DNA重组技术 分子生物学 - 图文(4)

2019-03-09 13:11

五.与基因工程相关的概念

(一)克隆(clone,cloning)1.原意是指单细胞纯系无性繁殖。

2.现代概念是将实验得到的人们所需的微量基因结构,引入适

当的宿主细胞中去。在合适的生理环境中进行无性繁殖,从而利用宿主的生理机制繁衍人们所需要的基因结构,并进行表达。由

于整个操作在分子水平上进行,所以称为分子克隆(molecularcloning)。

五.与基因工程相关的概念

(一)克隆(clone,cloning)3.这个术语的几种含义:

(1)作为名词

①带有相同插入顺序的重组DNA分子的1个群体。②基因型(genetype)相同的细胞或生物体的一个群体。

③最常用的是描述一个微生物的一个菌落,这些微生物带有插入了特定DNA片断的载体分子。

(2)作为动词,是“去克隆”,即利用体外DNA重组技术将一个特

定的基因或DNA顺序插入一个载体分子。

(二)重组DNA技术(DNArecombinationtechnique)

重组DNA技术是用酶学的方法将不同来源的DNA在体外切割,连接组成一个杂合的DNA分子的技术。基因工程包括DNA

重组技术。

(三)生物工程(Biologicengineering)

生物工程是更大范围内生产及产品的工程技术,是现代生物

学中一切工程技术的总称,包括:

1.遗传工程:基因工程,物理化学诱变;细胞融合;花粉培育;有性杂交等。2.发酵工程3.酶学工程4.细胞工程

基因工程①DNA重组;②DNA体外诱变;③体外基因操作;④基因化学合成

第二节基因工程的酶学基础

Enzymes第二节基因工程的酶学基础

常用的工具酶(tool enzymes):

1.限制性核酸内切酶(resriction enzymes,restriction endonadease)2.DNA连接酶(DNA ligase,ligase)3.逆转录酶(reverse transcriptase)

4.DNA聚合酶(DNA polymerase,DNA pol)5.核酸酶(nuclease)

6.末端转移酶(terminal transferase)

7.碱性磷酸酶(BAP或CIP)

以1和2最为常用,最为重要。工具酶现已商品化。


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