37、试分析论述动物细胞体外培养的特点有哪些?体外培养需要哪些条件?动物细胞大规模培养的方法有哪些?各自主要是为了解决什么问题? (1) 培养特点:
① 动物细胞大,无细胞壁,对机械搅拌或剪切力敏感; ② 动物细胞生长缓慢,易受污染; ③ 正常细胞培养的世代数有限;
④ 动物细胞间主要以聚集体形式存在,大多需要贴附在载体表面才能生长。
(2) 动物细胞体外培养需要的条件:
① 培养基,应包括细胞各种代谢所需的各种成分;
② 需平衡盐溶液、培养基pH调整液、细胞消化液和抗生素液等; ③ 生长条件,包括温度、pH、渗透压、气体等;
④ 培养工具,如GO2培养箱、相差显微镜、培养皿、培养瓶等。 (3) 动物细胞大规模培养的方法及其为了解决的问题是:
① 转瓶(管)培养系统:为了解决从小量培养到大规模培养的过度问题; ② 微载体培养,为摆脱传统的培养瓶(管)培养限制:实现三维立体贴
附培养;
③ 中空纤维生物反应器培养,为改善传统培养方法的气体、营养物质及
水分等物质的通透性;
④ 大规模培养方式:该法是为使细胞持续生长到较高的密度,目标产品
达到较高水平。