与杂质分开为止。展开时要避光,以下显荧光步骤同“6.2.4”。最后将板在紫外光灯下观察,如样液为阳性,应产生与杂色曲霉素标准重叠的衍生物。确证法的最低检出量:大米、玉米、小麦为25 μg/kg(黄豆、花生样品为50 μg/kg)。
6.计算
V?D1000X?0.004?1? (9-8)
V2m式中:X——杂色曲霉素含量,μg/kg;
V1——样液浓缩后体积,ml;
V2——出现最低荧光样液的滴加体积,ml; D——浓缩样液的总稀释倍数;
m——浓缩样液中所相当的样品质量,g; 0.004——杂色曲霉素的最低检出量,μg。
9.6 有毒食用菌 9.6.1概述
蘑菇又称蕈类,属于真菌的子实体。蘑菇在我国资源很丰富,而且种类极多,分布地域广阔。蘑菇不但具有独特风味,而且含有多种氨基酸、糖和维生素,是人们喜爱的一种食物。在众多的蘑菇中有一部分为毒蘑菇也称毒蕈,是指食后可引起动物或人类中毒的蘑菇。由于毒蘑菇与可食蘑菇在外观上较难区别,因此容易造成人误食而引起中毒。另外尚有部分条件可食蘑菇,主要指通过加热、水洗或晒干等处理后方可安全食用的蘑菇类。我国目前已鉴定的蘑菇有800多种,其中有毒蘑菇约180多种;但其中可能威胁人类生命的有20余种,而含有剧毒者仅10种左右。
毒蘑菇中所含有的有毒成分很复杂,不同类型的毒蘑菇含有不同的毒素,也有一些毒蘑菇含有多种毒素。 9.6.1.1胃肠毒素
含有这类毒素的毒蘑菇很多,如含毒粉褶菌(Rhodophyllus -sinuatus)、褐盖粉褶菌(Rhodophyllus.rhododopolius)、毒红菇(R.emetica)、臭黄菇(Russula.foetens)、虎斑蘑(T.rigrirnum)、橙红毒伞(A.bingemsis)、毛头乳菇(L.torminosus)、白乳菇(L.piperatus)等,另外,牛肝蕈属、环柄伞属中的某些种类及月光菌(Pleurtus japonicus)、毒光盖伞(Psilocybevenata)等蘑菇中也
有胃肠毒素。
9.6.1.2 神经、精神毒素
这种毒素主要包括四大类。
1.毒蝇碱(muscarin):一种生物碱,溶于酒精和水,不溶于乙醚。存在于毒蝇伞蕈、丝盖伞蕈属、杯伞蕈属及豹斑毒伞蕈等中。
2.蜡子树酸(ibotenic acid)及其衍生物:毒蝇伞蕈属的一些毒蕈含有此类物
质。
3.光盖伞素(psilocybin,裸盖菇素)及脱磷酸光盖伞素(psilocin):存在于裸盖菇属及花褶伞属蕈类。
4.幻觉原(hallucinogens):主要存在于橘黄裸伞蕈中,摄人此蕈15min即出现幻觉.表现为视力不清,感觉房间变小,颜色奇异,手舞足蹈等,数小时后可恢复。
9.6.1.3 溶血毒素
该类毒素主要存在于鹿花蕈属中的鹿花菌(Gyromitraescule -nta)和纹缘毒伞(Amanita spreta)中,鹿花蕈(gyropititrin)中所含的马鞍蕈酸,属甲基联胺化合物,具有挥发性,对碱不稳定,可溶于热水。可使红细胞大量破坏,引起急性溶血。
9.6.1.4 原浆毒素(肝脏损害型毒素)
该毒素是毒伞(Amanita phalloides)、白毒伞(Amanita verna)、鳞柄白毒伞(Amanita virosa)等毒蘑菇中所含的极毒物质,其所含毒素主要包括两类环形毒肽,一类是毒伞毒素,统称毒伞肽(amatoxins);另一类是鬼笔毒素,统称毒肽(phallotoxins)。毒肽作用速度快,主要作用于肝脏。毒伞肽作用较迟缓,但毒性较毒肽大20倍,能直接作用于细胞核,有可能抑制RNA聚合酶,并能显著减少肝糖元而导致肝细胞迅速坏死。该毒素的毒性稳定,具有耐高温和耐干燥的特点,一般烹调方法不被破坏。该毒素每100g新鲜毒伞含这两种毒素可达10~15mg,一只50g的鲜毒伞足以致人死亡。且引起中毒死亡的比例占所有毒蘑菇中毒死亡的95 %以上。 9.6.2有毒食用菌的判别
蘑菇是否有毒,主要从以下几个方面进行判别。
①形状 有毒蘑菇的菌盖中央呈凸状,形状怪异,菌面厚实硬板,菌杆上
有菌轮,菌托杆细长或粗长,且容易折断,下部菌托根部生有囊胞,菌杆很难用手撕开。而无毒蘑菇的菌盖较平,伞面平滑,菌杆上无菌轮,下部无菌托,菌杆易用手撕开。
②颜色 有毒蘑菇菌面颜色鲜艳,有红、绿、、黄、墨黑、青紫等颜色,特别是紫色的往往有剧毒,采摘后易变色。无毒蘑菇则多呈白色或茶褐色,采摘后不易变色。
③生长地带 有毒蘑菇往往生长在肮脏、阴暗、潮湿、有机质丰富的地方地带;可食用的无毒蘑菇多生长在较干净、清洁的草地或松树、栎树上。
④闻气味 有毒蘑菇有怪异味,如辛酸、苦辣、涩、恶腥等味;无毒蘑菇有特殊香味,很鲜美。
⑤分泌物 从分泌物上看,有毒蘑菇的菇的盖或受伤部位,常分泌出粘稠浓厚液体,呈赤褐色,菇盖撕裂后在空气中易变色。而无毒蘑菇一般较为干燥,折断后分泌出的液体为清亮如水(个别为白色),菇盖撕裂后一般不变色。
⑥测试 在采摘野蘑菇时,可用葱在蘑菇盖上擦一下,如果葱变成青褐色,证明有毒,反之不变色则无毒。
⑦煮试 在煮野蘑菇时,放几根灯芯草和大蒜或大米同煮,蘑菇煮熟,灯芯草变成青绿色或紫绿色则有毒,变黄者无毒;大蒜或大米变色有毒,没变色仍保持本色则无毒。
⑧化学鉴别 取采集或买回的可疑蘑菇,将其汁液取出。用纸浸湿后,立即在上面加一滴稀盐酸或白醋,若纸变成红色或蓝色的则有毒。
以上几种方法虽能大概判别出蘑菇是否有毒,但是,以上只是经验。因此,为防止毒蕈中毒的发生,还要注意几点:广泛宣传毒蕈中毒的危险性,有组织的采集蕈类,在采蘑菇时应由有经验的人指导,切勿采摘自己不认识的蘑菇食用。毫无识别毒蘑菇经验者,千万不要自采蘑菇;让群众掌握毒蘑菇与普通蘑菇的形态特征,提高辨别毒蘑菇的能力。不随意采集野外蘑菇食用,尤其对一些色泽鲜艳,形态可疑的蘑菇应避免食用;已经确认为毒蘑菇时,决不能食用,也不要将其饲喂给畜禽,以免引起食物中毒。 9.6.3 有毒食用菌的理化检验 9.6.3.1毒蝇碱的检验
取适量样品,用l∶19(体积比)氨水和乙醇溶液提取,氨水可使毒蝇碱的
氯化物转变成为毒蝇碱的氢氧化物,经减压浓缩后,使其与四硫氰基二氨铬酸铵生成沉淀而与杂质分离。沉淀经洗净后,溶解在丙酮中,加入硫酸银和氯化钡溶液,使氯化毒蝇碱转入溶液。溶液再减压浓缩,成为点样液。在pH值4.5条件下,于层析纸上点样,以正丁醇∶甲醇∶水(10∶3∶20,体积比)作为展开剂,展开2h,取出层析纸晾干,用碱式碳酸铋、碘化钾和冰乙酸混合液作为显色剂,喷于层析纸上。如在Rf值0.28附近出现暗橙色斑点,则表示有毒蝇碱存在。 9.6.3.2毒肽的检验
称取适量样品于烧杯中,加入一定量甲醇并加热,不断用玻棒搅拌,过滤,尽量压出样品中溶剂,于蒸汽浴上蒸干。将残渣用几滴甲醇溶解,此样即为待检液。将待检液点样于层析纸上,然后以丁酮∶丙酮∶水∶正丁酮(20∶6∶5∶1,体积比)作为展开剂,展开40min,取出层析纸于空气中挥干,将层析纸条以浓盐酸熏5~10min,然后取出纸条观察,若有一个或几个紫色或蓝色斑点出现,则表示有毒肽类化合物存在。若出现橙色、黄色或粉红色斑点,则认为是阴性。 9.6.3.3毒伞肽的检验
称取适量的样品于研钵中,加入一定量甲醇磨浆,过滤,收集滤液,浓缩滤液至1ml。将浓缩液点于硅胶G薄层板上,然后以甲醇∶丁酮(1∶1,体积比)作为展开剂展开,展开后将薄层板晾干,用1%肉桂酸甲醇溶液喷洒,室温晾干后,用浓盐酸熏10min,毒伞肽呈现紫色斑点。Rf值分别为α-毒伞肽0.46,β-毒伞肽0.23。
本章小节
本章主要概述了黄曲霉菌、赭曲霉菌等几种易造成食品污染,引起人类食品中毒的真菌及其毒素;阐述了这些真菌的生长特性、所产毒素的理化性质和毒理作用;重点分析了不同真菌的毒素检测方法和检出限量。
思考题
1. 简述黄曲霉菌的生长特性、其毒素的理化性质和主要的检测方法。 2. 什么叫真菌性食物中毒和真菌毒素中毒症?试举例说明。 3. 食用菌是否有毒常用哪些方法进行鉴别?