生化及分子生物学复习资料(2)

2018-11-21 23:33

下一轮作用。

(4)肽链在穿过转位蛋白形成的内质网孔时,信号肽被信号肽酶切除。合成的新生肽链进入内质网腔后折叠成最终构象。

简并性;多核糖体;SD序列;

十二、基因工程 本章重点

1、DNA克隆的概念 2、DNA重组的基本步骤

3、目的基因获取的方法(PCR) 4、基因治疗

习题:1、原核生物基因组结构特点?

(1)基因组较小,没有核膜包裹,且形式多样。细菌染色体基因组则常为环状双链DNA分子,并与其中央的RNA和支架蛋白构成一致密的区域,称为类核(nucleoid)。?

(2)功能相关的结构基因常常串连在一起,并转录在同一个mRNA分子中,称为多顺反子。

(3)DNA分子绝大部分用于编码蛋白质,不编码部分(又称间隔区)通常包含控制基因表达的顺序。 (4)基因重叠是病毒基因组的结构特点,即同一段DNA片段能够编码两种甚至三种蛋白质分子,除真核细胞病毒外,基因是连续的,即不含内含子序列。 2、DNA克隆过程?

答:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质——同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工合成的DNA,与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增获得大量同一DNA分子。 3、PCR的基本过程?

答:PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③新链的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。

基因治疗;PCR;限制性内切酶

基因治疗:向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因,以纠正或补偿其基因缺陷,从而达到治疗的目的。

十三、基因表达调控 本章重点:

1、乳糖操纵子、色氨酸操纵子

习题:1、乳糖操纵子的调节机制?

(1)负调节:阻遏蛋白。该蛋白由调节基因(I)最先表达合成,与操纵子(O)结合阻止转录;与乳糖结合失活。

(2)正调节:CAP(降解物基因活化蛋白)。乳糖操纵子的启动子是弱启动子,RNA聚合酶与其结合的能力很弱,只有活化的CAP(与cAMP结合)结合到启动子上游的CAP位点后,促使RNA聚合酶与启动子结合,才能开始有效转录。

(3)协调调节:负调节和正调节协调作用。 2、色氨酸操纵子的调节机制?

答:色氨酸操纵子的调节可分为两个层次:1、阻遏蛋白的负调节;2、衰减调节。

(一) 阻遏蛋白的负调节:色氨酸操纵子的调节机制与乳糖操纵子类似,但通常情况下,操纵子处于

开放状态,其辅阻遏蛋白不能与操作子结合而阻遏转录。而当色氨酸合成过多时,色氨酸作为辅阻遏物与辅阻遏蛋白结合而形成阻遏蛋白,后者与操作子结合而使基因转录关闭。

(二) 衰减调节:色氨酸操纵子第一个结构基因前存在有一段前导序列,其中有一衰减区域,当细胞内

色氨酸酸浓度很高时,通过与转录相偶联的翻译过程,形成一个衰减子结构,使RNA聚合酶从DNA上脱落,导致转录终止。

看家基因;顺式作用元件;反式作用因子

十四、代谢调节 本章重点:

1、糖类和脂类的相互转变; 2、糖类和蛋白质的相互转变;

习题:1、糖类与脂类的如何相互转变?

答:糖可通过下述途径转变成脂类:糖分解代谢的中间产物磷酸二羟丙酮可还原生成磷酸甘油。另一中间产物乙酰CoA则可合成长链脂肪酸,此过程所需的NADPH+H+又可由磷酸戊糖途径供给。最后脂酰CoA与磷酸甘油 酯化而生成脂肪。

脂肪转化成糖由于生物种类不同而有所区别。在动物体内,甘油可经脱氢生成磷酸二羟丙酮再通过糖异生作用转变为糖。脂肪酸在动物体内也可转变成糖,但需要在有其他来源的三羧酸循环中间有机酸回补时,乙酰CoA才可转变为草酰乙酸,再经糖异生作用转变为糖。植物和微生物存在乙醛酸循环,脂肪降解产生的乙酰CoA通过乙醛酸循环生成琥珀酸,后者转成草酰乙酸后进入糖异生作用生糖。但这一过程在植物中主要发生在含脂肪种子萌发时。

限速反应;前馈和反馈调节

十五、重要生物化学名词英文缩写

ACP (d)AMP ADP ATP CAMP CGMP CoA CoQ CMP CDP CTP DNA RNA EC ETC EMP FH4 FAS FAD FADH2 FMN GMP GDP GTP IU IF Km UDPG mRNA rRNA tRNA NADH NADPH PCR PPP pI RNase hnRNA SSB Tm EMP TCA PPP UMP UDP UTP 二十种基本蛋白质氨基酸英文三字母简写


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