实验 DNA粗提取与鉴定
〖教学目标〗
初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法 〖思维引领〗
一．不同细胞的DNA的在存在部位上有何不同？ 如原核细胞、酵母菌、人的红细胞等
二．已知鸡的血细胞中含有较多的DNA，如何能获取鸡血细胞中的DNA？ 需要解决两个问题：
如何将DNA从细胞中释放出来？如何将DNA与其他物质分开？
请学生阅读实验原理尝试填写学案中实验步骤4-9中空白部分 〖实验原理〗
DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl的浓度的变化而改变。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时，DNA的溶解度最低，低于此浓度或高于此浓度溶解度升高（如右图）。
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶解。 〖实验步骤〗
１. 将0.1g/ml的柠檬酸钠溶液按1:2的比例与新鲜鸡血混合搅拌均匀。 柠檬酸钠溶液的作用：________________________________________ ２. 静止去上清液，下部沉淀为：_______________________________
３. 取底部血细胞液约5~10ml加入到100ml烧杯中，向烧杯中加入20ml ，用玻棒
沿一个方向快速搅拌5分钟，目的是：___________________
４. 将50ml 缓缓倒入烧杯中，用玻棒沿一个方向搅拌，此时DNA溶解于
氯化钠溶液中，滤除杂质，获得粘稠状的鸡血细胞DNA提取液
５. 将鸡血细胞DNA提取液置于较大的烧杯中，沿烧杯内壁缓缓倒入 ，并不断
搅拌，直到粘稠状DNA不再析出为止。 ６. 过滤，取 （滤液或沉淀）
７. 将DNA黏稠物重新溶解于 （蒸馏水或2mol/L的氯化钠溶液） ８. 过滤含有DNA的氯化钠溶液取 （滤液或沉淀）
９. 在DNA的氯化钠溶液中倒入95%的酒精50 mL（冷却过的酒精效果较好），使DNA （溶解或析出）
10. 用玻棒搅拌，使DNA再次缠绕于玻棒末端。
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三．如何确定所提取出的物质是不是DNA呢？
请学生阅读实验原理，尝试填写实验步骤11中空白部分 〖实验原理〗
DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 〖实验步骤〗
11. DNA的鉴定：取两支试管，各加入2mL 2mol/L氯化钠溶液，将DNA溶解于其中一支试管中，另一支做为对照组。然后，在两支试管内加入相同的量的 ， （填反应条件）10min左右，冷却，预测实验现象： 思考：
如果对植物进行DNA提取，哪些步骤可能不同？ 如何利用提取到的DNA获取目的基因？
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