答：目前，商品化的曲霉菌半乳甘露聚糖抗原检测试剂盒较少，国外产品有伯乐（Bio-Rad）公司生产的PLATELIA? ASPERGILLUS EIA试剂盒；国内产品只有天津贻诺琦（Bio-Enoche）生物工程有限公司（中美合资）生产的曲霉菌半乳甘露聚糖抗原检测试剂盒。
5. 曲霉菌半乳甘露聚糖检测试剂盒原理？
答：伯乐（Bio-Rad）公司PLATELIA? ASPERGILLUS EIA试剂盒原理：该试剂盒采用一步夹心法，待检血清（或血浆）中的半乳甘露聚糖与包被在酶标板上的鼠单抗（捕获抗体）及辣根过氧化物酶标记的鼠单抗（检测抗体）形成抗体-抗原-抗体复合物，再加入底物显色，在酶标仪450nm处测定吸光度值，测定值和待检抗原的浓度呈正相关，以临界值（Cutoff）对待检标本中是否含有半乳甘露聚糖进行定性分析。
贻诺琦（Bio-Enoche）公司试剂盒原理：该试剂盒采用竞争法， 先将半乳甘露聚糖包被在酶标板上，再加入待检血清（或血浆）和辣根过氧化物酶标记的半乳甘露聚糖抗体，此时，待检标本中的半乳甘露聚糖及半乳甘露聚糖标准品与酶标板上的半乳甘露聚糖竞争性结合有限的抗体结合位点，再加入底物显色，在酶标仪450nm处测定吸光度值，测定值和待检抗原的浓度呈负相关，可根据半乳甘露聚糖标准品绘制标准曲线并计算待检标本中半乳甘露聚糖的浓度。该试剂盒可进行定量或定性分析。
6. 半乳甘露聚糖定量检测有什么临床意义？
答：半乳甘露聚糖定量检测试剂盒与定性试剂盒相比不但可以进行定性分析，还可对半乳甘露聚糖精确定量，有利于判断患者侵袭性曲霉感染的严重程度。此外，半乳甘露聚糖含量的动态监测在抗真菌药物疗效观察、停药时机的选择及预后等方面有重要临床意义。
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7. 国产半乳甘露聚糖ELISA试剂盒性能指标如何？
答：上述国产半乳甘露聚糖ELISA试剂盒分析灵敏度0.1ng/ml；特异性达89%；测范围为0.1-10ng/ml；与Bio-Rad公司PLATELIA? ASPERGILLUS EIA检测试剂盒进行对比试验（109例样本），阳性符合率91.4%，阴性符合率85.2%。
8. 哪些标本可用于半乳甘露聚糖检测？
答：标本可以是血清、尿液、脑脊液及肺泡灌洗液（BAL）等，但敏感性和特异性有所不同。
9. 待检标本为什么需要预处理？
答：血清或血浆标本均需要预处理。标本与处理液混合后加热，可以： （1）将标本中的抗原-抗体复合物解离，有利于抗原检测。 （2）将标本中的蛋白质变性并沉淀，减少其对免疫测定的干扰。
10. 标本如何进行预处理？
答：在离心管中加300μL待检血清或血浆，再加入100μL样本处理液，漩涡震荡10秒混匀，将离心管放入水浴锅内100℃加热90秒后10000g离心10分钟，取上清即可进行检测。
11. 半乳甘露聚糖检测试剂盒需要做标准曲线和质控吗？
答：为消除系统误差和保证实验的准确性、可靠性，每次实验都必须做标准曲线和阴性、阳性质控，并在质控品不失控的前提下才能进行数据分析。
12. 哪些因素可造成半乳甘露聚糖检测假阳性？
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答：抗菌药物如哌拉西林、他唑巴坦、阿莫西林、克拉维酸等与GM有交叉反应，因此在接受这些药物治疗的患者中ＧＭ试验的特异性可能会下降。GM试验的假阳性率为10%-15%，一般在以乳制品为主食的婴幼儿、异体骨髓移植患者、菌血症患者、自身抗体阳性及使用半合成青霉素的患者中较易出现。
13. 半乳甘露聚糖检测的局限性？
答：GM检测对中性粒细胞减少患者感染曲霉的诊断价值较高，但对儿童、肿瘤及ICU 危重患者、中性粒细胞不减少或减少不严重的其他IA 高危人群诊断价值有限。对此现象的解释是由于中性粒细胞能吞噬并快速杀伤菌丝，使体内真菌载量降低，从而使释放入血液的GM 减少而难以检出。
14. 开展GM检测需用什么仪器设备？
答：需要使用的仪器包括：酶标仪（450nm）、恒温箱（37℃）、离心机、水浴锅、混旋器等。
二、曲霉菌抗体测定
1. 曲霉菌抗体检测临床意义？
答：曲霉抗体的研究没有念珠菌抗体那么广泛和深入。Latgé 等研究小组报
道，约1/2的IA 患者产生曲霉特异性抗体。Sambatakou 等进一步证明，抗体测定对非中性粒细胞减少的亚急性侵袭性曲霉病（invasive aspergillosis，IA）患者是最好的无创诊断方法。Kappe R等研究发现，总体大约23%的侵袭性曲霉感染患者曲霉抗体检测呈阳性，免疫力低下的病人在用药有效后10.8天左右能检测到抗体产生。抗体检测尤其是ELISA法IgG抗体检测对临床诊断的确认和临床用药的评价有着十分重要的意义。
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2. 商品化的曲霉菌抗体检测试剂盒有哪些？
答：商品化的曲霉菌抗体检测试剂盒，国外产品有伯乐（Bio-Rad）公司生产的Platelia? Aspergullus IgG抗体检测试剂盒，德国Virion Serion公司生产的IgA、IgM、IgG抗体检测试剂盒，美国IBL公司生产的IgA、IgM、IgG抗体检测试剂盒；国内产品有天津贻诺琦（Bio-Enoche）生物工程有限公司（中美合资）生产的曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒（ELISA）。
3. 曲霉菌抗体检测试剂盒原理？
答：曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒（ELISA）原理相同，均采用ELISA间接法。将预处理后的患者血清（或血浆）样本加到包被有曲霉菌抗原的酶标板中，血清（或血浆）中的曲霉菌IgM或IgG抗体与固相抗原结合，再加入抗人IgM酶标抗体或抗人IgG酶标抗体，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，最后加四甲基联苯胺（TMB）底物产生显色反应，用酶标仪在450nm波长下测定其吸光度，吸光度值与待测物浓度成正比，通过标准曲线对样本中曲霉菌IgM或IgG抗体浓度进行定量分析。
4. 国产曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒性能指标？
答：上述国产曲霉菌IgM、IgG抗体检测试剂盒分析灵敏度分别为8 AU/mL、31.25AU/mL；特异性均大于90%；测范围分别为8~64AU/mL、 31.25~500AU/mL；与德国Virion Serion公司IgM抗体检测试剂盒总体符合率为96.8%（31例对比）。
5. 曲霉菌IgM抗体检测为什么样本需要预处理？
答：样本处理的目的是去除类风湿因子的干扰。类风湿因子是一种以变性IgG为抗原的自身抗体，主要为IgM型。进行IgM抗体检测时，它的存在会导致假阳性结果。此外，结合力强的病原体特异性IgG抗体也可能取代结合力弱的病原体特异性IgM抗体与抗原结合，造成IgM检测假阴性结果的出现。因此，
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进行曲霉菌IgM抗体检测前需用类风湿因子吸附剂吸附掉血清中可能存在的类风湿因子。
6. 为什么曲霉菌IgM、IgG抗体检测浓度单位是AU/ml？
答：目前，尚无曲霉菌IgM和IgG的国际标准品和国家标准品，根据1995年国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）和国际临床化学和实验室医学联盟（IFCC）推荐的“临床实验室物质特性和单位命名规则”（PROPERTIES AND UNITS IN THE CLINIC LABORATORY SCIENCES I. SYNTAX AND SEMANTIC RULES），使用AU/ml（arbitrary unit）作为浓度单位（该单位不是国际统一单位）。
7. 开展曲霉抗体检测需用什么仪器设备？
答：需要使用的仪器包括：酶标仪（450nm）、恒温箱（37℃）、离心机、混旋器等。
8. 曲霉菌抗原抗体联合检测方案是什么？
答：可参考如下方案
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