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对照品溶液的制备：精密称取真空干燥至恒温的黄芩苷对照品12.5mg置50mL容量瓶中，加50%甲醇适量，置水浴中振摇，使溶解，放置至室温，稀释至刻度即得浓度为0.25mg/mL的溶液。
供试品溶液的制备：取重量差异下双黄连颗粒研细，用电子天平称取供试品M=3.0000g，置100ml容量瓶中加50%甲醇适量，超声处理20min，放置至室温，稀释至刻度，摇匀。滤过，精密量取滤液2ml置100ml容量瓶中至刻度，摇匀，滤过，再精密量取续滤液2ml置100ml容量瓶中摇匀。滤过，精密量取滤液1ml置10ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀即得。
标准曲线的绘制：精密量取对照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml,分别置100ml容量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，于277nm和377nm波长处分别测吸光度A值，并且计算△A，以△A对浓度y进行线性回归，得标准曲线方程。
供试品吸光度测定：取供试品溶液于277nm和377nm波长处分别测吸光度，分别为A1、A2，得△A=A1－A2，根据回归方程计算样品中黄芩苷的含量。
2.4 复方双黄连胶囊的药效研究
选用健康雄性小白鼠4只，称重，并分别用苦味酸标记。随机分成给药组（1号，2号，3号）和对照组，并且标号。每鼠左耳两面涂二甲苯约0.02mL，右耳做空白对照。分别取0.0836g，0.1672g，0.2508g药配成7ml溶液,并且分别标上标签1号，2号，3号。30min后，两组分别灌胃给药0.7ml(最大给药量为0.3ml/10g)。给药组：取相对应的配置的1号，2号，3号药液灌胃。对照组：给等量蒸馏水（代替生理盐水）。4h后，将小鼠处死，剪下双耳并在同一部位打圆耳片，扭力天平称重，以（左耳重-右耳重）/右耳重 作为肿胀率，比较差异。
3 结果与讨论
3.1．黄芩、连翘和金银花的提取 【结果】
提取得到黄芩粉末8.7g，一定量金银花、连翘稠膏。
【讨论】
1、水煎法提取出的连翘，金银花，黄芩的量相对超声提取法、回流提取法等其他溶剂提取
法得到的量较多，并且设备简单，操作简单，是中药提取的好方法。
但同时要注意的是：提取出的药量大，多糖、鞣质等杂质也较多，多糖等成分粘性很大，会造成后期制粒时软材粘性过大，影响制粒。
2、煎煮时要注意补充水分，保持药液微沸即可，不要过大的火力加热，并且在煎煮过程中经常用玻璃棒搅拌，防止药材煎糊使药物有效成分减少，产生毒副物质。
3、黄芩提取过程中，采取80℃保温一小时的措施，目的是便于黄芩苷的析出，凝集成较大的颗粒易于沉降和过滤，注意保温尽量保持静止稳定，使之充分受热沉降。
3.2．双黄连胶囊的制备 【讨论】
1、 制软材和制湿粒的过程中出现较多问题：
①在制软材时候，由于没有预先查好资料，导致崩解剂羧甲基淀粉钠和润滑剂硬脂酸镁过早的加入，影响了其崩解和润滑效果，这样不但不能加快胶囊崩解，而且还会延迟胶囊崩解。
②由于采用水煎法提取的金银花和连翘，因此含多糖、鞣质等杂质比较多，而多糖等的粘性本身就很大，并且加入辅料的次序及用量不太恰当，金银花连翘稠膏过于黏稠，其
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中的水分太少，导致在制备软材的过程中，加入黄芩、金银花连翘药材粉末和各种辅料的时候，越搅拌粘性越大，最后直接搅拌不了，并且冷却后制备的软材特别硬（像石头一样硬）。制软材失败，只能用粉碎机将其粉碎，然后再加辅料进行制备。
③制湿粒时，经过反复过筛、加辅料、用手混合的过程才勉强制成的。由于没有掌握好制备软材和湿粒的技巧，导致在此过程中浪费了大量的药材和辅料。
④由于提取的金银花和连翘稠膏本身粘性就很大，所以在选择辅料的时候就要选择粘性不大的辅料，如微晶纤维素，和稀释剂淀粉。
⑤我认为要想得到比较理想的软材和湿粒除了要掌握相应的理论知识以外，更重要的是需要一定的制备软材的经验。有时候，辅料多一点或者是少一点都会导致软材的制备失败，因此，我们就需要多加练习，积累制备经验。 2、 处方分析：
金银花+黄芩+连翘粉 主药
微晶纤维素 填充剂和粘合剂 羧甲基淀粉钠 崩解剂 硬质酸镁 润滑剂 乙醇 润湿剂
淀粉 填充剂和稀释剂
3.3 复方双黄连胶囊的鉴别、质量检查和含量测定结果 3.3.1.复方双黄连胶囊的质量检查结果 1、装量差异结果
胶囊总重量：6.5005g 胶囊平均重量：0.4643g 胶囊壳重量：1.3942g 囊壳平均重量：0.0996g
表3-3-1 胶囊装量差异统计
标号 1 胶囊重量(g) 囊壳重量（g） 内容物装量（g） 装量差异（%） 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 112 113 14 0.470.450.470.460.450.450.460.470.440.470.400.4600.4550.4701 03 61 17 90 87 64 22 72 10 673 550 33 29 0.100.090.100.090.090.090.090.090.090.100.000.1000.1000.1059 73 62 55 66 84 62 51 64 80 958 221 00 07 0.360.350.360.370.360.360.370.370.350.360.300.3600.3550.3742 30 99 16 24 03 02 71 08 30 715 229 33 22 0.14 3.21 -1.4-1.80.63 1.21 -1.5-3.43.81 0.47 -1.00.49 22.58 -2.03 9 1 0 86 6 【讨论】 由以上数据可得：本组胶囊的平均装量均＞0.3g，装量差异均在±7.5%范围内，因此
本组胶囊装量差异符合要求。
2、崩解时限结果
6粒胶囊崩解时限：4min内全部崩解
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【讨论】
由以上数据可得：本组胶囊均在30min之内崩解完全，因此崩解时限符合规定。
3.3.2 复方双黄连胶囊的鉴别结果
连翘薄层鉴别结果如下： 金银花波层鉴别结果如下：
黄芩薄层鉴别结果如下：
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【讨论】
1、 连翘：如以上薄层层析结果所示，供试品与连翘对照药材和连翘苷对照品色谱相应的位
置上，显相同颜色（紫黑色）的斑点，即制备的复方双黄连胶囊中含有连翘。
2、 金银花：如以上薄层层析结果所示，供试品的薄层结果为3个斑点(棕黄色)，而金银花
对照药材只出现一个斑点，绿原酸对照品没有出现斑点。这样的结果不能说明制备的复方双黄连胶囊中含有金银花。
分析其原因：①点样的过程中，点样量过低②配制的金银花对照黄芩苷药材溶液和和绿原酸对照品溶液有问题，可能在配制的过程中出现差错。
3、 黄芩：如以上薄层层析结果所示，供试品与对照药材均出现3个斑点（绿色），但是不
是在相应位置上，对照药材出现的斑点的Rf值比对应的供试品斑点的Rf值大，即对照药材在薄层板上跑的比较快。原因分析：在薄层板展开的过程中，薄层板没有放平，导致对照药材一边展开速度比较快。黄芩苷对照品的斑点极其浅，几乎看不到。原因可能是点样量过少或是黄芩苷对照品溶液的配置有问题。这样也稍微能够得出制备的复方双黄连胶囊中含有黄芩。
4、 在展开前，应该将展开缸用展开剂进行预饱和，防止在展开的过程中出现边缘效应。并
且，在展开前，应该振摇展开剂，否则展开剂会出现分层现象，影响展开效果。
3.3.3. 复方双黄连胶囊含量测定结果
1、标准曲线方程：y=0.0332△A +0.0061，R2=0.9979
表3-3-3 供试品吸光度测定结果
波长（nm） 277 吸光度A 0.356 △A(A1－A2) 0.286
377
0.070
2、黄芩苷的含量%计算
代入标准曲线计算公式得黄芩苷浓度：y=0.0156mg/ml 稀释倍数为：50000倍 黄芩苷的重量计算：
m=y×50000=0.0156×50000=780g,即0.78g 黄芩苷的含量计算：
黄芩苷的含量%=m/M×100%=0.78/3.0000×100%=26.0% 【讨论】
1、 一般情况下，每粒胶囊中黄芩苷的量为≥50mg，含量约为11.6%,可见制备的复方双黄连
胶囊黄芩苷的含量偏高。之所以偏高是因为，在制软材的时候，加的辅料量太少。 2、 含量测定的时候，本来制备的黄芩苷溶液稀释倍数为5000倍，但是由于所测得的吸光
度A值为2.345，而正常情况下A值的范围为0.3－0.7，A值太大，影响吸光度的精确性，因此又稀释了10倍。
3.4 复方双黄连胶囊的药效研究结果 编号
小鼠重量\\g
空白 21.79
表3-4-1 4只小鼠的重量
1号 2号 21.81 23.30
3号
24.08
因为4只小鼠重量均接近22g,因此近似取小鼠的重量为22g来计算每只小鼠的给药量。并
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且，一般一粒双黄连胶囊约为0.53g,黄芩苷含量约为50mg，而制备的黄芩苷为26.0%，换算出来的含黄芩苷为50mg的胶囊剂为0.19g。 给药量分别为：
1号：(0.19g×2×3/75000g)×22g×25＝0.00836g 2号：(0.19g×2×3/75000g)×22g×50＝0.01672g 3号：(0.19g×2×3/75000g)×22g×75＝0.02508g
表3-4-2 4组小鼠肿胀率结果
编号 小鼠给药量\\g 左耳重\\g 右耳重\\g 空白 0.00000 0.0088 0.0048 1号 0.00836 0.0065 0.0050 2号 0.01672 0.0058 0.0046 3号 0.02508 0.0053 0.0048
表3-4-3 全班小鼠肿胀率统计结果 肿 胀 肿胀率\\％ 83.3 30.0 26.1 10.4
率 组 别 \\% 给 药 量 1 83.3 30.0 26.1 10.4
2 55.4 36.8 27.6 3.5
3 55.36 12.24 10.64 7.84
4 44.64 27.27 18.37 12.50
5 291.4 109.1 96.1 70.7
6
7 8 9 10 87.7 62.3 6.7 0
空白 小剂量 中剂量 大剂量
50.88 50.88 28.8 28.33 28.33 17.54 17.54 5.45
5.45
5.7 3.5 -3.5
【讨论】
通过上述数据可知，（1）给药组比对照组的小鼠左右耳重量差异小，即肿胀率小：（2）给药量越大，小鼠左右耳重量差异越小，即肿胀率越小，药物消炎效果越好。
4 结论
本实验采用水煎提取法提取黄芩、连翘、金银花，方法简便可行，采用湿法制粒制备得到了复方双黄连胶囊40粒，胶囊质量符合要求，制备工艺简单，制备的胶囊具有抗炎作用，且在一定范围内，给药量越大，抗炎效果越好。
参考文献：
[1] 老师提供的讲义
[2] 2010版《中国药典》 [3] 网上查询的相关资料
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