DNA复制的引发及链延伸 DNA聚合酶Ⅰ 补齐冈崎片段缺口 RNase H 引发体（primosome） 针对后随链。引发前体+6种蛋白质（n,n’,n’’,DnaB/C/I）+引发酶。引发酶是dnaG基因的产物，是特定环境下发挥作用的RNA聚合酶。 降解RNA引物 引发酶 一种特殊的RNA聚合酶，在DNA模板上合成一段RNA链，提供引发末端（即引物，prime）。 起始点识别复合物ORC DNA聚合酶α 引物合成，以复合体(DNA聚合酶α/引发酶)的形式存在，具有引发、延伸链的双重功能。又称为pol α的引发酶。 DNA聚合酶δ DNA聚合酶δ/ε DNA连接酶 连接相邻冈崎片段 RNA酶H1 DNA聚合酶Ⅲ 链延长反应的主导聚合酶 FEN1蛋白 具5’→3’核酸外切酶活性，降解RNA片段 连接相邻冈崎片段 在靠近RNA与DNA连接处切开引物 合成后随链冈崎片段 延伸前导链 由6种蛋白质组成的启动复合物。ORC与自主复制序列（ARS）结合。 DNA连接酶Ⅰ 复制的终止 Tus蛋白 重复终止序列Ter与Tus蛋白形成复合物Ter-Tus。Ter-Tus能使DnaB不再将DNA解链，阻挡复制叉的继续前移，等到相反方向的复制叉到达后停止复制，其间仍有50~100bp未被复制，由修补方式填补空缺，然后两条链解开。 端粒酶 前导链可连续复制直到模板链的末端，释放出完整子代染色单体。 通过端粒结构和端粒酶来防止DNA复制时后随链缩短产生的染色体的部分缺失。 端粒酶具反转录酶活性，利用自身携带的RNA链作为模板，以dNTP为原料，以反转录方式催化合成模板后随链5’端DNA片段或外加重复单元，以维持端粒的一定长度，从而防止染色体的缺短损伤。 DNA拓扑异构酶Ⅳ 使复制叉解体，释放子链DNA。 二、逆转录( reverse transcription ) ——逆转录病毒HIV 以RNA为模板，合成与其互补的DNA 的过程。
逆转录酶 ( reverse transcriptase )： 依赖RNA的DNA聚合酶
? RNA 指导的DNA聚合酶 ? DNA 指导的DNA聚合酶 ? RNaseH 酶作用条件：
? 游离3 ?－OH ? 4种NTP ? tRNA引物
2、逆转录过程P128——前病毒基因组（cDNA)的形成
RNA+逆转录酶→宿主胞浆→逆转录→（RNA为模板，+RNA为引物）→cDNA→进入核→随机整合宿主染色体→形成前病毒。(phage仅注入核酸）
cDNA形成新的重复(U3-R-U5)称LTR(long terminal repeat 长末端重复顺序）。cDNA含有RNA全部信息且较RNA长。
RNA 模板
逆转录酶
DNA-RNA 杂化双链
RNA酶
单链DNA
逆转录酶 双链DNA
以mRNA为模板 ，经逆转录合成的与 mRNA 碱基序列互补的DNA链，称为cDNA
3、逆转录酶的意义
? 中心法则的补充
? 真核基因核苷酸测序 ? 治疗：重要靶酶
核酸的分子结构、性质功能
一、
特点：
? ?
4种dNTP以3’、5’磷酸二酯键相连构成一个没有分枝的绒性大分子。（与蛋白质比触觉不灵）。 两个末端分别称:
DNA的一级结构与功能\\
5’末端（游离磷酸基） 3’末端（游离羟基）。 二、DNA的二级结构 1.双螺旋的基本特征
? ?
1）主链 脱氧核糖和磷酸基相互隔连接构成DNA的主链。 2）碱基对
3）大沟和小沟双螺旋表面的沟对DNA和蛋白质的相互识别是很重要的，因为在沟内才能觉察到碱基的顺序，而在
双螺旋的表面，是脱氧核糖和磷酸重复结构，没有信息可言 三、DNA的三级结构
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DNA的三级结构指双螺旋链的扭曲。
超螺旋是DNA三级结构的一种形式，DNA在核小体中的扭曲方式也是一种超螺旋结构。超螺旋的生物学意义可能是：
1.使DNA分子体积变小，对其在细胞的包装过程有利。
2.影响双螺旋的解链过程,从而影响DNA分子与其它分子(如酶、蛋白质、核酸)之间的相互作用。
反向平行的。 二条主链处于螺旋的外侧，碱基处于螺旋的内部，由于糖和磷酸根的化学性质，主链是亲水的。
第二节 RNA的结构与功能
三种常见的RNA
1.mRNA 信使RNA 功能：蛋白质合成的直接模板 2.tRNA 转运RNA 功能：氨基酸的运载体
3.rRNA 核糖体RNA 功能：核糖体的组成成分，蛋白质的合成场所 其他小分子RNA
1.hnRNA 核内不均一RNA 成熟mRNA的前提
2.snRNA 核内小RNA 参与hnRNA的剪接与转运 3.snoRNA 核仁小RNA rRNA的加工与修饰
4.scRNA/7SL-RNA 胞质小RNA 蛋白质内置为定位合成信号识别体组成成分 5.siRNA 小的干扰RNA siRNA在RNA沉寂通道中起中心作用，是对特 定信使RNA（mRNA）进行降解的指导要素
1、hnRNA
mRNA的原始转录物是分子量极大的前体，在核内加工过程中形成分子大小不等的中间物，
即核内不均一RNA（hnRNA,heterogeneous nuclear RNA），其中至少有一部分转变并运送到细胞质而成为成熟mRNA。
2 、 mRNA 1.mRNA编码区 2.5‘端帽子结构 原核生物mRNA 多顺反子（几个功能相关蛋白质） 真核生物mRNA 单顺反子*（1种蛋白质） 无帽子结构，（有SD序列，RBS位于有帽子结构（0.1.2三种类型）* AUG上游8～13核苷酸处，与翻译起始使mRNA免遭外切核酸酶降解，与翻译起始有有关）。 关. 有，20～200核苷酸 有 3.3‘端poly(A)尾 4.5’.3’端mRNA非偏码区
无 有 3.tRNA ? tRNA是一种结合体分子，氨基酸必须结合到tRNA分子上生成aa-tRNA，才能被带到mRNA－核
糖体复合体上，通过其tRNA上的反密码子与mRNA的密码子mRNA的密码子，被插入到合成中的多肽链的适当位置。
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tRNA均有三叶草型的二级结构和L状的三级结构 一端CCA是结合氨基酸部位，另一端为反密码子环
tRNA通晓mRNA的核苷酸语言和蛋白质的氨基酸语言,是蛋白质翻译的译员
三、rRNA
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核糖体是由几十种蛋白质和几种核糖体RNA（ribosomal RNA）组成。 原核细胞中的rRNA：5srRNA、16srRNA、235srRNA； 真核细胞中的rRNA：18srRNA、5srRNA、5.8srRNA、28srRNA
五、端粒酶RNA、Ribozyme
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端粒（telomere）或端区，是真核细胞线性染色体的末端的一种蛋白质－DNA结构，其功能是完成染色体末端的复制，可防止染色体融合、重组或降解。具有高度保守性。 ?
端粒酶（telomerase）是一种自身携带模板RNA的逆转录酶，催化端粒DNA的合成，能够在缺少DNA模板的情况下延伸端粒内3’端的寡聚核苷酸片段，包含两个活性位点，即逆转录酶活性和核酸内切酶活性。 ?
核酶（ribozyme）即具有催化作用的一类RNA分子。
转录
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不对称转录1.DNA双链上，一股链可转录，另一股不转录。 2.有意义链与反意义链并非固定不变。3.转录方向都是5→3
RNA聚合酶以DNA 为模板，催化 2个游离的 NTP 形成3‘5’--磷酸二酯键
四种核苷三磷酸
模板以双链状态下活性最大 聚合酶无校对功能 无需引物，方向5’-3’ 需要模板
原核生物转录：