色素不是一个同心圆
18、上述物件应放入何处,其中盛有何种液体,它由哪几种有机物按照何种比例配制?
插有纸捻的圆形滤纸平放在康维皿上,其中盛有推动剂,按石油醚:丙酮:苯=10:2:1比例配制
19、随着时间推移,圆形滤纸上会出现什么变化?何时应将圆形滤纸取出自 然风干?
会出现被分离的各种色素同心圆环;当推动剂扩散至康维皿边沿时 20、何谓分配系数,上述分离过程中流动相、固定相分别指什么? 分配系数:在平衡状态下组分在固定相与流动相中的浓度之比;固定相:与长滤纸条结合的96%乙醇;流动相:各叶绿体色素
21、请板书chla与KOH反应方程式。 叶绿素a+KOH =甲醇+皂化叶绿素
22、请叙述上述皂化反应过程,简单介绍操作过程。
反应过程P23倒数第二段前两句(叶绿素是一种双羧酸(叶绿酸)与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯。在碱的作用下,发生皂化反应,生成醇(甲醇与叶绿醇)和叶绿素的盐(皂化叶绿素))操作过程p27 5.皂化反应
23、上述反应发生后为何要先加入3毫升苯再加入1毫升水?它们各自起何作用?
苯是有机溶剂,溶解类胡萝卜素和叶黄素,水溶解反应生成的盐(皂化叶绿素)
24、反应结束后上、下两层分别为何溶液,各自含有哪些物质? 上层是笨溶液,溶有黄色的胡萝卜素和叶黄素;下层是稀的乙醇溶液,溶有皂化叶绿素a和皂化叶绿素b
25、何谓叶绿素荧光现象?如何观察叶绿素荧光现象?叶绿素荧光现象产生的原因是什么?
叶绿素吸收光量子转变成激发态的叶绿素分子,很不稳定,当其回到基态时可发出荧光的现象。
将浓的叶绿体色素提取液放在试管内,在直射光下观察色素溶液在透射光下及反
射光下的颜色。
原因:(1)对着光源观察叶绿素提取液时,看到的是叶绿素的吸收光谱。由于叶绿素提取液吸收的绿光部分最少,故用肉眼观察到的为绿色透射光。(2)背光源观察叶绿素提取液时,看到的是叶绿素分子受激发后所产生的发射光谱。当叶绿素分子吸收光子后,就由最稳定的、能量最低的基态提高到一个不稳定的、高能量的激发态。由于激发态不稳定,因此发射光波(此光波即为荧光),消失能量,迅速由激发态回到基态。
26、为什么叶绿体色素提取液能观察到荧光现象而植株上的叶片看不到荧光?
荧光现象:是指叶绿素在透射光下为绿色,而在反射光下为红色的现象,这红光就是叶绿素受光激发后发射的荧光。叶绿素溶液的荧光可达吸收光的10%左右。而鲜叶的荧光程度较低,指占其吸收光的0.1~1%左右。
27、为什么叶绿素容易发生取代反应?
在弱酸作用下,叶绿素分子中的镁被氢离子取代生成褐色的去镁叶绿素,后者遇乙酸铜则形成蓝绿色的铜代叶绿素。
28、取代反应中加入30﹪醋酸后,由何种离子取代叶绿素中何物? 加入醋酸后,氢离子取代镁离子,形成去镁叶绿素。
29、取代反应中进一步加入醋酸铜粉末后,是何种离子取代之前那种离子?
去镁叶绿素易与铜离子结合,形成铜代叶绿素
30、反应中加入醋酸铜粉末后需作何处理,加入醋酸铜粉末的量需不需要控制?
微热,木习习坑曰:你说需要不需要呢~它既然问了,必须控制啊,多了多浪费
综合设计实验3矿质元素对植物的作用
1、脯氨酸在何条件下与何种物质生成稳定的红色缩合物?
脯氨酸在酸性条件下与印三酮反应生成稳定的红色缩合物。。。。。 2、上述红色缩合物为何要用甲苯萃取?比色波长是多少nm?
因为在测定液中含有某些也能与印三酮发生反应的成分,这些成分的反应产物也同样可以吸收520nm光,如果不用甲苯萃取,会导致OD值偏高,用甲苯萃取,这些成分的反应产物不溶于甲苯,所以可以降低实验误差。并且甲苯对生成稳定的红色缩合物可以充分溶解
3、脯氨酸标准溶液浓度为多少?用前稀释多少倍,浓度为多少? 100ug每毫升,用前稀释10倍,为10ug每毫升。。。
4、标准曲线制作中各管加入冰乙酸、酸性茚三酮分别为多少ml? 分别为2ml和3ml
5、上述显色液应在多少℃水浴多长时间?如何处理后用甲苯萃取? 100摄氏度40min,冷却
6、脯氨酸提取叶片重量如何确定?处理与对照需等重么? 天平称取,不需要
7、用何种试剂提取植物材料中脯氨酸?多少℃水浴多长时间? 3%的磺酸水杨酸溶液,100摄氏度10min 8、脯氨酸提取液有无颜色?如何令其显色? 无,加茚三酮
9、该显色剂如何配制,如何保证其充分显色?
称取1.25g 茚三酮溶于30mL 冰乙酸和20mL 6M 磷酸溶液中, 搅拌加热(低于70℃)溶解,冷却后置棕色瓶中 沸水浴加热40min 10、脯氨酸含量计算公式V和A分别为多少ml? V为5ml A为2ml
11、可溶性糖在何条件下生成糠醛或羟甲基糠醛化合物? 沸水浴
12、上述产物与何种物质作用形成蓝绿色络合物(糠醛衍生物)?在何波长比色?
蒽酮试剂 625nm
13、葡萄糖标准液为何浓度?标准曲线制作过程稀释至何系列浓度? 200微克每毫升;0~100微克每毫升
14、上述稀释后系列浓度葡萄糖标准液各取多少ml,与多少ml、何种物质反应显色?
一毫升;加5ml蒽酮试剂
15、显色过程需要在多少℃水浴多长时间? 沸水;10min
16、为什么要将显色时间控制在一定范围以内?
由于蒽酮与可溶性糖反应的呈色强度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间内比色
17、可溶性糖提取液定容后为何要过滤?否则对反应有何不良影响?
以防有残渣 不能准确测出可溶性糖的含量 因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应。增加了测定误差。
18、过滤后提取液1ml与5ml蒽酮试剂反应过程应注意哪些问题?
由于蒽酮与可溶性糖反应的呈色强度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间内比色。烧杯保持干燥,充分搅拌缓慢加入5ml浓硫酸 浓硫酸遇水会产生大量的热
19、蒽酮试剂如何配制、如何保存?
100mg经过纯化的蒽酮溶于100ml硫酸溶液(76ml相对密度1.84的浓硫酸加24ml水) 贮藏在棕色瓶中 20、可溶性糖含量计算结果为何单位? ug每ml
21、应用蒽酮法测得的可溶性糖包括哪些?
戊糖与已糖,所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等 22、何谓电导率?为何逆境胁迫能使溶液电导率值增大?
电导率是以数字表示的溶液传导电流的能力。植物组织受到逆境伤害时,由于膜的功能受损或结构破坏透性增大,细胞内各种水溶性物质不同程度的外渗,将植物组织浸入无离子水中,水的电导率将因电解质的外渗而加大,伤害愈重,外渗愈多,电导率的增加也愈大(P55实验基本原理) 23、电导率测定对水和容器有何要求?应该如何保证?
要求水清澈、流速尽量小。注意不要测悬浊液或胶体液,以免损坏电极针;盛被测溶液的容器必须清洁,无离子玷污;测定电导率时要防止高CO2气源和口中
呼出的CO2进入三角瓶
24、叶圆片如何获得,需要多少个叶圆片?取样过程应避开何处? 用6~8CM的打孔器避开主脉打取叶圆片,每组打取60片 25、取样是否要注意植物材料的对称性?是否需要称重? 是,不需要
26、取多少叶圆片放入何种容器中?同时加入多少ml水?
每组取60片,分装在3支洁净的刻度试管中;每管放20片;10ml的去离子水。 27、将上述容器放入何处抽气多长时间?或至何种程度?
将试管放入真空干燥箱中用真空泵抽气10分钟;当缓缓放入空气时,水即渗入细胞间隙,叶片变成半透明状,沉入水下。
28、将上述容器取出后静置多长时间?其间还需如何处理它? 将以上试管置20℃下保持1h,其间要多次摇动试管。 29、静置一段时间后测得的电导率值如何称呼? 初电导率值 30,20度,1h 31,20h 终电导率值 30、接下去多少℃水浴多长时间? 沸水浴,10分钟
31、取出冷却至室温后需要平衡多长时间之后再次测定电导率值?如何称呼? 是20分钟
32、为何要先后测定初、终电导率值?它们各自代表什么? 为了计算相对电导率,判断细胞膜的受伤害程度。 33、本次实验使用蒸馏水,相对电导率计算公式该作何调整? 相对电导率=(K1-k0)/(k2-k0) 34、电导率测定过程该注意哪些问题? 量程选择
35、伤害度如何计算?请板书计算公式。
伤害度=(Lt-Lck)*100%/(1-Lck)