微生物实验复习题
一、名词解释：
菌苔：如果把大量分散的纯种细胞密集地接种在固体培养基的较大表面上，结果长出的大量“菌落”已相互连成一片，这就是“菌苔”。
菌落：将单个细菌（或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时为内层），当它占有一定的发展空间处于适宜的培养条件下，该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌落。
芽孢：是一些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，壁厚、透性低、不易着色。 荚膜：是一些细菌细胞外的一层胶状粘液物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽，与染料亲和力低。
细菌：细菌是单细胞原核微生物，基本形态为球状、杆状、螺旋状。
天然培养基：是指一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。例如：牛肉膏蛋白胨、麦芽汁培养基。
合成培养基：组合培养基又称合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如：高氏一号培养基。
半组合培养基：又称半合成培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如：马铃薯蔗糖培养基。
液体培养基：一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模地培养微生物。
固体培养基：一类外观呈固体状态的培养基。根据固态的性质又可分为：固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基和滤膜。
半固体培养基：是指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基。例如：“稀琼脂”。
二、理论书内容：
1、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌各菌落的比较。
菌落特征 微生物类别 含水状态 细菌 很湿或较湿 小而凸起或大而平外观形态 坦 单个分散或有一定相互关系 单个分散或假丝状 排列方式 小而均匀，个别有形态特征 芽孢 菌落透明度 菌落与培养基结不结合 合程度 单调，一般呈乳脂参考特征 菌落正反面 相同 颜色的差异 可见球状，卵圆状菌落边缘 细胞生长速度 气味 一般看不到细胞 或假丝状细胞 一般很快 一般有臭味 较快 多带酒香味
慢 常有泥腥味 一般较快 往往有霉味 有时可见丝状细胞 可见粗丝状细胞 相同 一般不同 一般不同 菌落颜色 多样 或矿烛色，少数红色或黑色 十分多样 十分多样 不结合 牢固结合 较牢固结合 透明或稍透明 稍透明 不透明 不透明 大而分化 细而分化 粗而分化 丝状交织 丝状交织 大而凸起 小而紧密 致密 单细胞微生物 酵母菌 较湿 菌丝状微生物 放线菌 干燥或较干燥 霉菌 干燥 大而疏松或大而菌落主要特征 细胞 2、根霉、青霉、曲霉形态结构图。
根霉
3、培养基种类。（微生物营养）
一、按对培养基成分的了解作分类：
1、天然培养基：指一类利用动，植物或微生物包括用其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基。
2、组合培养基：也叫组合培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。例如：高氏一号培养基
3、半组合培养基：又称半合成培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些一类呈天然成分的培养基。例如：马铃薯蔗糖培养基 二、按培养基外观的物理状态作分类
1、液体培养基：一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模的培养微生物。
2、固体培养基：一类外观呈固体状态的培养基。可分为固化培养基，非可逆性固化培养基，天然固态培养基和滤膜。
① 固化培养基：加有琼脂或明胶或海藻酸钠
② 非可逆性固化培养基：血清培养基或无机硅胶培养基 ③ 天然固态培养基：由天然固态基质直接配制成的培养基 ④ 滤膜
3、半固体培养基：指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基，一般可在液体培养基中加入0.5%左右的琼脂制成。例如：“稀琼脂”,“直立柱” 4、脱水培养基：指除水以外的一切营养成分的商品培养基，使用时只要加入适量水分并加以灭菌，分装即可，是一类既有成分精确又有使用方便的现代化培养基。 三、按培养基对微生物的功能作分类
1、选择性培养基：一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学，物理因素抗性的原理设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛应用于菌种筛选等领域。（选择性培养基包括：①酵母菌富集培养基 ②Ashby无氮培养基 ③Martin培养基 ④含糖酵母菌培养基）
2、鉴别性培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。EBM培养基。例如：EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G细菌和一些难培养的G细菌。
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4、油镜的使用方法及与普通物镜的区别
材料：显微镜，拭镜纸，液体石蜡油，二甲苯 步骤：显微镜油镜的使用和维护
1.将显微镜平稳地安放在实验台适宜处。识别油镜头：标有100×、OIL、HI等字样。 2. 打开电源，用低倍镜对光，打开光圈，调节聚光镜的位置，使视野光线充足。
3. 标本上加镜油一滴，转动粗螺旋，使油镜头缓缓下降，用眼从侧面观察，直到油镜头浸入油中接近玻片为止。
4. 从目镜观察，同时徐徐转动粗螺旋提升，见模糊物象后再用细螺旋调节，直到见到清晰物象为止。
5. 观察完毕，粗螺旋提高镜头，取下标本片，油镜头使用后立即用擦镜纸擦净镜头上的油。如油已干，可在擦镜纸上滴少许二甲苯擦拭，并立即用另一擦镜纸擦去二甲苯，因二甲苯能溶解镜头上的固定胶以致使镜头脱落。
6.将镜头转呈“八”字，调低聚光器，对号送入柜子内存放 原理：油镜的透镜极小，工作焦距最短，光线通过玻璃和空气，由于介质密度不同发生折射，射入镜筒的光线极少，视野暗，物象不清晰。如在玻片与镜头（透镜）之间加上折光率和玻片（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515）就可减少光线的折射，加强视野的亮度，获得清晰的物象。
? 注意事项：
? 1、油不要滴太多
? 2、在调节焦距的时候要特别注意与载玻片之间的距离不要弄坏工具 ? 3、调节时应该从下往上调节
? 4、在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视
野的中心。
? 5、用左眼观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。
? 如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外重找时应按：低倍→高倍→
油镜程序。在加油区内重找应按：低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头。
? 6、油镜使用完毕，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去，然后
再用干擦镜纸擦干净。
油镜的使用和维护
.使 用 油 镜 的 正 确 操 作 步 骤 是:
（1） 低 倍 镜 观 察。 （2） 高 倍 镜 观 察。
（3）转 出 高 倍 镜 头， 滴 加 香 柏 油 后 用 油 镜 观 察。 在 擦 拭 显 微 镜 镜 头 时，应 向 一 个 方 向 擦 拭。
5.如 何 从 土 壤 中 分 离 得 到 一 个 微 生 物 的 纯 培 养 体?
首先要根据分离对象选 择 适 宜 的 培 养 基。若 要 分 离 真 菌 应 选 用 马 丁- 孟 加 拉 红 选 择 培 养 基；若 要 分 离 细 菌 应 选 用 牛 肉 膏 蛋 白 胨 培 养 基；若 要 分 离 放 线 菌 应 选 用 高 氏 培 养 基。