第二章 工业微生物菌种的选育、保藏与培养
第一节 工业微生物常用菌种
发酵工业对菌种的要求如下:
① 能在廉价原料制成的培养基上生长,且生成目的产物产量高、易于回收;
② 生长较快,发酵周期短; ③ 培养条件易于控制;
④ 抗噬菌体及杂菌污染的能力强;
⑤ 菌种不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定; ⑥ 对放大设备的适应性强;
⑦ 菌种不是病原菌,不产生任何有害的生物活性物质和毒素。
工业微生物常用菌种类型包括细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等。
(一)细菌
1、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)
分布广,常存在于枯草、土壤等,一般为腐生菌;在酱油、酱类和白酒制曲时,如果水分含量大,温度较高,就容易造成枯草杆菌迅速繁殖;不仅消耗原料蛋白质和淀粉,而且生成刺眼鼻的氨味,造成曲子发粘发臭,使制曲失败。能产生大量淀粉酶和蛋白酶。
枯草芽孢杆菌图
2、大肠杆菌(Escherichia coli)
可利用大肠杆菌制取天冬氨酸、苏氨酸、缬氨酸等。大肠杆菌的谷氨酸脱羧酶在工业上被用来进行谷氨酸的定量分析, 是基因工程的很好材料。
大肠杆菌图
3、 乳酸杆菌(Lactobacillus sp.)
革兰氏阳性,无芽孢,厌氧或兼性厌氧可生产乳酸,常用于干酪的成熟、乳脂的酸化和腌菜、泡菜制作。
4、 丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutyleum)
芽孢卵形,中生或次端生,使芽孢囊膨大成梭状或鼓槌形,专性厌氧,发酵生产丙酮丁醇。
5、 肠膜状明串珠菌 (Leuconostoc mesenteroides)
革兰氏阳性菌、微需氧至兼性厌氧,生长需要缬氨酸和谷氨酸在蔗糖液中形成特征性葡聚糖黏液(20~25oC促使形成)可生产葡聚糖,会使糖汁变粘而无法加工,为糖厂有害菌。 6、 醋酸菌(Acetobacter)
细胞椭圆或短杆,单生、成对偶尔呈短链,细胞端尖或平。不形成芽孢,G-,好气性,广泛分布于水生的厌氧环境中。分两群:1)只将乙醇氧化成醋酸 2)将产生的醋酸继续氧化成CO2和水,可生产醋酸常用于果醋等的制作中。 7、 棒状杆菌(Corynebacterium)
以葡萄糖为原料发酵产生酸,是谷氨酸和其他氨基酸的高产菌 生产谷氨酸等,如北京棒杆菌AS1.299 钝齿棒杆菌AS1.542 8、短杆菌(Brevibacterium)
氨基酸、核苷酸工业生产中常用的菌种,也是酶法合成生产辅酶A的菌种。
9、黄单胞菌(Xanthomonas)
细胞直杆状,G-,无芽孢,极生鞭毛。在含蔗糖的琼脂平板上形成圆形、边缘整齐、粘稠光滑的黄色菌落;液体培养形成黄色粘稠的胶状物——荚膜多糖,其黄色为一种水溶性色素。野油菜黄单胞菌(X. campestris) 可以生产黄原胶(Xanthan gum)。 10、假单胞菌(Pseudomonas)
能发酵生产维生素B12、丙氨酸、谷氨酸、葡萄糖酸、色素、果胶酶;也能进行类固醇(甾体)转化;有些菌株可利用烃类生产单细胞蛋白。荧光假单胞菌(P. fluorescens)属于假单胞菌属rRNA I群荧光DNA同源组,是植物根际最普遍的微生物类群,具有分布广、数量多、营养需要简单、繁殖快、竞争定殖力强的特点。其作用机制包括:抗生素的作用、噬铁素对铁的营养竞争、有效的根际定殖等。
(二)放线菌
因其菌落呈放射状而得名属原核微生物类群,在自然界中分布很广,尤其在有机质丰富的微碱性土壤中较多。大多腐生,少数寄生。产生多种抗生素(12 000余种,60%左右来自放线菌),经济价值大。 1、 链霉菌属
灰色链霉菌:生产链霉素
金霉素链霉菌:在PDA培养基上生长时,基内菌丝产生金黄色色素,生产金霉素
红霉素链霉菌:产红霉素
龟裂链霉菌:菌落灰白色,表面后期有皱折,呈龟裂状生产土霉素。
2、 小单胞菌属
与一般放线菌不同,菌丝体长入培养基内,不形成气生菌丝,而在基内菌丝体上长出孢子梗,其顶端生一个球形、椭圆形孢子。菌落致密,与培养基紧密结合在一起,表面凸起,多崎岖,疣状;菌落常为橙黄色、红色、深褐色、黑色和兰色。 多种可产抗生素,如棘孢小单胞菌产庆大霉素。 3、 游动放线菌属
一般不形成气生菌丝,孢囊在基内菌丝上形成,孢囊孢子在孢囊内盘卷或呈直线排列;孢子球形,有时端生1-40根鞭毛,能运动。 济南游动放线菌 (Actinoplanes tsinanesis) 产创新霉素(creatmycin; 1964)。 4、 诺卡氏菌属
一般无气丝,基丝培养十几小时形成横隔,并断裂成杆状或球状孢子。菌落较小,边缘多呈树根毛状。生产利福霉素、蚊霉素等。 5、 孢囊链霉菌属
孢子丝盘卷成球形孢囊,内形成孢囊孢子,孢囊孢子无鞭毛 产多霉素、创新霉素。
(三)酵母菌
酵母菌是一群单细胞的真核微生物,其形态因种而异.通常为圆