西南科技大学生命科学与工程学院2006届毕业论文
表.9 正交实验的方差结果
K1 K2 K3 R
1.345 1.458 1.606 0.0114 1.443 1.516 1.45 0.0011 自由度f
2 2 2 2
1.555 1.489 1.365 0.006 均方和S/f 0.0057 0.003 0.0215 0.00055
1.202 0.499 1.708 0.043 F值 10.3636 5.4545 39.09
显著性 (*) **
方差来源
A B C 误差 偏方平方和S
0.0114 0.006 0.043 0.0011
*注:F0.01= 99 , F0.05=19,F0.10= 9.00
从上表可以看出,氮源对实验的影响最大,极为显著;其次是碳源,相比之下影响较小的是pH。
优化曲线0.70.6产量(g/100ml)0.50.40.30.20.10120.3280.480.5370.5630.4280.4670.5530.6080.4463产量456序号789
图7 生长优化图
由图7可以看出生物量先增加后又下降,然后又有回升的趋势,这是因为实验培养基所选用的玉米粉和黄豆饼粉溶解性差、粘度大,当质量浓度增加到一定值时,造成培养基溶氧下降,使菌丝生长受阻,所以出现了生物量先上升后反而下降的情况。从减小培养液的粘度考虑,再结合前而的可溶性碳氮源的质量浓度比实验。选定姬松茸的摇瓶最佳配方为:玉米2%、黄豆浆0.3%、KH2PO4 0.2%、MgSO4 0.1%、pH为6、温度27℃、转速130r/min,在这所有的最佳的条件下进行了,姬松茸菌体生长试验,其生长曲线见图8。
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0.5生长曲线图菌丝体产量 单位:g/100ml0.40.30.20.1010.20.090.032340.470.470.460.460.440.420.380.360.2956789101112
系列1生长天数图8 菌丝体生长曲线
由图8可见,姬松茸菌丝体在第2~4天长的最快,当在第11天时达到最多,随后有减少的趋势,大概是菌丝体的自溶现象。 3.
讨论
通过单因素和多因素的实验处理,取得了更加精确的菌丝生长条件,为实现菌丝的大规模发酵打下了坚实的基础。但也有一些与别人不同的地方,例如别人的pH值最佳是5~6[15],而我的是6~7之间菌丝更好;别人在氮源实验中使用的尿素几乎不能生长
[16]
,而我的则是生长长势很差,但还可以生长,原因在于我用的玉米做碳源,为菌丝
生长提供了氮源营养物质。在我的实验数据处理过程中,采用了表和图两种形式,对结果和分析更加直观和明了。不过在实验过程中,由于仪器的紧缺,以至于各个因素的种类较少。在以后的实验中,需要寻找更加廉价而不影响产率的物质和条件。 4.
结论与小结
姬松茸对碳源的利用较为广泛,对单糖 、多糖、农产品都能利用;而菌丝对有机氮比无机氮更利于菌丝生长。
适宜姬松茸液体培养的pH为6~7;500mL锥形瓶装液量为100mL,摇床转速最佳为130r/min,温度为27度,摇瓶最佳发酵时间为7d。
姬松茸最佳碳氮比是40:1,菌丝长势最好。
本研究筛选的最佳液体培养基的配方,生物量达0.608g/100mL,并且菌球数量多,体积小,比较适合用作菌种。
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致 谢
光阴飞逝,转眼间四年已经过去了。在我论文完成之时,我谨向这些年来指导、关心和帮助我的所有老师致以崇高的敬意,向关心和帮助我的所有同学和好朋友致以衷心的感谢!
本论文是在导师魏红福讲师的悉心指导下完成的。导师在我的学位论文选题、实验方案、答疑以及论文撰写等方面都倾注了大量的心血和汗水,在这期间,导师渊博的学识惠及了我,导师严谨的学风使我在潜移默化中收益匪浅。
在论文的实验过程中,生物0203班的颜学伦参与了我的部分实验,大三药学的刘远东和研二的王丽娟在实验过程中给了我很多宝贵的意见和建议,在此表示感谢。在实验仪器、试剂和场地的使用上,特别要感谢姚老师。同时也要感谢学校给了我这样一个好的实验和学习的地方。
最后要感谢在家乡辛苦的爸爸和妈妈,在我的学习期间给了我无私的爱和给了我很多支持,这些都是我今生以来最大的财富。
侯 华 二零零六年六月 西南科技大学
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