二、原理
巴马汀 四氢巴马汀（延胡索乙素m.p.146-148℃）
三、方法 1g氯化巴马汀
30ml50%MeOH 加热溶解 溶液
0.8~1.0g NaBH4（边加边摇至无色、无气泡产生时）6 mol HCl 调PH2至无气泡产生, NH4OH调PH9，静置，抽滤 沉淀
95%EtOH加热（回流）溶解，趁热抽滤 滤液
加2~3倍量的水，摇匀静置，抽滤 延胡索乙素
四、注意事项
1、 NaBH4为强还原剂，避免长时间接触空气及用手接触； 2、 加NaBH4时充分摇匀，使反应充分； 3、 四氢巴马汀在碱液中易氧化成巴马汀。 五、思考题
1、 加入NaBH4后，颜色由黄变无色、溶液变混浊的原因？
2、 用6 mol HCl调反应液PH2至无气泡产生的原因？此时的溶液呈什么现象？ 3、 用NH4OH调PH9原因、现象？ 4、 重结晶时，加入水的原因？
（4）鉴定
一、实验目的
1、 学习生物碱的TLC检识方法
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2、 巴马汀、四氢巴马汀的定性鉴别（TLC、m.p.） 二、实验原理
用硅胶板进行巴马汀、四氢巴马汀的TLC检识，选用氨薰的方法避免生物碱在硅胶板上易拖尾的现象。 三、实验方法
1、TLC
点板 → 氨缸中放5min → 展开槽展开 → 取出察看（可见光、荧光、显色剂） 样品：巴马汀、四氢巴马汀的样品及对照品，用乙醇溶解 展开剂：氯仿-甲醇（9：1） 显色剂：碘化铋钾
2、 m..p.：显微熔点仪，记录初始熔化时温度及完全溶化时温度。 四、注意事项
1、 氨水有刺激性，操作时注意； 2、 熔点测定时，样品量要少。 五、思考题
1、 生物碱在硅胶板上展开为什么会拖尾？ 2、 避免生物碱在硅胶板上拖尾的方法有哪些？ 3、 如何选择生物碱TLC展开剂？
4、 本实验在可见光和荧光下检识有什么现象？为什么？ 5、 熔点测定时，样品量多会对测定结果有什么影响？ 6、 从鉴定结果如何判断样品的纯度？
实验二 大黄中大黄素的提取、分离和鉴定
（1）酸水解
一、实验目的
1、 学习酸水解的方法 2、 得到大黄粉酸水解药渣 二、实验原理
大黄中蒽醌类化合物有结合态和游离态两种形式存在，为得到游离蒽醌类化合物，先酸水解，使蒽醌类化合物以苷元的形式游离出来。
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OH OHOOHOHO COOHCH3OH
OAOHOOHOB OHOOHCH2OHOOHOOH C H3C CHO3OCH3O
D三、方法
10g大黄粉
20%H2SO4直火回流加热1小时，抽滤
滤渣
水洗中性，干燥 滤饼
四、注意事项
1、药粉在水洗中性过程中尽量避免损失； 2、药渣干燥前要松散；
3、水解液酸性强，避免用手直接接触。 五、思考题
1、酸水加热为什么要用回流装置？
2、要得到大黄中的蒽醌苷元，还有什么办法？
（2）总羟基蒽醌苷元的提取
一、实验目的
1、学习连续回流提取方法
2、得到大黄中总羟基蒽醌苷元提取物 二、实验原理
苷元为亲脂性成分，用乙醚提取。
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三、实验方法
滤饼
置索氏提取器中，加150ml Et2O, 提2.5hr（提取液无色）
Et2O液（大黄中总羟基蒽醌苷元）
四、注意事项
1、 纸筒的包法：原则是药粉不漏出 2、 提取器的装法
（1）纸筒的高度不超过侧管的高度； （2）药粉的高度不超过虹吸管的高度； （3）线头在管内，保持提取器闭封。 3、 溶剂的倒法
50ml由提取器上端倒入，浸泡药粉；100ml倒入平底烧瓶中。 4、 温度的控制
溶剂蒸气至冷凝管第二个球处，水浴温度约60℃。
5、 实验室禁止明火，实验过程中保持通风，尽量避免乙醚挥出。 6、 平底烧瓶要干燥。 五、思考题
1、同回流提取相比，该方法的优点？ 2、还可选用哪些溶剂提取？
3、若平底烧瓶中有水，将会有什么结果？
4、为什么温度控制在溶剂蒸气至冷凝管第二个球处？
（3）PH梯度萃取
一、实验目的
1、学习PH梯度萃取的方法和原理 2、得到大黄素粗品 二、实验原理
依据大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的酸性强弱不同，采用强弱不同的碱水萃取，得到大黄素。 三、实验方法
1、 分离方法
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乙醚液（T）
↓120ml(40mlX3)2.5%NaHCO3 ↓-------------------------↓
乙醚液（1）
NaHCO3液
↓120ml(40mlX3)2.5%Na2CO3
Na2CO3液
沉淀
↓--------------------------↓
乙醚液（2）
↓120ml(40mlX3)2.5%Na2CO3 ↓调 pH3
↓－－－－－－－－↓
Na2CO3液 乙醚层（3）
↓100ml(25mlX4)0.5%NaOH
↓－－－－－－↓
NaOH 乙醚层（4）
2、TLC跟踪检查 硅胶-CMC-Na
展开剂：Pet-EtOAc(7:3) 样品：乙醚液（T，1-4） 四、注意事项
1、分液漏斗使用前检查是否漏。
2、乙醚提取液倒入分液漏斗中，若有沉淀留在瓶中，用待萃取的碱液洗后再倒入分液漏斗中，直至沉淀全部被溶解。
3、 产生乳化层，解决的方法是： （1）轻摇； （2）长时间静置； （3）用电吹风加热 （4）玻棒搅动 （5）抽滤
4、待完全静置分层后放出水层。 五、思考题
1、 萃取时碱水层的颜色？
2、 比较五种蒽醌类化合物极性大小、酸性大小。 3、 在TLC中，五种蒽醌类成分Rf值的大小顺序？
4、 萃取大黄素时，碱水中若含少量乙醚，酸化后能得到沉淀吗？
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