某染色体(臂)长度 ×100% 或=
染色体体组总长
(4)臂比(取小数点后两位数)
长臂的长度
=
短臂的长度
(五)染色体形态测量数据表 染色 体序 号
放大相片长度(mm) 绝对长度(μm) 长臂
短臂
全长
长臂
短臂
全长
相对 长度
臂比
染色体类型
备注
(六)剪贴和配对
将放大照片上的各条染色体剪下,根据目测和染色体的相对长度、臂比、着丝粒位臵、次缢痕的有无和位臵、随体的有无和形态大小等特征,进行同源染色体配对。 (七)排列和粘贴
将配对好的染色体按照由大到小的顺序依次排列起来。排列时把各对染色体的着丝粒排在一条直线上,并且使短臂在上,长臂在下。等长的染色体,把短臂较长的染色体排在前面。随体染色体排在最后,性染色体和额外染色体单独排列。
已排好的同源染色体按染色体编号先后顺序粘贴在绘图纸上,粘贴时着丝粒要处在同一直线上。 (八)分类
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根据着丝点的位臵,确定染色体的形态类型,臂比是反映着丝点在染色体上的位臵。
臂比 1.0 1.0~1.7 1.7~3.0 3.0~7.0 7.0以上
染色体类型 正中着丝粒染色体 中着丝粒染色体 近中着丝粒染色体 近端着丝粒染色体 端着丝粒染色体
符号 M m sm st t
具随体染色体(sat)用*标出。 (九)翻拍和绘图
将剪贴排列的染色体组型图进行翻拍,并用座标纸绘制成染色体模式图。 七、实验作业
1. 提交植物染色体组型剪贴图 2. 植物染色体组型的模式图 3. 染色体形态测量数据
4. 简述本实验的染色体组型结果,核型公式。
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实验二 小鼠减数分裂标本的制备与观察
一、目的
1.学习和掌握细胞减数分裂染色体标本的制片技术和方法。
2.通过观察进一步熟悉减数分裂的全过程及各个时期染色体的动态变化和形态特征。 二、原理
减数分裂是发生在配子形成过程中一种特殊形式的有丝分裂,分裂过程中染色体结构也呈周期性变化,并在特定时期呈现稳定的形态特征,因而也是进行染色体形态、结构与数目鉴定的有利时期。减数分裂包含两次连续的有丝分裂——减数第一分裂和减数第二分裂;每次分裂都可分为紧密衔接的前、中、后、末四个时期,以前期Ⅰ变化最为复杂,又可分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。通过减数分裂所形成的四分体细胞(或雌、雄配子),其染色体数目只有体细胞的一半。减数分裂过程中染色体出现同源配对、非姊妹染色单体间片段交换、同源染色体相互分离等一系列独特行为,为远缘杂种的分析及三大遗传定律的论证等遗传研究提供了直接或间接的证据。
减数分裂细胞染色体制片取材以高等动、植物雄性生殖分裂较为方便。在适当的时机采集动物精巢或植物花蕾(花序),经适当技术处理,压片就可在显微镜下观察到细胞的减数分裂过程。
本实验以小白鼠精巢为材料进行减数分裂的制片观察。 三、实验内容
1. 实验材料
性成熟的雄性小白鼠(Mus musculus,2n=2x=40)。 2. 器具和试剂
显微镜,计时器;染缸,染色板,酒精灯,白绸,镜头纸,培养皿,材料瓶,载玻片,盖玻片,镊子,解剖刀,解剖针,镊子,刀片,木夹,吸水纸,标签,铅笔等常用工具。
卡诺氏Ⅰ,甲醇冰乙酸(甲醇∶冰乙酸=3∶1)固定液,FAA固定液;甘油蛋白,1mol/L HCI, 45%乙酸;0.5%醋酸洋红或醋酸地衣红,改良苯酚品红,醋酸-铁矾-
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苏木精,丙酸-水合氯醛-铁矾-苏木精,丙酸-水合氯醛-铁矾-洋红等染液;无水乙醇,95%乙醇,80%乙醇,70%乙醇;石蜡。
3. 实验步骤
(1)秋水仙素处理 取睾丸前3~4h给小鼠经腹腔注射秋水仙素(100ug/ml)0.2~0.4ml。
(2)取精巢固定 用脊髓损伤法处死小鼠,放在解剖板上固定四肢,剖开腹腔取出睾丸,用2%的柠檬酸钠溶液洗净,投入甲醇冰醋酸液固定12h(或取精细管固定30~60min),若暂时不用,可用95%乙醇清洗2次, 70%乙醇于4℃冰箱中保存(在70%乙醇与等量甘油的混合液中可长期保存)备用。
(3)酸解 用剪刀剪开睾丸最外层的被膜和白膜,用尖头镊子从睾丸中挑出细线状的精细管,洗净,放入一白瓷板窝内,用1mol/L HCl酸解3~5min。
(4)染色 将改良苯酚品红(或其它染液)滴加在一染色板窝内,把酸解好的材料放入其中,染色20~30min;
(5)压片 挑取2~3条已染色的精细管放于载玻片上,滴一滴染液,盖上盖片,在盖片上覆一张吸水纸,吸去多余的染液,换一张干净的吸水纸,一手固定盖片和载片,另一手用铅笔的橡皮头垂直敲打,使细胞分散、压平。
(6)镜检 观察减一分裂各期的时相,可见20对同源染色体相互配对的现象,其中有19对染色体呈环状连接,只有XY染色体表现出特殊的一个末端和两个末端相接,而且Y染色体又出现一定程度的深染现象。
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实验五 人类ABO血型鉴定与人类常见遗传性状调查
一、实验目的
1. 学习ABO血型的鉴定方法。
2. 了解推测(计算)群体中等位基因频率方法。 二、实验原理 (一)ABO血型检测
A型:红细胞上具有A抗原,能与特异性抗体A发生凝集反应,而不与B抗体发生凝集反应。
B型:红细胞上具有B抗原,与特异性抗体B发生凝集反应,而不与A抗体发生凝集反应。
AB型:红细胞上具有A抗原和B抗原,既与抗体A发生凝集反应,也与抗体B发生凝集反应。
O型:红细胞上缺乏A抗原,也缺乏B抗原,均不与抗体A或抗体B发生凝集反应。
(二) 人类常见遗传性状的调查分析
在自然界,无论动植物一种性别的任何一个个体有同样的机会与其相反性别的任何一个个体交配。假设某一位点有一对等位基因A和a,A基因在群体出现的频率为p,a基因在群体出现的频率为q;基因型AA在群体出现的频率为D,基因型Aa在群体出现的频率为H,基因型aa在群体出现的频率为R。群体(D,H,R)交配是完全随机的,那么这一群体基因频率和基因型频率的关系是:
D=p2 H=2pq R=q2
这说明任何一物种的所有个体,只要能随机交配,基因频率很难发生变化,物种能保持相对稳定性。
人类是随机交配的群体,其性状的表现反映出群体的遗传组成,从群体性状的遗传分析,可以了解不同种族(民族)的基因频率和基因型频率。根椐遗传平衡定律,可以对人类群体进行基因频率的分析。
表5-1 人类常见遗传性状—单对基因控制 性状 耳垂 卷舌状
显性 与脸颊分离 能 10
隐性 紧贴脸颊 不能