23．从两种不同种类的细菌中分离出的DNA样品，其腺嘌呤碱基的组成分别占碱基总量的32%和17%，在这两种细菌中，你预示腺嘌呤、鸟嘌呤、胸嘧啶和胞嘧啶是怎样的比例？你采用了什么样的假定？其中一种细菌是从64℃的温泉中分离的，哪种DNA是从这种细菌中提取的？其依据是什么？
24．试述如何决定DNA复制的准确性？
25．一个单链DNA与一个单链RNA分子量相同，你如何将它们区分开？ 26．下列各种酶的专一性及水解产物是什么？
（1）胰核糖核酸酶 （2）蛇毒磷酸二酯酶 （3）牛脾磷酸二酯酶 （4）大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ （5）大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ
27．DNA样品在水浴中加热到一定温度，然后冷至室温测其OD260，请问在下列情况下加热与退火前后OD260的变化如何？ （a）加热的温度接近该DNA的Tm值。 （b）加热的温度远远超过该DNA的Tm值。 28．Cairns在实验中为跟踪DNA的复制过程，只使用了3H（氚）标记的胸嘧啶核苷。 （1） 为什么只使用3H标记的胸嘧啶核苷而不使用3H标记的胸苷或鸟苷？ （2） 放射性的胸苷是怎样参入到DNA中去的？ （3） 为什么使用3H而不使用32P作标记？
29．为什么新生的RNA分子的5′-端都是5′-pppA-或5′-pppG-的结构？
30．Hershey-chase实验的成功取决于制备两种不同批号的同位素标记的噬菌体颗粒。实验者是如何知道32P仅标记DNA、35S只标记蛋白质外壳？用35S标记的噬菌体侵染细菌之后，你预期在子代病毒中能找到大量的32S标记吗？如果实验用32P重复进行，你预期在子代病毒中会找到大量的32P标记吗？为什么？
31．真核生物mRNA修饰发生在什么阶段？
第二章 名词
α-螺旋 β-折叠 盐析 盐溶 等电点 亚基 Sanger反应 Edman反应 超二级结构 结构域 次级键 酰胺平面 构型 构象 一、 符号
GSSG PAGE DNP-AA SDS Arg Trp Asn Pro 二、 填空
1．脯氨酸与羟脯氨酸同茚三酮反应产生 色的物质，而其它氨基酸与茚三酮反应产生 色物质。
2．在下列空格中填入合适的氨基酸名称： 是带芳香族侧链的极性氨基酸； 和 是带芳香族侧链的非极性氨基酸； 和 是含硫的氨基酸，其中 是含硫的极性氨基酸； 、 、 是含羟基的氨基酸，其中 是在一些酶活性中心起重要作用并含羟基的极性较小的氨基酸。
3．定量测定蛋白质的方法包括： 、 和 等；分离蛋白质的方法主要有： 、 和 等。
4．测定N-末端的方法有： 、 等，测定C-末端的方法有： 、 等，氨基酸顺序分析仪是根据 反应原理设计的。
5．蛋白质紫外吸收高峰在 nm，而核酸在 nm。
6．蛋白质的三级结构的稳定力量包括： 、 、 、 ，其中主要是 ，蛋白质的二级结构的主要稳定力量是 ，一级结构的主要稳定力量是 。
7．用紫外分光光度法测定Pr的含量是基于蛋白质分子中的 、 和 三种氨基酸的共轭双键具有紫外光的吸收能力。
8．α-螺旋通常在脯氨酸处中断，其原因是 。
9．蛋白质二级结构的四种基本类型是 、 、 、 。
10．序列测定常用的蛋白酶和试剂中，用 酶、 酶和 酶水解肽链，专一性要比用 酶和 （化学试剂）水解肽链差。
11．蛋白质之所以出现各种内容丰富的构象是因为 键和 键能有不同程度地转动。
12．构成Pr的四级结构需要两条以上的肽链，每条肽链称为一个 ，肽链与肽链之间靠 相连。 13．去污剂如十二烷基磺酸钠（SDS）使蛋白质变性是由于SDS能破坏 使疏水基团暴露到介质中。
14．蛋白质变性主要是由于 键等次级键破坏所致，变性后 、 、 活性发生改变。 15．β一转角的最大特点为 ，一般含有 氨基酸。
16．常用的拆开蛋白质分子中的二硫键的方法有 和 ，常用的试剂有 、 等。
17．在pH6.0时将Gly、Ala、Glu、Lys、Arg和Ser的混合物进行纸电泳向阳极移动最快的是 ，向阴极移动最快的是 和 ，移动很慢接近原点的是 和 ， 。
18．20种氨基酸中， 在稳定许多蛋白质结构中起重要作用，因为它可参与形成链内和链间的共价键。
19．20种氨基酸中 、 和 的β-碳原子与两个以上的基团相连，它们可使α-螺旋的结构变得不稳定。 20．蛋白质的磷酸化可以发生在下列主要氨基酸残基的位点上： 、 、 。
21．镰刀型红细胞贫血病是一种先天遗传分子病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个 被 所置换。
22．蛋白质是两性电解质，当溶液的pH在其等电点以上时蛋白质分子带 电荷，而在pH等电点以下时，带 电荷。 23．分离蛋白质混合物的各种方法主要是根据蛋白质在溶液中下列性质： 、 、 。 24．血红蛋白（Hb）与氧结合的过程呈现 效应，是通过Hb的 现象实现的，它的辅基是 。
25．肽链中的 氨基酸残基上的一个环氮上的孤对电子，像Met一样使之在结合血红蛋白的铁原子时成为起重要作用的潜在配体。
26．在生理条件下，一般球蛋白的构象是 侧链在外面， 侧链在内部；而非极性环境中，如膜蛋白在呈折叠状时，是 侧链在外面，而 侧链由于内部相互作用，呈中性状态。
27．蛋白质水解时，切断 ，随之产生游离的 基团和 基团，可用 试剂鉴定。 28．研究蛋白质构象的方法很多，但主要是应用 。
29．在20种氨基酸中， 和 分子量小而且不含硫，在折叠的多肽链中能形成氢键。
30．谷胱甘肽由三中氨基酸通过肽键联接而成，这三种氨基酸分别是 、 、 。 31．分子病是指 的缺陷，造成人体 的结构和功能的障碍，如 。
32．氨基酸在等电点时，主要以 离子形式存在，在pH>PI的溶液中，大部分以 离子形式存在，在pH 5 大部分以 离子存在。 三、 是非题 1． 蛋白质的亚基和肽链是同义的。 2． 双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。 3． 水溶液中蛋白质分子表成的氢原子相互形成氢键，因此具有一定的溶解性。 4． 只有在很高或很低pH时，氨基酸才主要以非离子化形式存在。 5． 两羧基-氨基的氨基酸等电点偏酸。 6． 除甘氨酸外，其余19种编码氨基酸都有旋光活性。 7． 维持蛋白质一级结构的化学键是肽键。 8． 蛋白质在进化过程中构象是易变的。 9． 蛋白质构象的改变必然涉及共价键的破坏。 10．蛋白质变性后，分子量发生改变。 11．纸电泳分离氨基酸是基于它们的极性性质。 12．溶液中蛋白质表面上的氢键供体与受体之间能形成氢键。 13．变性后蛋白质溶解度降低是因为中和电荷和去水膜所引起的。 14．在肽链的氨基酸分析中，除色氨酸因酸处理被破坏之外，所有的氨基酸都能用氨基酸分析仪准确地加以鉴定。 15．Pr分子中个别氨基酸的取代未必会引起Pr活性改变。 16．等电点不是Pr的特征参数。 17．二硫键和Pr的三级结构密切相关，因此没有二硫键的蛋白质就没有三级结构。 18．蛋白质变性后其生物活性就不可逆地丧失了。 19．变性的蛋白质一定沉淀，但沉淀的Pr不一定变性。 20．所有的天然存在具有活性的蛋白质都具有四级结构。 21．四级结构必须有两条或两条以上的肽键组成，胰岛素分子是由A、B两条链组成，所以胰岛素分子具有四级结构。 22．蛋白质在PI时其溶解度最小。 23．蛋白质分子中二硫键可用8mol/l的尿素拆开。 24．蛋白质的一级结构在很大程度上决定了它的三级结构。 25．蛋白质的二级结构是由于相邻氨基酸残基之间的相互作用而形成的，三级结构则主要是由于不相邻的氨基酸残基侧链之间的相互作用而形成的。 26．组成蛋白质的20种氨基酸分子中都含有不对称的α-碳原子。 27．有机溶剂引起蛋白质变性的主要原因之一是降低介质的介电常数。 28蛋白质和酶原的激活过程说明蛋白质的一级结构变化与蛋白质的功能无关。 29．利用盐浓度的不同可以提高或降低蛋白质的溶解度。 30．血红蛋白比肌红蛋白携氧能力高，这是因为它有多个亚基。 31．血红蛋白的α-链、β-链和肌红蛋白的肽链在三结结构上很相似，所以它们都有结合氧的能力。血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。 32．胰岛素的生物合成途径是先分别合成A、B两链，然后通过S-S键相连。 33．脯氨酸不能参与α-螺旋，它使α-螺旋转弯，在肌红蛋白和血红蛋白的多肽链中，每一个转弯处并不一定有脯氨酸，但是每个脯氨酸却产生一个转弯。 34．天然氨基酸都具有一个不对称α-碳原子。 35．亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。 36．浓NaCl易破坏离子键，浓尿素易破坏氢键。 37．肽的命名是从肽链的游离氨基开始的。 38．变性后的蛋白质，在适合的条件下全部都能复性。 39．切开胰岛素分子中链间两对二硫键后，分子量并不改变。 40．血红蛋白与肌红蛋白均为氧的载体，前者是一个典型的别构蛋白因而与氧结合过程中呈现正协同效应，而后者却不是。 41．在蛋白质和多肽分子中，只存在一种共价键——肽键。 42．两条单独肽链经链间二硫键交联，组成蛋白质分子，这两条肽链是该蛋白质的亚基。 43．蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电位的pH溶液中，将向阴极移动。 44．与肌红蛋白不同，血红蛋白由四个亚基组成，因此提高了它与氧的结合能力，从而增加了输氧的功能。 45．疏水作用是使蛋白质立体结构稳定的一种非常重要的稳定作用。 46．所有蛋白质分子中N元素的含量都是16%。 47．蛋白质是由20种L-型氨基酸组成，因此所有蛋白质的分子量都一样。 48．刚性平面结构的肽单位是蛋白质主链骨架的重复单位。 49．从原子组成上可以把肽键看作是一种酰胺键，但两者并不完全相同。肽键的实际结构是一个共振杂化体，6个原子位于同一个平面上。 50．蛋白质构象的变化伴随自由能的变化，最稳定的构象自由能最低。 51．蛋白质变性是其构象发生变化的结果。 52．烷基化和烃基化都是与氨基酸的氨基发生的反应。 53．同一种氨基酸的对映体旋光度相等但方向相反。 54．酸和酶水解蛋白质得到的氨基酸不产生消旋作用。 55．氨基酸是生物体内唯一含有氮元素的物质。 56．含二硫键较多的蛋白质分子，加热变性所需要的温度要相对高些。 57．疏水环境比亲水环境更有利于α-螺旋的形成。 58．肽键上所有原子和它两端的Cα都位于同一刚性平面上。 59．从蛋白质盐酸水解液中获得的丝氨酸具有与L-甘油醛相同的绝对构型。 60．球状蛋白质的三级结构只需在α-螺旋或β-折叠的基础上即可形成。 61．转角只存在于球状蛋白质中。 62．蛋白质分子的肽链数就是它的亚基数。 63．蛋白质变性后，其空间结构由高度紧密状态变成松散状态。 64．蛋白质的三维结构与环境条件有直接关系。 6 65．组蛋白是一类碱性蛋白质，它含有很多的组氨酸。 66．两性离子氨基酸在溶液中，其正负离子的解离度与溶液的pH无关。 67．半胱氨酸分子中含有-SH基，故能参与体内一些氧化还原反应。 68．尽管Cα原子的Cα-N和Cα-C键是可以自由旋转的单键，但是由于肽键所处的具体环境的制约，Φ角和Ψ角并不能任意取值。 69．溶液的pH可以影响氨基酸的PH值。 70．由于各种天然氨基酸都有280nm的光吸收特征，据此可以作为紫外吸收法定性检测蛋白质的依据。 四、 选择题 1． 镰刀状细胞贫血病是最早被认识的一种分子病，它是由于血红Pr的二条β亚基中的两个谷氨酸分别为下述的氨基酸所替代。 A．丙氨酸 B．缬氨酸 C．丝氨酸 D．苏氨酸 2．利用Pr颗粒是带电荷物质而进行的操作技术有： A．电泳和薄层层析 B．离心和亲合层析 C．凝胶过滤和紫外吸收 D．电泳和离子交换 3．下列关于Pr结构叙述不正确的是： A．三级结构即具有空间构象 B．各种Pr均具有一、二、三、四级结构 C．一级结构决定高级结构 D．无规则卷曲是在一级结构上形成的 4．下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的？ A．酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环 B．酪氨酸和丝氨酸都含有羟基 C．脯氨酸和酪氨酸都含有羟基 D．组氨酸、色氨酸和脯氨酸都是非极性氨基酸 5．下列哪一类氨基酸完全是非必需氨基酸？ A．碱性氨基酸 B．含硫氨基酸 C．芳香族氨基酸 D．以上三种答案均不对 6．处于等电状态的蛋白质 A．分子不带电荷 B．分子最不稳定、易变性 C．分子带的电荷最多 D．易聚合成多聚体 7．对具有四级结构的蛋白质进行一级结构分析时 A．只有一个自由的α-氨基和一个自由的α-羟基 B．只有自由的α-氨基，没有自由的α-羧基 C．只有自由的α-羧基，没有自由的α-氨基 D．有一个以上的自由α-氨基和α-羧基 8．蛋白质变性是由于 A．蛋白质一级结构的改变 B．蛋白质亚基的解离 C．蛋白质空间构象的破坏 D．辅基的脱落 9．利用颜色反应测定氨基酸含量时，通常用哪种试剂 A． Sanger 试剂 B．Edman 试剂 C．甲醛 D．茚三酮 10．下列关于α-螺旋的论述中，错误的应是 A．α-螺旋通过疏水性相互作用而稳定 B．α-螺旋由分子内的氢键稳定 C．α-螺旋是某些Pr二级结构的一种类型 D．Pro 和Gly具有阻止α-螺旋结构的倾向 11．下列氨基酸中不能引起偏振光旋转的氨基酸是 A．Ala B．Leu C．Gly D．Ser 12．下列含有两个羧基的氨基酸是： A．Ala B．Leu C．Gly D．Ser 13．关于氨基酸的说法下列哪一个是错误的 A．Tyr与Phe含有苯环 B．Tyr与Ser都含有羟基 C．Glu和Asp都含有两个羟基 D．Lys与Arg都是酸性氨基酸 14．下列关于肽键的说法哪一个是不正确的 A．具有部分双键性 B．通常有一个反式构型 C．比通常的C-N键短 D．能自由旋转 15．在层析分离氨基酸时，下列哪一种氨基酸跑得最慢 A．Lys B．Leu C．Asn D．Ser 16．蛋白质可与碱共热水解，虽然这个过程会破坏一些氨基酸，但它却被常用来定量蛋白质中的 。 A．丝氨酸 B．半胱氨酸 C．苏氨酸 D．色氨酸 17．同源蛋白是指 A．来源相同的各种蛋白质 B．来源不同的同一种蛋白质 C．来源相同的同一种蛋白质 D．来源不同的各种蛋白质 18．下列具的协同效应的蛋白质是 A．肌红蛋白 B．血红蛋白 C．丝心蛋白 D．弹性蛋白 19．下列哪种氨基酸可与米伦试剂发生反应 A．胱氨酸 B．天冬氨酸 C．酪氨酸 D．丙氨酸 20．胰蛋白酶专一水解多肽键中 A．碱性残基N端 B．酸性残基N端 7 C．碱性残基C端 D．酸性残基C端 21．某一种蛋白质在pH5.0时，向阴极移动，则其等电点是 A．>5.0 B．=5.0 C．<5.0 D．无法计算 22．煤气中毒主要是因为煤气中的CO A．抑制了巯基酶的活性 B．抑制了体内所有酶的活性 C．和血红蛋白结合，血红蛋白失去了运输氧的功能 D．以上说法均不对 23．下列氨基酸中哪一个是在前体分子合成后才出现于多肽链中 A．脯氨酸 B．羟脯氨酸 C．谷氨酰胺 D．丝氨酸 24．血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于 A．CO2分压增加 B．CO2分压降低 C．pH值增加 D．N2分压增加 25．用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键 A．双缩脲的反应 B．凯氏定氮 C．紫外吸收法 D．茚三酮反应 26．下列哪一种氨基酸不含极性侧链 A．半胱氨酸 B．亮氨酸 C．丝氨酸 D．酪氨酸 27．下列哪一种氨基酸具有可解离的极性侧链 A．丙氨酸 B．苯丙氨酸 C．赖氨酸 D．丝氨酸 28．天然蛋白质中不存在的氨基酸 A．Cys B．Met C．羟脯氨酸 D．瓜氨酸 29．变性蛋白质的特点 A．不易被胃蛋白酶水解 B．粘度下降 C．颜色反应减弱 D．丧失原有的生物活性 30．确定蛋白质标准溶液浓度的最根本方法是 A．双缩脲反应 B．紫外吸收法 C．凯氏定氮法 D．茚三酮反应 31．蛋白质分子中疏水键 A．是在蛋白质分子中氨基酸非极性侧链之间形成的 B．是在蛋白质氨基酸侧链和蛋白质表面水分子之间形成的 C．是在氨基酸顺序中彼此不靠近的支链氨基酸侧链之间形成的 D．是在α-螺旋的肽键之间形成的 32．下列哪些氨基酸具有亲水侧链 A．苏氨酸 B．谷氨酸 C．丝氨酸 D．亮氨酸 33．关于蛋白质结构的叙述正确的是 A．链内二硫键不是蛋白质分子构象的决定因素 B．带电荷的氨基酸侧链伸向蛋白质分子的表面，暴露在溶剂中 C．蛋白质的一级结构是决定高级结构的重要因素 D．只有极少数氨基酸的疏水侧链埋藏在分子的内部 34．蛋白质的溶解度 A．加入少量中性盐后增加 B．加入丙酮后降低 C．加入大量中性盐后降低 D．在等电点时最大 35．具有四级结构的蛋白质是 A．肌红蛋白 B．血红蛋白 C．胰岛素 D．乳酸脱氢酶 36．蛋白质在电场中的泳动方向取决于 A．Pr的分子量 B．蛋白质分子所带净电荷 C．蛋白质所在溶液的温度 D．蛋白质所在溶液的pH值 37．含78个氨基酸残基形成的α-螺旋长度应为 A．3.6nm B．5.4nm C．11.7nm D．78nm 38．α-螺旋表示的通式是 A．3.010 B．3.613 C．2.27 D．4.616 39．在效应物作用下，蛋白质产生的变构效应是由于蛋白质的 A．一级结构发生变化 C．构象发生变化 B．构型发生变化 D．氨基酸序列发生变化 40．蛋白质的特异性及功能主要决定于 A．各氨基酸的相对含量 C．氨基酸序列 B．氨基酸的种类 D．非氨基酸物质 41．下列哪些氨基酸残基在蛋白质活性的激活——失活循环中可以发生磷酸化——去磷酸化反应 A．Tyr B．Pro C．Ser D．Thr 42．下列氨基酸中，哪个含有吲哚环 A．甲硫氨酸 B．苏氨酸 C．色氨酸 D．缬氨酸 43．下列氨基酸中除哪种外都是哺乳动物的必需氨基酸 A．赖氨酸 B．酪氨酸 C．亮氨酸 D．苯丙氨酸 8 44．下列哪一种氨基酸侧链基团的PKa值最接近于生理pH A．半胱氨酸 B．谷氨酸 C．谷氨酰胺 D．组氨酸 45．测定小肽氨基酸顺序的最好方法是 A．FDNB法 B．氨肽酶法 C．PITC法 D．羧肽酶法 46．下列对于球状蛋白质的叙述，哪个是正确的 A．球状蛋白质的整个肽链的二级结构是均一的 B．球状蛋白质都是无规则线团，因而呈球状 C．细胞内多数酶类、血浆蛋白及蛋白类激素都属于球状蛋白质 D．球状蛋白一般是属于不溶性蛋白 47．Sanger试剂是 A．异硫氰酸苯酯 C．丹磺酰氯 B．2,4-二硝基氟苯 D．对氯汞苯甲酸 48．每分子血红蛋白可结谷氧的分子数为 A．1 B．2 C．3 D．4 49．下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的 A．四个血红素基各自独立地与氧结合，彼此之间并无联系 B．以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图，曲线呈S形 C．氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳强 D．氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化 50．下述原因中哪些会导致血红蛋白与氧亲和力的下降 A．提高红细胞内2.3-二磷酸甘油酸的水平 B．酸中毒 C．提高CO2的水平 D．一分子氧和脱氧血红蛋白分子四个结合位中的一个结合 51．每个蛋白质分子必定具有的结构是 A．α-螺旋结构 B．β-片层结构 C．三级结构 D．四级结构 52．蛋白质三维结构的构象特征主要取决于 A．氨基酸的组成、顺序和数目 B．氢键、盐键、范德华力和疏水力等构象维系力 C．温度、pH和离子强度等环境条件 D．肽链间及肽链内的二硫键 53．关于蛋白质亚基的下列描述，哪条是正确的 A．一条多肽链卷曲成螺旋结构 B．两条以上多肽链卷曲成二级结构 C．两条以上多肽链与辅基结合成蛋白质 D．每个亚基都有各自的三级结构 54．具有四级结构的蛋白质特征是 A．分子中必定含有辅基 B．含有两条或两条以上的多肽链 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．依赖肽键维系蛋白质分子的稳定 55．下列关于蛋白质的α-螺旋的叙述，哪一项是正确的？ A．属于蛋白质的三级结构 B．多为右的α-螺旋，3，6个氨基酸残基升高一圈 C．二硫键起稳定作用 D．盐键起稳定作用 56．下列关于β-折叠片层结构的叙述，哪项是正确的？ A．β-片层常呈左手螺旋 B．β-片层只在两条不同的肽链间形成 C．β-片层主要靠链间的氢键来稳定 D．β-主要靠链内的氢键来稳定 57．不能与茚三酮反应的化合物是下面哪种 A．氨气 B．多肽 C．α-氨基酸 D．β--氨基酸 58．下列氨基酸中，哪一种含氮量最高 A．Arg B．His C．Lys D．Pro 59．在生理pH条件下，具有缓冲作用的氨基酸残基是 A．Tyr B．Trp C．His D．Lys 60．氨基酸与亚硝酸反应所释放的N2中，氨基酸的贡献是 A．25% B．50% C．75% D．100% 61．将400ml Ala溶液调pH8.0，然后用过量甲醛处理，所得溶液需加入0.2mol/l NaOH 250ml后才能反滴定到pH8.0，试问原溶液含有多少克Ala A．2.25 B．3.45 C．3.95 D．4.45 62．在一个肽平面中，能自由旋转的共价键有几个 A．2 B．3 C．4 D．5 63．下列关于还原型谷胱甘肽结构或性质的叙述，哪一种是错误的 A．“胱”代表半胱氨酸 9