7 试验报告
试验报告应包括如下内容：
（1）受试物名称、理化性状、配制方法、所用浓度；
（2 ）实验动物的种属、品系和来源（注明合格证号和动物级别）；
（3 ）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物房合格证号； （4 ）所用剂量和动物分组，每组所用动物性别、数量及体重范围；
（5 ）染毒后动物中毒表现和死亡情况及出现时间，大体解剖及病理所见； （6 ）计算LD50 的方法；
（7 ）列表报告结果和计算LD50 及其95%可信区间（建议的表格形式见表2 ）； （8 ）结论。
8 试验结果的解释
急性经皮毒性试验研究和经皮LD50 的确定提供了受试物经皮染毒的毒性。其结果外推到人类的有效性很有限。急性经皮毒性试验的结果应与经其它途径染毒的急性毒性试验结果相结合进行综合评价。
四、皮肤刺激性/腐蚀性试验
Dermal Irritation/Corrosion Test 1 范围
本规范规定了动物皮肤刺激性或腐蚀性试验的基本原则、要求和方法。 本规范适用于化妆品原料及其产品安全性毒理学检测。 2 规范性引用文件
OECD Guidelines for Testing of Chemicals （No.404 ，April 2002 ）
USEPA OPPTS Harmonized Test Guidelines （Series 870. 2500，Aug. 1998 ） 3 试验目的
确定和评价化妆品原料及其产品对哺乳动物皮肤局部是否有刺激作用或腐蚀作用及其 程度。 4 定义
4.1 皮肤刺激性（Dermal irritation ）：皮肤涂敷受试物后局部产生的可逆性炎性变化。 4.2 皮肤腐蚀性（Dermal corrosion ）：皮肤涂敷受试物后局部引起的不可逆性组织损伤。 5 试验的基本原则
将受试物一次（或多次）涂敷于受试动物的皮肤上，在规定的时间间隔内，观察动物皮 肤局部刺激作用的程度并进行评分。采用自身对照，以评价受试物对皮肤的刺激作用。急性 皮肤刺激性试验观察期限应足以评价该作用的可逆性或不可逆性。
动物如果在试验的任何阶段出现严重抑郁、痛苦的表现，则应该给予人道地处死。依据 试验情况对受试物进行适当评价。 6 试验方法
6.1 受试物
液体受试物一般不需稀释，可直接使用原液。若受试物为固体，应将其研磨成细粉状， 并用水或其它无刺激性溶剂充分湿润，以保证受试物与皮肤有良好的接触。使用其它溶剂， 应考虑到该溶剂对受试物皮肤刺激性的影响。需稀释后使用的产品，先进行产品原型的皮肤 刺激性/腐蚀性试验，如果试验结果显示中度以上刺激性，可按使用浓度为受试物再进行皮 肤刺激性/腐蚀性试验。
受试物为强酸或强碱（pH 值≤2 或≥11.5），可以不再进行皮肤刺激试验。此外，若已 知受试物有很强的经皮吸收毒性，经皮LD50 小于200mg/kg 体重或在急性经皮毒性试验中受试物剂量为2000mg/kg 体重仍未出现皮肤刺激性作用，也无需进行急性皮肤刺激性试验。 6.2 实验动物和饲养环境
多种哺乳动物均可被选为实验动物，首选白色家兔。应使用成年、健康、皮肤无损伤的 动物，雌性和雄性均可，但雌性动物应是未孕和未曾产仔的。实验动物至少要用4 只，如要澄清某些可疑的反应则需增加实验动物数。实验动物应单笼饲养，试验前动物要在实验动物房环境中至少适应3d 时间。
实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。选用常规饲料，饮水不限制。 6.3 急性皮肤刺激性试验步骤
6.3.1 试验前约24h ，将实验动物背部脊柱两侧毛剪掉，不可损伤表皮，去毛范围左、右各约3cm×3cm 。
6.3.2 取受试物约0.5mL（g）直接涂在皮肤上，然后用二层纱布（2.5cm×2.5cm ）和一层玻璃纸或类似物覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定。另一侧皮肤作为对照。采用封闭试验，敷用时间为 4h 。对化妆品产品而言，可根据人的实际使用和产品类型，延长或缩短敷用时间。对用后冲洗的化妆品产品，仅采用2h 敷用试验。试验结束后用温水或无刺激性溶剂清除残留受试物。
如怀疑受试物可能引起严重刺激或腐蚀作用，可采取分段试验，将三个涂布受试物的纱 布块同时或先后敷贴在一只家兔背部脱毛区皮肤上，分别于涂敷后3min、60min 和4h 取下 一块纱布，皮肤涂敷部位在任一时间点出现腐蚀作用，即可停止试验。
6.3.3 于清除受试物后的1、24 、48 和72h 观察涂抹部位皮肤反应，按表1 进行皮肤反应评分，以受试动物积分的平均值进行综合评价，根据24 、48 和72 h 各观察时点最高积分均值， 按表2 判定皮肤刺激强度。
6.3.4 观察时间的确定应足以观察到可逆或不可逆刺激作用的全过程，一般不超过14d。 6.4 多次皮肤刺激性试验步骤
6.4.1 试验前将实验动物背部脊柱两侧被毛剪掉，去毛范围各为 3cm×3cm ，涂抹面积 2.5cm×2.5cm 。
6.4.2 取受试物约 0.5mL（g ）涂抹在一侧皮肤上，当受试物使用无刺激性溶剂配制时，另一侧涂溶剂作为对照，每天涂抹1 次，连续涂抹14d。从第二天开始，每次涂抹前应剪毛，用水或无刺激性溶剂清除残留受试物。一小时后观察结果，按表1 评分，对照区和试验区同样处理。 6.4.3 结果评价：按下列公式计算每天每只动物平均积分，以表2 判定皮肤刺激强度。
7 试验报告
试验报告应以表格形式总结，包括如下内容：
（1）受试物名称、理化性状、配制方法和用量。必要时说明受试物的pH 值； （2 ）实验动物的种属、品系、性别、体重和来源（注明合格证号和动物级别）； （3 ）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物房合格证号； （4 ）每个动物在每一观察时点的皮肤刺激反应积分； （5 ）具体描述除刺激性以外的其它毒性作用； （6 ）结论。 8 试验结果的解释
急性皮肤刺激试验结果从动物外推到人的可靠性很有限。白色家兔在大多数情况下对有 刺激性或腐蚀性的物质较人类敏感。若用其它品系动物进行试验时也得到类似结果，则会增 加从动物外推到人的可靠性。试验中使用封闭式接触是一种超常的实验室条件下的试验，在 人类实际使用化妆品过程中很少存在这种接触方式。
五、急性眼刺激性/腐蚀性试验
Acute Eye Irritation/Corrosion Test 1 范围
本规范规定了动物急性眼刺激性或腐蚀性试验的基本原则、要求和方法。 本规范适用于化妆品原料及其产品安全性毒理学检测。 2 规范性引用文件
OECD Guidelines for Testing of Chemicals （No 405 ，April 2002 ） USEPA OPPTS Harmonized Test Guidelines （Series 870.2400，Aug.1998 ） 3 试验目的
确定和评价化妆品原料及其产品对哺乳动物的眼睛是否有刺激作用或腐蚀作用及其程 度。 4 定义
4.1 眼睛刺激性（Eye irritation ）：眼球表面接触受试物后所产生的可逆性炎性变化。 4.2 眼睛腐蚀性（Eye corrosion ）：眼球表面接触受试物后引起的不可逆性组织损伤。 5 试验的基本原则
受试物以一次剂量滴入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内，以未作处理的另一侧眼睛作 为自身对照。在规定的时间间隔内，观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分，以此评 价受试物对眼睛的刺激作用。观察期限应能足以评价刺激效应的可逆性或不可逆性。
动物如果在试验的任何阶段出现严重抑郁、痛苦的表现，则应该给予人道地处死，依据 试验情况对受试物进行适当评价。动物如出现角膜穿孔、角膜溃疡、角膜4 分超过48h 、缺乏光反射超过72h、结膜溃疡、坏疽、腐烂等情况，通常为不可逆损伤的症状，也应该给予人道地处死。 6 试验方法 6.1 受试物
液体受试物一般不需稀释，可直接使用原液，染毒量为0.1mL 。若受试物为固体或颗粒状，应将其研磨成细粉状，染毒量应为体积 0.1mL 或重量不大于 100mg （染毒量应进行记录）。 受试物为强酸或强碱（pH 值≤2 或≥11.5），或已证实对皮肤有腐蚀性或强刺激性时， 可以不再进行眼刺激性试验。
气溶胶产品需喷至容器中，收集其液体再使用。 6.2 实验动物和饲养环境
首选健康成年白色家兔。至少使用3 只家兔。试验前动物要在实验动物房环境中至少适 应3d 时间。在试验开始前的24h 内要对试验动物的两只眼睛进行检查（包括使用荧光素钠检查）。有眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损伤的动物不能用于试验。
实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。选用常规饲料，饮水不限制。 6.3 试验步骤
6.3.1 轻轻拉开家兔一侧眼睛的下眼睑，将受试物0.1mL（100mg）滴入（或涂入）结膜囊中，使上、下眼睑被动闭合 1s，以防止受试物丢失。另一侧眼睛不处理作自身对照。滴入受试物后24h 内不冲洗眼睛。若认为必要，在24h 时可进行冲洗。
6.3.2 若上述试验结果显示受试物有刺激性，需另选用3 只家兔进行冲洗效果试验，即给家兔眼滴入受试物后30s，用足量、流速较快但又不会引起动物眼损伤的水流冲洗至少30s 。 6.3.3 临床检查和评分：在滴入受试物后1、24 、48 、72h 以及第4d 和第7d 对动物眼睛进行检查。如果72h 未出现刺激反应，即可终止试验。如果发现累及角膜或有其它眼刺激作用，7d 内不恢复者，为确定该损害的可逆性或不可逆性需延长观察时间，一般不超过21d ，并提供第7d、14d、21d 的观察报告。除了对角膜、虹膜、结膜进行观察外，其它损害效应均应当