答：甘露聚糖在机体内能被降解，因此抗甘露聚糖抗体的检测可以弥补甘露聚糖检测的局限性，尤其是抗体和甘露聚糖联合检测，可以大大提高诊断的敏感性和特异性。
Fasahat F Alam等对31例感染念珠菌的患者进行研究发现，检测念珠菌甘露聚糖敏感性为41%；甘露聚糖抗体敏感性为47%；甘露聚糖和甘露聚糖抗体联合检测，敏感性可显著提高至75%。
国外另一项研究发现，检测念珠菌甘露聚糖敏感性为58%，特异性为93%；甘露聚糖抗体敏感性为59%，特异性为83%；甘露聚糖和甘露聚糖抗体联合检测，敏感性可达83%，特异性为86%。
6. 抗原和抗体联合检测的优势是什么？
答：鉴于侵袭性真菌感染的隐蔽性和发病的特点，建议在使用实验室手段进行侵袭性真菌感染诊断时应采取多种方法的联合检验，强调真菌培养和非培养技术的结合，各种非培养技术之间的联合。例如，抗原抗体联合检测。抗原和抗体的联合检验的优势：
（1）优势互补，提高检测的敏感性和特异性。 （2）能更准确地反映感染程度及阶段。
（3）用药前后抗原抗体的检测值变化可为临床用药的评价提供依据，有利于疾病的预后。
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7. 怎样设计念珠菌抗原抗体联合检测方案？
答：可参考如下方案
8. 怎样分析真菌抗原和抗体联合检测结果？
答：真菌抗原和抗体联合检测结果分析见表3-1，仅供参考。
表3-1 抗原、抗体联合检测结果判定
抗原 抗体 临床分析 + + 侵袭性真菌感染
+ - 早期感染/未产生抗体或免疫力低下/无抗体产生 - + 感染一段时间/抗原可能分解/抗原被抗体中和
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- - 无侵袭性真菌感染
9. 商品化的念珠菌抗体检测试剂盒有哪些？
答：商品化的念珠菌抗体检测试剂盒，国外产品有伯乐（Bio-Rad）公司生产的Platelia Candida Ab-Ac-Ak抗体检测试剂盒，德国Virion Serion公司生产的IgA、IgM、IgG抗体检测试剂盒，美国IBL公司生产的IgA、IgM、IgG抗体检测试剂盒；国内产品有天津贻诺琦（Bio-Enoche）生物工程有限公司（中美合资）生产的念珠菌IgM、IgG抗体检测试剂盒（ELISA）。
10. 念珠菌抗体检测试剂盒原理？
答：念珠菌IgM、IgG抗体检测试剂盒（ELISA）原理相同，均采用ELISA间接法。将预处理后的患者血清（或血浆）样本加到包被有念珠菌抗原的酶标板中，血清（或血浆）中的念珠菌IgM或IgG抗体与固相抗原结合，再加入抗人IgM酶标抗体或抗人IgG酶标抗体，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，最后加四甲基联苯胺（TMB）底物产生显色反应，用酶标仪在450nm波长下测定其吸光度，吸光度值与待测物浓度成正比，通过标准曲线对样本中念珠菌IgM或IgG抗体浓度进行定量分析。
11. 国产念珠菌IgM、IgG抗体检测试剂盒性能指标？
答：上述国产念珠菌IgM、IgG抗体检测试剂盒分析灵敏度为31.25AU/mL；特异性均大于90%；测范围均为31.25~500AU/mL；与德国Virion Serion公司IgM、IgG抗体检测试剂盒总体符合率分别为80.9%（36例对比）和71.4%（35例对比）。
12. 念珠菌IgM抗体检测为什么样本需要预处理？
答：样本处理的目的是去除类风湿因子的干扰。类风湿因子是一种以变性
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IgG为抗原的自身抗体，主要为IgM型。进行IgM抗体检测时，它的存在会导致假阳性结果。此外，结合力强的病原体特异性IgG抗体也可能取代结合力弱的病原体特异性IgM抗体与抗原结合，造成IgM检测假阴性结果的出现。因此，进行白色念珠菌IgM抗体检测前需用类风湿因子吸附剂吸附掉血清中可能存在的类风湿因子。
13. 为什么念珠菌IgM、IgG抗体检测浓度单位是AU/ml？
答：目前，尚无念珠菌IgM和IgG的国际标准品和国家标准品，根据1995年国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）和国际临床化学和实验室医学联盟（IFCC）推荐的“临床实验室物质特性和单位命名规则”（PROPERTIES AND UNITS IN THE CLINIC LABORATORY SCIENCES I. SYNTAX AND SEMANTIC RULES），使用AU/ml（arbitrary unit）作为浓度单位（该单位不是国际统一单位）。
14. 开展念珠菌抗体检测需用什么仪器设备？
答：需要使用的仪器包括：酶标仪（450nm）、恒温箱（37℃）、离心机、混旋器等。
第三节 曲霉菌抗原和抗体测定
一、曲霉菌抗原测定
1. 为什么检测半乳甘露聚糖可用于侵袭性曲霉菌病（IA）的早期诊断？
答：半乳甘露聚糖（galacto-mannan，GM）是曲霉细胞壁上的一种多聚抗原，其中具有免疫反应性的是呋喃半乳糖，菌丝生长时能从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的真菌抗原。GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。GM在感染后24小时（感染早期）即可检测到，与病情严重程度一致。有2/3的患者在
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临床症状和影像学出现异常或其它诊断方法阳性之前6-14天即可检测到GM，对高危患者连续动态监测（每周2次）具有早期诊断价值。GM试验可用于曲霉菌感染早期诊断的筛查指标。
欧洲癌症研究和治疗组织和美国真菌病研究组(EORTC/MSG)已经把半乳甘露聚糖（GM）作为诊断曲霉病的标准之一。中国侵袭性真菌感染工作组经反复讨论，并参照欧洲癌症研究和治疗组织和美国真菌病研究组(EORTC/MSG)有关标准，同样把血清中半乳甘露聚糖（GM）阳性作为诊断曲霉病的标准。
2. 半乳甘露聚糖检测还有什么临床意义？
答：国内外的荟萃分析结果表明，其诊断的灵敏度和特异性均高达90%左右。患者血清中GM含量与感染程度相关，动态监测血清GM水平的变化可作为病情转归和疗效评价指标。在治疗期间，病人GM持续阳性或保持较高水平则预后差，GM抗原清除早的病人预后好。但是对非粒缺患者的诊断价值尚有争议。
3. G试验和GM试验联合检测可提高IA诊断准确率？
答： GM试验和G试验发生假阳性的人群不同。GM 试验在巨细胞病毒血症、铜绿假单胞菌和化疗后金葡菌和表葡菌感染者血清中会出现假阳性，但这些患者G试验则为阴性；而出现G试验假阳性的白念珠菌定植者GM 试验则为阴性。因此，当两者都出现阳性时可以基本诊断IA，两者联合使用可最大程度地降低假阳性率。
另有学者研究发现单独GM试验灵敏度为70%，特异性为84%；单独G试验灵敏度为50%，特异性为92%。GM试验和G试验二者联合试验时，其灵敏度和特异性分别为93%和78%。GM试验和G试验均对侵袭性真菌病具有诊断价值，二者联合应用使其应用价值进一步提高。
4. 商品化的半乳甘露聚糖抗原检测试剂盒有哪些？
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