书P83例7（内标法）：本品每1g含樟脑164mg，P86例8（外标法），P86例9本品每1g含黄芪甲苷为0.2mg，供试品制备取样量为1g.（对数方程外标两点法）可参考P231-233，6个验证内容。
小儿热速清口服液中黄芩苷的含量测定(外标一点法)： （1）对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品约10mg，精密称定，置200ml量瓶中，加50%甲醇适量，置热水浴中振摇使溶解，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。（实际浓度为0.0504mg/ml)
（2）供试品溶液的制备：精密量取本品0.5ml，置D101大孔吸附树脂柱（内径约1.5cm，柱高10cm）上，用70ml水，以流量1.5ml/min洗涤，继续用40%乙醇洗脱，弃去7~9ml，收集续洗脱液，置50ml量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得。
（3）标准曲线的绘制：精密吸取浓度为0.0504mg/ml的黄芩苷对照品溶液1.0ml，2.0ml，5.0ml，8.0ml，10.0ml，分别置10ml的量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述对照液10ul注入液相色谱仪，记录峰面积。以进样量X（ug/ml）对峰面积Y进行回归处理，得回归方程Y=25.540x-0.1061（r=1.0000），结果见表1，表明黄芩苷进样量5.04~50.4ug/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系，如图。
表1 黄芩苷对照品的线性关系考察
进样量(ug/ml) 峰面积 回归方程 相关系数 5.04 128.7 10.08 257.5
25.20 643.1 Y=25.540x-0.1061 r=1.0000 40.32 1029.6 50.40 1287.3
（4）专属性试验：在与样品测定完全相同的条件下，分别精密吸取对照品溶液，供试品溶液及阴性对照液各10ul，进样分析，观察色谱图。如图2，阴性无干扰，说明该实验方法的专属性较强。
（5）
A为对照品溶液 B为阴性对照液 C为供试品溶液
（6）精密度试验：精密吸取其浓度为25.20ug/ml的黄芩苷对照品溶液10ul。重复进样6次，测得黄芩苷的峰面积积分值，详见表2。
表2 精密度试验结果
峰面积 均值 RSD 643.1 643.5
642.9 643.1 0.11% 641.7 643.5 644.2
从上表可知进样6次黄芩苷峰面积的均值为643.1，RSD为0.11%（n=6），说明仪器的精密度良好。
(6)重复性试验：取同一批号的样品，分别按照（2）项下方法平行制备6份供试品，按样品含量测定方法测定，各精密吸取10ul进样，测得结果如表3所示。
表3 重复性试验结果
序号 样品中含量（mg/ml) 平均含量（mg/ml) RSD 1 0.3047 2 0.3124
3 0.3015 0.3059 1.4% 4 0.2997 5 0.3097 6 0.3074
结果表明黄芩苷的平均含量为0.3059mg/ml，RSD为1.4%（n=6），表明方法重现性好。
(7)稳定性试验：取同一份供试品溶液，分别在制备后的0、2、4、6、8h进样10ul，测得各次峰面积。结果如表4所示
表4 稳定性实验结果
时间（h） 峰面积 平均值 RSD
0 257.5 2 257.3
4 257.0 257.5 0.15% 6 258.1 8 257.8
结果RSD为0.15%，表明供试品溶液在8h内稳定。
（8）加样回收率试验：精密量取该样品溶液0.25ml，置50ml容量瓶中，共6份，分别精密加入黄芩苷对照品溶液（浓度为0.0504mg/ml）1.5ml，按（2）项下供试品溶液的方法制备，在上述的色谱条件下进样10ul，测得峰面积，计算黄芩苷的回收率及RSD。结果如表5所示。
表5 黄芩苷加样回收率实验结果
取样量 样品中含量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 RSD (ml） （ug) （ug） （ug) (%) (%) (%) 0.25 75.12 149.76 98.7 0.25 75.53 148.83 99.5
0.25 74.97 75.6 147.93 96.5 97.8 1.20 0.25 75.76 147.87 95.4 0.25 76.12 150.23 98.0 0.25 75.07 147.83 96.2
黄芩苷的6个加样回收率均在95%~105%范围内，平均回收率为97.8%，RSD为1.20%，表明方法的回收率良好，准确度较高，方法可行。
本品每1g含黄芪甲苷为0.2mg，供试品制备取样量为1g（外标二点法） 对照品：精密称取黄芪甲苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含黄芪甲苷0.515 mg
的溶液,作为对照品溶液。 供试品：取样品1g,精密称定，置于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理补
重即得。 (1)线性与范围——线性关系考察
精密吸取对照液1.0，2.0, 3.0， 4.0，5.0 mL，置100mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各精密吸取10μL进样，测定峰面积积分值。以峰面积积分
值的对数为纵坐标（.Y)，以黄芪甲苷进样量的常用对数为横坐标（X），绘制标准曲线，计算得回归方程：Y=0.986 0X+ 5.5520,r= 1 ;黄芪甲苷在5.150~25.75μg范围内进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系。
进样量进样量对数 峰面积对数 回归方程 相关系数 （ug/ml） 5.15 0.71 5.83 10.30 1.12 6.24 Y=0.986x+5.1320 r=1.0000 15.45 1.19 6.31 20.60 1.31 6.42 25.75 1.41 6.52 6.66.56.46.36.26.165.95.85.700.20.40.60.8浓度对数11.21.41.6y = 0.986x + 5.1322R = 1峰面积对数
(2)专属性——专属性试验
在相同条件下，分别精密吸取对照品溶液，供试品溶液及阴性对照液各10ul，进样分析，色谱图如下，（（A对照品 B阴性 C样品））阴性无干扰，说明该实验方法的专属性较强。
（3）精密度
精密量取对照品溶液10uL，连续进样6次，测得峰面积积分值如下表
序号 峰面积 峰面积的平均对数 RSD/% 1 230.8 2 230.6 3 231.3 2.36 0.23 4 230.3 5 229.6 6 230.2
由上表可知，RSD为0.23%，表明仪器的精密度良好。
（4）重复性试验
取同一批样品6份，平行制备供试品溶液， 按样品含量测定方法测定，各精密吸取10ul进样，结果如下表 编号 含量（mg/g） 平均含量/（mg/g） RSD/% 1 0.0854 2 0.0850 3 0.0831 0.0853 1.30 4 0.0864 5 0.0858 6 0.0849
上表可知，平均含量为0.0853mg/片，RSD为1.30%，表明方法重现性好。 (5）稳定性试验
取同一份供试品溶液，分别在制备后的0、2、4、6、8h进样10ul，测得各次峰面积，结果如下所示
间隔时间/h 峰面积 峰面积的平均对数 RSD/% 0 219.8 2 216.5 4 220.6 2.34 1.01 6 223.2 8 218.5 结果RSD为1.01%，表明供试品溶液在8h内稳定。
(6)准确度——加样回收率试验
取6份供试品各0.5g，按100%比例加入待测成分纯品