5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L) :称取 0.2 克盐酸萘乙二 分装,1 瓶/大 胺,溶于 100mL 水中,避光保存。有致癌作用 6、亚硝酸钠标准溶液(0.2g/L) :精密称取 0.1000g 于 硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠,加水溶解移入 分装,1 瓶/大 500ml 容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每 ml 相当于 组 200µg 亚硝酸钠。 7、亚硝酸钠标准使用液(0.2µg/mL) :临用前,吸取 5.00mL0.2 g/L 亚硝酸钠标准溶液,置于 200 mL 容量 分装,1 瓶/大 瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每 mL 相当于 5µg 亚 组 硝酸钠。 8. 蒸馏水 1 瓶/组 组
五、实验步骤 1、样品的处理: (1)取样:准确称取5.0 g经绞碎、混匀的样品,置于50mL烧杯中。 (2)沉淀蛋白质:①加12.5mL硼砂饱和溶液,搅拌均匀,以70℃左右的水 约300mL将样品洗入500mL容量瓶中,置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室 温。②一面转动一面加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液, 以沉淀蛋白质 (3)过滤:加水定容,放置0.5h,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤,弃去 初滤液30mL,滤液备用。 2 标准曲线的绘制和样品的测定 取10个25ml具塞比色管,标号,按下列步骤操作: 管号 0 1 2 3 4 5 6 7 8 样 20. 标准
溶液 0.00 0.10 0.20 0.30 0.40 0.50 0.75 1.00 1.25 00 (ml) 相当亚硝酸钠 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.75 5.00 6.25 (µ g) 对氨基苯磺酸 (ml) 各管均加 1ml(混匀,静置 3-5min) 盐酸萘乙二胺 (ml) 各管均加 0.5ml 加水至刻度(25 ml ),混匀,静置15min,以零管调节零点,于波长538nm 处测吸光度A,绘制标准曲线。 同时做试剂空白。 上层脂 肪用滴 管吸除。