综合设计实验1矿质元素对植物的作用(红色的问题见后附照片)
1、本次实验名称？分为哪两部分？ 诱导产生NR，增强其活性 2、NR有何特性？何谓诱导酶？
NR为诱导酶，不供应硝酸根之前，不会产生。诱导酶
3、针对上述特性实验中采取何措施？“真空渗入法”在步骤中何处体现？ 措施：提前一天用硝酸盐叶面喷施，增强活性
体现：反应时，将三角瓶放在真空干燥器中，用真空泵抽气放气，直至叶片沉入瓶底
4、实验中NO3-所起作用？ 诱导产生NR，增强其活性 5、何谓磺胺比色法？
亚硝态氮在酸性溶液中与对氨基苯磺酸形成重氮盐，再与a-萘胺定量生成红色偶氮化合物，在520nm有最大吸收峰.
6、NR活力以什么表示？步骤中何处有关键作用？
用产生的亚硝态氮的量表示。关键作用就是21页的注意事项。 7、标准曲线操作顺序如何？两人如何配合？
制备标准溶液、制备显色液、绘制标准曲线。要默契地配和，一人在做实验的同时，另一人要负责记录。
8、为何标准溶液用NaNO2溶液不用NaNO3？标准溶液浓度是多少？ 因为硝酸还原酶活性可由产生亚硝态氮的量表示，而不是用NO3-表示，所以用NaNO2表示。标准溶液浓度是1微克每毫升。
9、标准溶液和谁在什么条件下显色多久？比色波长是多少？
在硝酸还原酶活性的测定实验中，三角瓶30度下置于黑暗处（恒温箱、水浴锅等）保温30min，在520nm波长下比色；硝态氮含量测定实验中，常温下放置20min，再加入8%NaoH溶液9.5ml，摇匀冷却至室温，在410nm波长下比色 10、如何获得标准曲线或回归方程？
通过使用标准溶液得到的实验数据，确立好横竖坐标运用电脑软件制作。 11、取样应注意什么？
第一、仪器不能混用，严格按照组别及标签按要求使用；第二、材料（叶片）
要用湿纱布擦拭干净，用蒸馏水冲洗，滤纸（或干纱布）吸干。 12、植物材料如何净化？
采回来的材料（叶片）要用湿纱布擦拭干净，用蒸馏水冲洗，滤纸（或干纱布）吸干。
13、叶圆片如何获得，需要多少个叶圆片？
14、如何确保叶片等重？为何要等重？每份重量是多少？ 15、两个三角瓶中为何一个加入H2O，另一个加KNO3？ 16、三角瓶中为何放入PH7.5缓冲液？ 17、为何要用真空泵抽气？使用中应注意什么？
真空泵抽气影响NO2-的浸出量。 防止液态水进入泵腔 18、
抽气时有何现象发生？抽气到何时（何种程度）为止？
（1）因为反复抽气放气，溶液可渗入叶组织取代叶片空气，叶片便沉于溶液底部，酶促反应可以相对完全的进行。 （2）抽气到叶片沉淀 19、
抽气后三角瓶置于何处？什么条件？多长时间？
显色反应在黑暗处（恒温箱、水浴锅等）进行 30分钟
20、 三角瓶取出后显色反应在何容器中进行？为何先加磺胺，后加苯胺？ 21、 上述溶液显色反应时间多长？波长？空白？ 30min，520nm，空白组一样
22、 若三角瓶取出后显色反应不立刻进行，对实验结果有无影响？更高还是更
低？
有影响，更高还是更低我也不知道，我个人觉得更低
23、 请演算(板书)NR活性计算公式
硝酸还原酶活性(μg·g-1·h-1) ﹦（N02-含量-N02-含量）×10/W×t
24、 NR活性计算公式中t为多少？公式中×10是何用意？
0.5h；因取反应液的十分之一做后面实验，恩大概就这意思吧
25、 如何获得②NO2-、①NO2-含量？
26、 NO3-测定中，与其反应的物质为什么？试剂中酸的作用？ 27、 该反应产物有无颜色？如何才能显色？应加入何物？ 28、 该曲线操作为何与前述不同？区别在哪？比色波长为多少？
29、 实验材料如何处理？称重多少？
处理：将材料用湿纱布擦拭干净，用蒸馏水冲洗，滤纸吸干。称取：酶活性测定称取0.3-0.5,硝态氮含量测定准确称取2g
30、 用何试剂在何处多少摄氏度下提取？管口如何处理？ 酶活性测定：0.1mol/L,ph7.5磷酸缓冲液在30度水浴
硝态氮含量测定：无机离子在沸水浴中处理，管口用玻璃泡封口
31、 提取结束为何要冷却？定容至多少？如何确保不损失？
因为要在室温下进行实验，定容至25ml容量瓶，反复冲洗几次确保不损失3
32、 取样品液多少？与何试剂(多少)反应？
取样品液0.1ml,与5%水杨酸—硫酸溶液0.4ml反应，再与9.5ml8%氢氧化钠反应
33、 多长时间后加入多少8%NaOH溶液？ 取样加入水杨酸_硫酸后，静止20分钟加入
34、 该测定空白为什么？波长为多少？ 进行对比，410波长
35、 请演算NO3--N含量计算公式。 氮含量=C*V/W
36、 上述计算公式其中C，V，W分别代表什么？ 硝态氮含量(mg·g-1FW) = (C×V)/W C为标准方程计算得NO3-－N浓度(ug·ml) V为提取样品液总量(ml)； W为样品鲜重(g) 。
37、 以上公式中C如何获得？
C为标准方程计算得NO3-－N浓度(ug·ml)
综合设计实验2 植物利用光能的生理基础
1、叶绿素在红光区和蓝光区都有吸收峰，能否用蓝光区的吸收峰波长进行叶绿素的定量分析？为什么？
不能，因为叶绿素a和叶绿素b在百分之96乙醇中最大洗手峰的波长不同，用分光光度计测定各种叶绿体色素的含量时，对分光光度计的波长精确度要求较高，如果波长与原吸收峰波长相差1nm，则叶绿素a的测定误差为百分之二，叶绿素b为百分之十九，因此，在使用前必须严格种植不同叶绿素的最大吸收峰波长。。。
2、选择80﹪丙酮提取叶绿体色素时，叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的吸收峰值分别是多少纳米？
663nm,645nm,470nm
3、选择96﹪乙醇提取叶绿体色素时，叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的吸收峰值分别是多少纳米？ 665nm,649nm,470nm
4、选择不同试剂提取叶绿体色素时，叶绿体色素计算公式有无不同？请板书用96﹪乙醇提取时的三个公式。 答案在26页实验结果处
5、提取干材料中叶绿体色素一定要用96％乙醇（80﹪丙酮），而新鲜材料可以用无水乙醇（无水丙酮）提取，为什么？ 混合液浸提法提取叶绿体色素
6、叶绿体色素提取有那几种方法，实验教学中宜选用其中哪一种？为什么？
水浴提取法提取叶绿体色素。应选用水浴提取法提取叶绿体色素，因为研磨法研磨过程中丙酮的挥发，研磨后转移匀浆时容易出现误差，而混合液浸提法需要时间充足或样品太多
7、叶绿体色素提取及测定为什么要在弱光下进行？该提取液含有哪几种色素？
01
短。 叶绿素和类胡萝卜素
8、叶绿体色素定量分析应称取多少植物样品，由什么因素决定？ 0.2~0.5g 由叶绿体色素提取方法决定，研磨法提取叶绿体色素样品为
0.2--0.5g，混合液浸提法提取叶绿体色素样品为0.1--0.2g，水浴提取法提取叶绿体色素样品为0.2--0.5g
9、植物样品放入试管后需加入96％乙醇多少毫升，在何温度下水浴多长时间？
15ml 然后放入70~80摄氏度的水浴锅中浸提，直至叶片成黄白色
10、定容前植物样品应达到何种程度？定容至多少毫升？ 研磨至组织变白。定容至25毫升
11、提取时加入96％乙醇的量能否改变？提取时间及浸提次数作何调整？
12、叶绿体色素定量分析为何不需制作标准曲线，比色时空白对照为何物？ 答：1...？
2、如果提取液为80%丙酮，采用80%丙酮为空白。如果用96%的乙醇提取，则用96% 的乙醇为空白
13、用于叶绿体色素分离与定量分析所用的提取液相比较，谁的浓度更高？
叶绿体色素分离所用的提取液浓度更高 （叶绿色素提取液须用丙酮溶液适当稀释后才可作理化性质观察）
14、本实验中短时间内如何制备分离所需色素溶液？
用2~3g新鲜叶片，以80%丙酮（或95%乙醇）研磨提取过滤于三角瓶中备用
15、如何将叶绿体色素溶液涂抹至长滤纸条，用何工具？涂在哪一侧？ 用毛细管吸取浓的叶绿体色素提取液涂抹在滤纸条一侧长边
16、分离过程中涂抹叶绿体色素的次数为多少次？每次均要确保什么？ 20~30次，要确保涂抹均匀且要风干后涂，色素要多涂抹几次，风干会再涂抹第二次，细、匀、直、滚。涂抹的色素要适量，量多易发生拖尾，量少色素带看不清。
17、长滤纸条风干后如何与圆形滤纸结合？应注意什么？
长滤纸条风干后卷成纸捻插入圆形滤纸的小孔中，使之与圆形滤纸齐平。应注意纸捻不能突出，圆形滤纸在中心打的小圆孔，其周围必须整齐，否则分离的