食品分析(1)(2)

1970-01-01 08:00

索氏提取法为什么是粗脂肪?因为挥干有机溶剂后所得的物质除了游离脂肪外,还含有磷脂、色素、树脂、蜡状物、挥发油、糖脂等物质,所以用索氏提取法测得的脂肪,也称粗脂肪。 计算:

?用索氏提取法测定半干食品中脂肪的含量;首先用真空干燥食品,样品的水分含量是25%,再用索氏提取法测定干燥后样品的脂肪含量,干燥食品的脂肪含量是12.5%,计算原半干食品的脂肪含量?

酸性乙醚法原理:书P126

适用范围:本法不适于测定含磷脂高的食品和含糖高的食品。 碱性乙醚法原理:(1)罗兹—哥特里(Rose—Gottlieb)法原理:利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜,使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中,而脂肪游离出来,再用乙醚-石油醚提取出脂肪,蒸馏去除溶剂后.残留物即为乳脂肪。适用范围:适用于各种液状乳、炼乳、奶粉等能在碱性溶液中溶解的乳制品,也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。

(2)巴布科克法原理:利用硫酸溶解乳中的乳糖与蛋白质等非脂成分,使脂肪球膜破坏,脂肪游离出来,在乳脂瓶中直接读取脂肪层,从而迅速求出被检乳中的脂肪率。【加H2SO4的作用:(1) 溶解蛋白质(2) 溶解乳糖(3) 减少脂肪的吸附力】;适用范围:

(3)盖勃法原理:采用硫酸和异戊醇,硫酸消化蛋白和碳水化合物,游离出脂肪,并通过加热使脂肪保持液态。适用范围:广泛应用于不同乳制品的脂肪测定中,使用异戊醇是为了防止糖的炭化。 计算:

?牛乳脂肪和牛乳的密度分别为0.9和1.032,牛乳中脂肪的体积百分含量是3.55%,计算牛乳中脂肪的重量百分含量?

一个(5.0 g)食用级的油待测样品与过量的碘化钾反应测定其过氧化物值,游离的碘用0.1 mol/L标准硫代硫酸钠来滴定,滴定值为0.60 mL,计算油的过氧化物值? ?一个(5.0 g)食用级的油待测样品,用过量的KI和ICl反应测定其碘价,游离的碘用0.1 mol/L标准硫代硫酸钠来滴定,滴定值为0.60 mL,空白实验滴定值为1.30 mL,计算油的碘价? 如何有效测定油脂中添加的各种抗氧化剂的效果? 4、糖类的测定 本章重点:1.直接滴定法的测定原理?2.总糖的测定方法?3.淀粉的测定方法?4.粗纤维的测定。 可溶性糖类

可溶性糖类的提取和澄清: (一)提取

? 1. 常用的提取剂:水、乙醇溶液。

? 2. 提取液制备的原则:⑴ 取样量与稀释倍数的确定,使(0.5—3.5mg / mL)。⑵ 含脂肪的食品,须脱脂后再提取。⑶ 含有大量淀粉、糊精的食品,用乙醇溶液提取。⑷ 含酒精和二氧化碳的液体样品,应先除酒精、CO2。 (二) 提取液的澄清

1. 常用澄清剂要符合三点要求:(1)能较完全的去除干扰物质;(2)不吸附或沉淀被测糖分,也不改变被测糖分的理化性质;(3)过剩的澄清剂应不干扰后面分析操作或应易于除掉。 2. 常用澄清剂的种类:硫酸铜和氢氧化钠溶液;中性醋酸铅【Pb(CH3COO)2·3H2O】;乙酸锌和亚铁氢化钾溶液;还有碱性醋酸铅、氢氧化铝溶液、活性炭等。

澄清的4种方法、适用范围P148~149

总糖的测定

总糖的测定通常是以还原糖的测定方法为基础的,常用的是直接滴定法,此外还有蒽酮比色法等。

(一)直接滴定法原理:样品经处理除去蛋白质等杂质后,加入盐酸,在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖,以直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。

(二)蒽酮比色法原理:单糖类遇浓硫酸时,脱水生成糠醛衍生物,后者可与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物,当糖的量在20-200mg范围内时.其呈色强度与溶液中糖的含量成正比,故可比色定量。

试剂:1、蒽酮试剂:称取0.2g蒽酮和1g硫脲(阻氧化剂)置于烧杯中,缓慢加入100mL浓硫酸,边加边搅拌,溶解后呈黄色透明溶液。将其贮存于棕色瓶中,最好现配现用,置冰箱中保存可存放约2周。2、葡萄糖标准溶液:先配成1g/L的葡萄糖溶液,然后分别吸取1,2,4,6,8,10mL分别置于100mL容量瓶中,用水定容至刻度,可得10,20,40,60,80,100mg/L的葡萄糖系列浓度。

测定:吸取样液1mL(含糖20-80mg/L),系列标准糖液,蒸馏水各1mL,分别置于8支试管中,沿壁各加入5mL冷的蒽酮试剂,混匀,于试管口盖上玻璃盖,在沸水浴中加热10min,取出在流水中冷却20min后,在620nm波长下,以试剂空白调零,测定各A620nm值,作标准曲线。与曲线对照,求出样品含糖总量。 说明:1、如提取液中存在较多的可溶性蛋白质色素,影响比色,可用氢氧化钡作为沉淀剂。 2、如要求测定结果不包括淀粉,应该用80%乙醇作提取剂,以避免淀粉和糊精溶出。 3、蒽酮反应颜色的深浅随温度条件和加温时间而变化。葡萄糖显色高峰在100℃下,加热10min后出现;而核糖的显色高峰在同样的温度下,加热3min后出现。因此,采用此法,控制反应条件很重要。

在用直接滴定法测定总糖含量时,称取样品5.0g于250mL容量瓶中,澄清、定容,过滤,取50mL上清液于100mL容量瓶中,水解,定容,滴定10.00mL碱性酒石酸铜甲、乙混合液,耗用样液11.30 mL,用0.1%转化糖标准溶液滴定甲、乙混合液耗标液10.50mL,求该样品中总糖的百分含量。

还原性糖的测定

(一) 直接滴定法

直接滴定法(原理,甲、乙液组成): P148~151

注意事项:本方法测定的是一类具有还原性质的糖,包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等,只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示,所以不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知样品中只含有某一种糖,如乳制品中的乳糖,则可以认为还原糖=某糖。

F = ρ × V (F:10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量, mg;ρ:葡萄糖标准溶液的浓度, mg/mL;V——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积,mL。也可不标定,直接查表求 ρ值。)

计算:称取某食物样品3.00g,经过处理后用水定容至60mL。用浓度为0.2mg/mL的葡萄糖标准溶液滴定10mL费林试剂,消耗10mL。用经处理后的样液滴定10mL费林试剂时,消样液6mL。计算样品中还原糖含量(以葡萄糖计)。

测某饮料还原糖含量时,吸取样品5.00mL于250mL容量瓶中,澄清、定容、过滤,取滤液50mL于100mL容量瓶中,水解,定容、滴定耗用样液9.50mL,已知F=10.15mg/10mL(葡萄糖),求还原糖含量。

测某饮料还原糖含量时,采取直接滴定法,该饮料还原糖含量约为10.5%,已知10mL碱性酒石酸铜甲、乙混合液耗用0.1%葡萄糖10.20mL,处理过程中,先将样品加入澄清剂后定容至250mL,取上清液50mL于100mL容量瓶中,水解,定容,请通过计算告知样品大致的称样量。

根据10mL费林试剂耗用0.1%葡萄糖10.20mL,可算出转化糖系数F= CV=1×10.2=10.2mg

∴C样品/ m=21

由于测定样品中的糖时,样液消耗的体积应与标准糖液消耗的体积接近,所以样品中还原糖的浓度我们也近似看作C样品=F/V还原糖=10.2/10.2=1mg/mL ∴m=21g

讨论:1、费林试剂应现用现配,用时再混合。2、滴定终点时溶液由蓝变红,而此时溶液中有Cu2O(↓),会对滴定终点有干扰。3、在滴定过程中对操作条件要求严格①整个过程要求在沸腾溶液中进行②滴定时不能随意摆动锥形瓶。4、若溶液煮沸后,不呈蓝色。5、使用澄清剂时,不能采用Cu盐做澄清剂。 (二)高锰酸钾法 原理:

计算:称取某食物样品3.00g,经过处理后用水定容至250mL。取50ml进行测定,消耗0.1003 mol/L高锰酸钾标准液5.20mL,同时测试剂空白为0.36mL,计算样品中还原糖含量。 143.08:Cu2O的摩尔质量,g/mol。(附录4) (三)萨氏法

原理:

计算:称取一定量某食物样品,利用萨氏法对其还原糖含量进行定量分析,样品经水提取澄清后,用水定容至250 mL,取其中的10 mL进行测定,发现样液浓度过高,因此取其中50 mL稀释至250 mL,再取其中的10 mL用于测定,在酸性条件下加入过量的KIO3 和 KI ,消耗0.05 mol/L Na2S2O3 3.0 mL,空白试验为11.6 mL,经计算样品还原糖含量为29%,求称取样品的质量。(已知萨氏法的还原糖系数为0.02898 mg/mL) (四)蓝-爱农法 淀粉总量的测定 1、酸水解法

?原理:样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,用盐酸水解淀粉为葡萄糖,测定还原糖含量,再折算为淀粉含量。

?注:1、乙醇除去可溶性糖,但不得除去淀粉,要求乙醇浓度85%;2、水解要求严格,须保证淀粉水解完全;3、酸水解法,HCl水解淀粉的专一性不如淀粉酶,同时水解半纤维,不宜用于含半纤维高或含壳皮较高的食品。 2、酶水解法

?原理:样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,在淀粉酶的作用下,使淀粉水解为麦芽糖和低分子的糊精,再用HCl进一步水解为葡萄糖。

碘液检验酶解终点:淀粉→蓝糊精→红糊精→麦芽糖→葡萄糖 3、称量法

原理:KOH酒精共热(淀粉和粗纤维↓)→过滤→KOH→乙醇(↓淀粉) 粗纤维的测定

称量法原理:在热的稀硫酸作用下,样品中的糖、淀粉、果胶等物质经水解而除去,再用热的氢氧化钾处理,使蛋白质溶解、脂肪皂化而除去。然后用乙醇和乙醚处理以除去单宁、色素及残余的脂肪,所得的残渣即为粗纤维,如其中含有无机物质,可经灰化后扣除。

酸处理:于锥形瓶中加入200mL煮沸的1.25%硫酸,装上回流装置,加热使之微沸,回流30min,每隔5min摇动锥形瓶一次,以充分混合瓶内物质,取下锥形瓶,立即用亚麻布过滤,用热水洗涤至洗液不呈酸性(以甲基红为指示剂)。

碱处理:用20mL煮沸的1.25%氢氧化钾溶液将亚麻布上的存留物洗入原锥形瓶中,加热至回流,回流30min。取下锥形瓶,立即用亚麻布过滤,以沸水洗至洗液不呈碱性(以酚酞为指示剂)。

干燥:用水把亚麻布上的残留物洗入100mL烧杯中,然后转移到已干燥至恒重的垂融坩埚或垂融漏斗中,抽滤,用热水充分洗涤后,抽干,再依次用乙醇,乙醚洗涤一次。将坩埚和内容物在105℃烘箱中烘干至恒重。

灰化:若样品中含有较多无机物质,可用石棉坩埚代替垂融坩埚过滤,烘干称重后,移入550℃高温炉中燃烧至恒重,置于干燥器内,冷却至室温后称重,灼烧前后的质量之差即为粗纤维的量。

5、酸度的测定

酸度测定的意义:1、有机酸影响食品的色、香、味及稳定性。2、食品中有机酸的种类和含量是判断其质量好坏的一个重要指标。3、利用食品中有机酸的含量和糖含量之比,可判断某些果蔬的成熟度。

总酸度——指食品中所有酸性成分的总量。 有效酸度——指被测溶液中H+的浓度。 挥发酸——指食品中易挥发的有机酸。 牛乳酸度——表观酸度(固有酸度)、真实酸度(发酵酸度)

一、总酸度的测定(滴定法) (一)原理

用标准碱液滴定食品中的酸,中和生成盐,用酚酞做指示剂。当滴定终点 (pH=8.2,指示剂显红色)时,根据耗用的标准碱液的体积,计算出总酸的含量。 RCOOH+NaOH→RCOONa+H2O

样品预处理:固体样品、含二氧化碳的饮料、酒类、固体饮料、调味品及不含二氧化碳饮料、酒类。

方法:样品滴定 准确吸取制备的滤液50ml,加入酚酞指示剂2-3滴,用0.1mol/L标准碱液滴定至微红色30秒不褪色,记录用量,同时做空白实验。 注意:总酸度测定结果通常以样品含量最多的那种酸表示

练习时间:假如你正在滴定两份样品,每份需要用1mol/L NaOH溶液4mL。实验室现有10%和饱和NaOH两种溶液,请选择一种制备所需的NaOH溶液,并对制备方法加以叙述。已知8.7mL饱和NaOH溶液可制备1L 0.1mol/LNaOH溶液。

二、有效酸度(pH)值的测定 方法、原理(应该就是下面的内容) pH值的测定方法:

①电位法 ( pH计法 ):利用电极在不同溶液中所产生的电位变化来测定溶液的pH值。


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