实验三 茶叶中氨基酸含量的测定
一、分析意义
氨基酸，是生物合成蛋白质的基本单位又是蛋白质分解的产物，在生物体内是重要的生物活性物质。氨基酸是可溶于水的含氮化合物，对茶叶品质有重要的影响，是公认的茶叶呈味物质，也是构成茶叶色香味的重要化学因子。 二、方法原理
氨基酸在pH8.04条件下与茚三酮共热，α－氨基酸能与茚三酮反应产生兰紫色缩合物，其反应过程按如下步骤进行：
三、样品、试剂与仪器设备
1、样品：不同等级绿茶。 2、pH8.04磷酸缓冲液：
先配制1/15M磷酸氢二钠和1/15磷酸二氢钾溶液(配制方法同实验二)。用时取1/15M的KH2PO4溶液5ml、1/15M的Na2HPO4溶液95ml混匀，即为pH8.04磷酸缓冲液。
3、2％茚三酮溶液：
称取2g水合茚三酮加50毫升蒸馏水，加氯化亚锡80毫克(SnCl2·2H2O)(AR
级)，搅拌均匀后，逐渐加水溶解，分次过滤，滤液在暗处放置一昼夜，加水定容至100ml。
4、主要仪器：分光光度计 四、测定步骤
1、供试液制备(同实验二) 2、定量
吸取供试液1ml，注入25ml容量瓶中，加0.5mlpH8.04的磷酸缓冲液，和0.5ml的2％茚三酮溶液，置于沸水浴中加热15min，待冷却后加水定容至25ml，10min后于570nm波长处，0.5cm比色杯测定吸光度A值。
3、计算：
氨基酸％＝
A×0.57 供试液总量（ml） × 1000 吸取液量（ml） 样品干重（g） ×100
注：“0.57”——用已知的不同浓度配制的茶氨酸，按上述操作程序测定吸光度，作标准曲线，当吸光度等于1.00时，每1ml供试液中含茶氨酸0.57mg。
注意事项
1、 比色液在1小时内吸光度较稳定，比色须在该时间内完成，不及放置过
久；
2、 沸水浴中加热15min时容量瓶一定要浸没浴沸水浴中，且打开瓶塞。