酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，反过来CV103不能在过滤的培养过CV101的培养基中生长，据此作出的推测是： 。请设计并完成下列实验步骤，来验证你的观点。 ①配制 的培养基；
②将CV101和CV103菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。
③预期实验结果： 。 5.（延庆一模，31）（16分）夏天做熟的食品很快就会腐败变质，俗称“变馊了”。这是什么原因呢？自17世纪发现微生物后，人们相信微生物是导致食物变质的原因。对此，法国生物学家巴斯德（1822—1895）进行了认真地实验研究。他得出微生物不是由食品自然产生而是来自于空气。下图是某生物小组模拟巴斯德著名的“鹅颈瓶”实验示意图。A瓶、B瓶内都装有煮沸放冷的肉汤。
（1）一段儿时间后会发现A瓶内肉汤 ，B瓶内肉汤 ，可见，“鹅颈瓶”中弯曲玻璃管的作用是 。 （2）实验组与对照组控制的实验变量是 。
（3）为什么在实验前要把肉汤煮沸 。
（4）为了进一步证明该实验的结论，可对A瓶进行怎样的处理 ，能得到
与B瓶相同的实验现象。
（5）假如肉汤中含有大肠杆菌，当接种少量大肠杆菌用LB液体培养基培养时，培养液中出
现_______现象时，说明大肠杆菌已大量增殖。为进一步确定大肠杆菌的数量可采用______________法。
(6) 假如肉汤中含有的酵母菌，当在一定量的酵母菌培养液 中刚开始培养时，抽样镜检，视野下如图甲所示(图中 小点代表酵母菌)。将容器放在适宜温度下恒温培养5 小时后，稀释100倍，再抽样镜检，视野下如乙图所示。 根据实验结果判断，培养5小时后，酵母菌种群密度 增加 倍左右。
（7）酵母菌液放入血球计数板直接计数,测得的数目是（ ）
A.活细胞数 B.死细胞数 C.菌落数 D.细胞总数
答案：
3.（除注明外其余每空2分，共16分）
（1）梯度稀释 七叶苷和柠檬酸高铁铵
4(1分) 产酶时间最短且黑色圈直径最大、颜色很深 （2）①碳源和氮源 离心 上清液 (1分)
②单位时间内、单位体积中葡萄糖（七叶素）的生成量或答单位时间内、单位体积
中纤维二糖（七叶苷）的消耗量 5～8(1分) 碱性(1分) 4.（15分，第1、2小题每空2分，第3、4小题每空1分。）
（1）液体培养基 碳源 氮源、无机盐、水（2）基因突变 基因突变的不定向性 （3）竞争 进化（或自然选择）
（4）CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源①以醋酸盐为唯一碳源
②CV101菌株能生长，CV103菌株不能生长。
5.（16分）（1）新鲜（不变质） 变质（不新鲜） 空气可通过微生物不能通过 （2）有无微生物 （3）杀死肉汤中的微生物，排除微生物来源于肉汤本身（灭菌） （4）打断瓶颈 （5）浑浊（1分） 稀释涂布平板（或稀释涂布）（1分） （6）200（1分）（7）D（1分） 注：评价标准中未注明分数的，每空2分。
微生物的培养与应用 作业题
1.（2010．朝阳区二模.T4）耐冷菌是生活在低温环境下的一类微生物，在0－5℃可生长繁殖，最高生长温度一般在30 ℃左右。关于耐冷菌下列选项中不正确的是 A. 耐冷菌参与代谢的酶在低温下仍具有较高的催化活性
B. 不同取样地点相比较，北方寒冷地区水土中较易分离出耐冷菌
C. 探究耐冷菌生活的最适温度，自变量应为温度，无关变量应相同且适宜
D. 分离纯化耐冷菌的过程中，使用过的培养基及培养物必须经过消毒处理后才能丢弃 2.（11年新课标卷，T39）（15分）
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
⑴在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
⑵纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。 ⑶为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
⑷通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
3、(2011·上海高考·十)分析有关微生物的资料，回答问题。 1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。
(1). 幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为 。
(2). 上图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基（琼脂含量3.5g/L）中的生长状态，其中②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，由图判断，该菌在 条件下不能生长。乳酸菌的生长状态最能由试管 代表。 (3). 下表是某培养基的配方。 成分
葡萄糖
含量
10g
KH2PO4 0.2g
MgSO4 0.2g
0.2g NaCl
CaSO
4
CaCO3 5g
琼脂 蒸馏水
0.2g 3.5g 1L
将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，置于37℃下培养一段时间后，在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时 ，主要原因是： 。 4.（11天津理综卷）（14分）絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。其流程图如下。
据图回答：
（1）溶菌酶的作用是_________________________。 （2）PEG的作用是_________________________。
（3）经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是____________________________________________________________________。 （4）目的菌株的筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_________________的培养基上生长的AB融合菌，选择效果最好的最为目的菌株。
（5）为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中：同时设置_____________________________为对照组。经搅拌、静置各3分钟后，分别测定上层水样的石油浓度COD值（COD值越高表示有机物污染程度越高）,计算石油去除率和COD去除率，结果如下图。
（6）目的菌的种群增长曲线是__________________型。在40～44小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是
_________________________________________________________。 2.⑴原油 选择
⑵平板划线法 稀释涂布平板法 ⑶强。
⑷干热灭菌法 高压蒸汽灭菌法 火焰
3. (1)拟核（核区） (2)氧气浓度过高或过低 ③ (3)少 缺少氮源（缺少氮源和生长因子）
4.（14分）(1)分解细胞壁 (2)诱导原生质体融合 (3)两亲本失活部位不同，融合后活性部位互补 (4)石油 (5)不加发酵液的石油浅水 (6)S 此期间，目的菌及其产生的絮凝活性高分子化合物的含量高