1.定义重组DNA技术
将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。 2.说出分子生物学的主要研究内容
1.DNA重组技术 2.基因表达研究调控 3.生物大分子的结构功能研究 4.基因组、功能基因组与生物信息学研究
3.简述DNA的一、二、三级结构
一级：4种核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA分子的化学成分 二级：2条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构 三级：DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构 4.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征？
①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3，另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架，碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对
5.DNA双螺旋结构模型是由谁提出的？ 沃森和克里克 6.DNA以何种方式进行复制，如何保证DNA复制的准确性？
线性DNA的双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子，在DNA末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。环状DNA复制：θ型、滚环型、D型
①以亲代DNA分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则 ②DNA聚合酶I 非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性
③DNA修复系统：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统 7.简述原核生物DNA复制特点
只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，变现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉
8.真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？
细胞生活周期水平调控；染色体水平调控；复制子水平调控 9.细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？
错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段；重组修复，复制后的修复；DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA的修复，导致变异 10.什么是转座子？分为哪些种类？
是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。可分为插入序列和复合型转座子 11.什么是编码链？什么是模板链？
与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链，另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA合成DNA链称为模板链
12.简述RNA的种类及其生物学作用 mRNA：编码了一个或多个多肽链序列。
tRNA：把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息。 rRNA：是核糖体中的主要成分。
hnRNA：由DNA转录生成的原始转录产物。
snRNA：核小RNA，在前体mRNA加工中，参与去除内含子。
snoRNA：核仁小RNA，主要参与rRNA及其它RNA的修饰、加工、成熟等过程。 scRNA：细胞质小RNA在蛋白质合成过程起作用。
13.RNA的结构有哪些特点？
①含有核糖和嘧啶，通常是单链线性分子。主要以单链形式存在于细胞中。碱基主要有A、G、C、U。
②可自身折叠形成局部双螺旋。主要是A-U、G-C配对，偶而有G-U配对。RNA双螺旋的大小沟差异不大，不适合与蛋白质进行序列特异性相互作用。
③可折叠形成复杂的三级结构。RNA主链上的未配对区可自由旋转，以及不规则的碱基配对。
14.什么是Pribnow box ?它的保守序列是什么？
Pribnow box是原核生物中中央位于转录起始点上游10bp处的TATA区，所以又称为-10区。它的保守序列是TATAAT
15.简述原核生物和真核生物mRNA的区别
①原核生物mRNA常以多顺反子形式存在。真核生物mRNA一般以单一顺反子的形式存在②原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的，真核生物转录的mRNA前体则需经转录后加工，成为成熟的mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作③原核生物mRNA半寿期很短一般为几分钟，最长只有数小时，而真核生物mRNA的半寿期较长④结构特点也不同，原核生物mRNA的5‘端无帽子结构，3’端只没有或只有较短的poly A结构 16.真核与原核生物基因转录有哪些差异？
①只有一种RNA聚合酶参与所有类型的原核生物基因转录，而真核生物有3种以上的RNA聚合酶来负责不同类型的基因转录，合成不同类型的、在细胞核内有不用定位的RNA ②转录产物有差别。原核生物的初级转录产物大多数是编码序列，与蛋白质的氨基酸序列呈线性关系；而真核生物的初级转录产物很大，含有内含子序列，成熟的mRNA只占初级转录产物的一小部分③原核生物的初级转录产物几乎不需要剪接加工就可直接作为成熟
mRNA进一步行使翻译模板的功能；真核生物转录产物需要经过剪接、修饰等转录加工成熟过程才能成为成熟mRNA④原核生物细胞中，转录和翻译不仅发生在同一个细胞空间里，而且这两个过程几乎是同步进行的，蛋白质合成往往在mRNA刚开始转录时就被引发了，真核生物mRNA的合成和蛋白质的合成则发生在不同的空间和时间范畴内 17.大肠杆菌的终止子有哪两大类？请分别介绍一下它们的结构特点
分为不依赖于P因子和依赖于P因子两大类。不依赖P因子终止的特点：终止子位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区； 终止子位点前面有一段由4-8个A组成的序列，所以转录产物的3‘端为寡U。依赖P因子的特点：终止位点的DNA序列缺乏共性，而且不能形成强的发卡结构，因而不能诱导转录的自发终止 18.什么是RNA编辑，其生物学意义是什么？
是指某些RNA特别是mRNA前体经过插入、删除或取代一些核苷酸残基等操作，导致DNA所编码的遗传信息的改变，使得经过RNA编辑的mRNA序列发生不同于模板DNA的变化。生物学意义：①校正作用，基因突变途中丢失的遗传信息得以恢复 ② 调控翻译，构建或去除起始密码子和终止密码子 ③ 扩充遗传信息，使基因或得新的结构核功能，有利于生物进化
19.核酶具有哪些结构特点？根据其催化功能的不同可分为哪两大类？其生物学意义是什么？
具有自我剪切能力的RNA大多数都能形成锤头结构，该二级结构由3个茎构成，茎区的局部双链结构包围着一个由11—13个保守核苷酸构成的催化中心。核酶分为剪切型和剪接型两种。意义：继反转录现象之后对中心法则的一个重要修正，说明RNA既是遗传物又是酶；为生命起源的研究提供了新思路 20.什么是克隆载体？什么是表达载体？
克隆载体：为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体
表达载体：为使插入的外源DNA序列可转录翻译成多肽链而特意设计的载体 （表达载体和克隆载体的区别：
1.克隆载体：通常仅含有有一个松弛型复制子、一个多克隆位点和一个筛选标记，以便被克隆和筛选的DNA序列能够大量增殖。
2.而表达载体除了上述因子外，还需要有强的启动子、核糖体结合位点、转录起始信号、转录终止信号、翻译起始密码子、翻译终止密码子等一系列调控序列。） 21.试述PCR扩增的原理和步骤
原理：DNA在高温时发生变性链解，当温度降低后又可以复性成为双链。通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA酶、dNTP就可以完成特定基因的体外修复 步骤：1.变性，双链打开 2.退火，引物与模板相结合 3.链的延伸，DNA合成 22.简述代谢产物对基因表达调控的两种方式
①转录水平上的调控②转录后水平上的调控（mRNA加工成熟水平上的调控、翻译水平上的调控）
23.什么是操纵子学说？
关于原核生物基因结构及其表达调控的学说，由法国Jacob和Monod提出，核心是 使基因从表达抑制状态中解脱出来，是从负调节的角度来考虑基因表达调控的 24.简述乳糖操纵子的调控模型
A,乳糖操纵子的组成：含Z、Y、A三个基因结构，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O、启动子P、调节基因 I
B.阻遏蛋白的负性调节：无乳糖时，阻遏蛋白位于O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖时，诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子