组成仪器连接。 4.2.2 仪器配置
4.2.2.1 选择File>Configure,显示Instrument Configuration (仪器配置)对话框，输入instrument name及instrument type,然后单击Configure ,显示一个Shimadzu HPLC system Configuration(系统配置)对话框。
4.2.2.2在Shimadzu HPLC system Configuration(系统配置)对话框中双击左框中要选择的仪器图标或单击该图标后，再单击顶端绿色箭头，将它移到右边的Configure modules(设置模式)框中。
4.2.2.3 对于每个设置的模式，双击响应图标并完成配置对话框。 4.2.2.4 单击OK，退出Instrument 1至Class-vp主菜单，再重新进入Instrument 1，使设定的仪器系统生效。
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4.3 仪器参数的设定和启动 4.3.1 泵和柱温箱的参数设置
4.3.1.1 选择Method>Instrument set up,显示仪器设置对话框。
4.3.1.2 单击对话框Pumps,在mode下拉菜单中选择流速方式，包括：Isocratic(等度)、Binary gradient (梯度洗脱)、Low Pressure Gradient(低压梯度)三种方式；此外需设置最大压力、最小压力、流速。设定完毕，单击Apply 确认。
4.3.1.3 单击对话框Time Program,设定时间程序。 4.3.1.4 单击对话框CTO-Avp柱温控制，设定柱温。 4.3.1.5 单击Apply，确认以上设定。退出。 4.3.2 检测器参数设定
4.3.2.1 选择Method>PDA set up ，显示其对话框。
4.3.2.2 单击对话框中的General标签，设置数据收集参数，包括波长范围，灯的类型，采样频率，周期，采样时间以及图谱存储方式。其中图谱存储方式有3D和 Multi Chromatogram两种方式，一般情况选择多波长方式，以便减少文件占有的存储空间。单击Apply确认。
4.3.2.3 单击Multi标签，设置检测波长。首先单击通道号右边的Active方框，（出现红色标记），然后为每个通道输入检测波长，宽度。利用此项可以根据需要进行单波长或多波长的测定。 4.3.2.4 单击Apply,确认以上设定，退出。
4.3.2.5 系统设定完毕后，为使系统按设定条件运行，单击control >download method装载设定的方法后再击活系统，此时，在提示是否保存当前方法的对话框中选择Yes。
4.3.2.6 方法设定完毕后，应在File-Method-SaveAs中存储方法。 4.3.3 启动各仪器
4.3.3.1 选择Control>Direct control,屏幕显示一排直接控制工具栏图标按钮。 4.3.3.2 按下工具栏图标中的控制器图标按钮、灯图标按钮，即可开启泵、检测器和柱温控制箱。
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注：开泵前需更换流动相：打开旁路阀，用针管抽出约20ml流动相，或者按下泵控制面板上的purge键，自动冲洗泵，冲洗完毕，关上旁路阀。（若使用自动进样器，每日工作前也应打开进样器内部右下角的帝路阀，用注射器抽出10ml清洗液，再旋紧旁路阀。） 4.4 采集数据
4.4.1 选择Control-Preview Run，观察基线，等待基线走稳。
4.4.2 基线走稳后，选择Control-Single Run显示Singli Run Acquisition对话框，在对话框中设置Date path,Date file,Vial,Injection volumn,然后单Start,开始自动单一进样。
4.4.3 选择View>Gallery观察即时色谱图，视图的显示方式有：三维图、混合视图、混合视图W/3D、等高线图、三维和等高线图、光谱图、多色谱图示、比例图。
4.4.4 使用Control菜单中的Extend Run或Stop Run来调整采样时间，使各组分峰采集完整。
4.4.5 根据完整采样所需的时间，打开Method>PDA Set Up,修改run time. 4.5 积分参数的设定
4.5.1 在色谱图上单击鼠标左键，激活屏幕下方的积分参数工具栏图标按钮。
4.5.1.1 按下要设定的积分参数图标按钮，然后按照状态栏的提示进行对话框的操作，设定积分参数并自动添加入Integration Events tablets。积分参数使用的对话框基本形式（图3）
Start/Stop time 与予设值有同时，输入积分参数的的开始和结束时间 Value 与予设值不同时，输入积分参数的值。
Insert into integration Events table 选择此项可向积分参数表中添加参数。 单击 Add to Table ，将积分参数添加入积分参数表中。
4.5.1.2 积分参数包括Width(宽度)、Slope（斜率）、Drift(漂移)、T.DBL（极限）、Lock On/Off (积分关闭)、Tailling On/Off（拖尾峰切除）、Horizontal Baseline(水平基线)、Leading peak reject on/off(前沿峰切除)、Minimum
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Area(最小峰面积)、Negative Peak reject On/Off（负峰切除）、Negative Peak invert On/Off(负峰转换)等。
注意：在添加积分参数的时候，要保持窗口的检测波长选择通道处于正在使用的检测波长，否则积分参数的添加无法在积分参数表中看到。 4.5.2 打开Method>Intergration Events 菜单查看积分参数表。
4.5.3 选择Anlysis-Analyze 用所设定的积分参数对该色变图进行分析，根据要求适当调整积分参数，直至分析结果达到要求。 4.6 peak/Group Tables (峰表)的设定
4.6.1 在色谱图上单击鼠标左键，激活积分事件工具栏图标按钮，近下工具栏中的Define Peak 图标按钮，然后按状态栏的提示进行对话框的操作，将需要测不定期的峰的保留时间及保留时间窗口自动添加至峰表中。 4.6.2 选择Method-Peak/Group Table图标按打开峰表。
4.6.3 在峰表中输入要校准的信息，其中ID、Ret、Window已经自动添加，其他需输入的内容包括： Name Units
峰代表的各组分名称 内标法内标峰的ID号 报告结果的浓度单位 选择使用的检测通道
选择标准曲线的类型，包括point to point(点到 点)、quadratic（二次的）、cubic（三次的）、Average RF（平均RF）几种方式
Zero
选择此框后，强制校准曲线通过零点 选择Weight Average
输入每份取样的各组分以及内标物质的量
Calib Flag Level 1-10 4.6.4 退出 4.7 编制模式
4.7.1 选择Methld>Coustom Report打开编制报告窗口。 ISTD ID#
Analysis Channel Fit Type
如果需要添加或修改其他信息或参考说明书。