新编动物学实验
编著者：刘良国，姜吉刚，曾伯平，杨品红，张健华王文彬 主编
湖南文理学院生命科学学院
二○○九年三月
目 录
实验1. 动物细胞、组织及胚胎发育观察 实验2. 眼虫、变形虫和草履虫等的观察 实验3. 水螅和涡虫的比较观察
实验4. 华枝睾吸虫和猪带绦虫的比较观察 实验5. 蛔虫和蚯蚓的比较解剖
实验6. 河蚌的形态解剖及软体动物分类 实验7. 轮虫、枝角类和桡足类的采集与分类 实验8. 螯虾和棉蝗的比较解剖 实验9. 昆虫纲的分类
实验10. 海盘车和文昌鱼的观察 实验11. 鲫鱼的外形与内部解剖 实验12. 青蛙的外形与内部解剖 实验13. 中华鳖的外形与内部解剖 实验14. 鱼纲、两栖纲和爬行纲分类 实验15. 家鸡的外形与内部解剖 实验16. 家兔的外形与内部解剖 实验17. 鸟纲和哺乳纲的分类 实验18. 脊椎动物骨骼系统的比较 实验19. 动物生物学大实验
19.1 鱼类寄生虫的分类和生态学研究 19.2 跳虫和白蚁的分类、行为及生态学 19.3 鱼类的人工催产及胚胎发育观察 19.4 淡水浮游动物的类群与水生态学 19.5 水生动物种群生态与物种多样性研究 19.6 特种经济动物的生物学与驯化养殖
实验1 动物细胞、组织及胚胎发育观察
一、实验目的
1、熟悉动物细胞平铺临时装片的一般制作方法；
2、掌握动物细胞基本结构及有丝分裂各期的特点，以及四类基本组织的结构和功能； 3、了解多细胞动物早期发育的一般过程，从而加深对多细胞动物起源的理解。 二、实验内容
1、人口腔上皮细胞临时装片的制作与观察;
2、动物四类基本组织装片标本观察,包括蝗虫横纹肌的制作与观察; 3、马蛔虫受精卵有丝分裂装片观察;
4、海星或蛙早期胚胎发育各个时期的装片标本观察. 三、实验材料
马蛔虫受精卵有丝分裂玻片标本，蝗虫浸制标本，动物四类基本组织玻片标本，海胆、文昌鱼或蛙早期胚胎发育的玻片标本。 四、实验用品
数码显微互动教学系统、普通光学显微镜，解剖剪、解剖针、小镊子、大头针、载玻片、盖玻片、滴管、无菌牙签、碘酊、0.9%生理盐水、0.1%亚甲基蓝、0.1mol/L碘液、0.02%詹纳斯绿B染液、蒸馏水、吸水纸等。 五、实验方法
（一） 人体口腔上皮细胞临时装片的制备与观察
1、 滴一滴0.9%生理盐水于洁净的载玻片中央，用无菌牙签粗的一头在口腔颊部轻轻的刮两下，将其放入载玻片中央的液滴中涂抹几下，使白色粘性物质分散均匀；用镊子夹住一块洁净的盖玻片的一边，使另一边与载玻片上的液滴边缘接触，然后缓慢放下，以防产生气泡，用吸水纸从盖玻片边缘吸去多余的液体。
2、 置低倍镜下寻找轮廓较清楚的单个细胞并移至视野中央，再转高倍镜观察。可见口腔黏膜上皮细胞呈扁平多边形或扁圆形，仔细辨认细胞核、细胞质和细胞膜等基本结构。观察时，光线应暗些。★为什么？
3、 如细胞结构观察不够清楚，可在盖玻片一侧滴一滴0.1mol/L碘液（也可采用0.1%亚甲基蓝或0.1%中性红染液），在盖玻片另一侧用吸水纸吸引，使碘液通过细胞进行染色，再置显微镜下观察，细胞质染成浅黄色，而细胞核染成深黄色。
4、 口腔黏膜细胞活体染色显示线粒体 将从口腔黏膜刮下的白色粘性物薄而均匀地涂在载玻片上，加一滴0.02%詹纳斯绿B染液，染色20 min，盖上盖玻片，置显微镜下观察，高倍镜下可见细胞质无色，在细胞质中散布一些蓝绿色短杆状和圆形颗粒，即为线粒体。★如果整个细胞全为蓝色，说明什么？
（二）马蛔虫受精卵有丝分裂玻片标本的观察
用低倍镜找到马蛔虫(Ascaris megalocephala)子宫横切面——多为圆形或椭圆形，内有圆形
的受精卵。在低倍镜下观察细胞，找到前期、中期、后期和末期的有丝分裂图像，再分别用高倍镜观察，辨认染色体、中心粒及纺锤体。★注意分裂各时期的特点。
（三）动物四类基本组织玻片标本的制片与观察 1、上皮组织
（1）单层扁平上皮（蛙肠系膜整装片）
将玻片置显微镜下，观察肠系膜的间皮细胞和肠系膜内毛细血管的内皮细胞。它们均为单层扁平上皮（图1—1）。
先在低倍镜下选择标本最薄的部分观察，可见黄色或淡黄色的背景上显现出黑棕色或黑色的波形线，这是细胞之间的边界。高倍镜观察，可以看到细胞为多边形，细胞边缘呈锯齿状，相邻细胞彼此相嵌。细胞核扁圆形，无色或淡黄，位于细胞中央。
（2）单层立方上皮（兔甲状腺切片） 低倍镜观察，可看到许多大小不等的、圆形或椭圆形的红色甲状腺滤泡。
高倍镜观察，滤泡壁由1层立方体形上皮细胞构成，核圆形、蓝紫色，位于细胞中央，细胞质粉红色。
（3）单层柱状上皮（猫小肠横切片）
低倍镜观察，可见粘膜面形成许多指状突起，突向管腔，突起表面覆有1层柱状上皮。 高倍镜观察，可见上皮细胞为柱状，核长椭圆形、蓝紫色，靠近细胞的基底部。把虹彩光圈缩小，减少光量，可见细胞的游离面有1层较亮的粉红色膜状结构，称为纹状缘。在柱状细胞之间散有杯状细胞，此细胞上端膨大、下端细小，核呈三角形或半圆形，位于细胞基底部。在杯状细胞上端的细胞质内积有大量不着色的粘液，在切片上呈卵形空泡状结构，细胞尖端无纹状缘。
（4）假复层纤毛柱状上皮（兔气管横切片）
高倍镜观察，可见气管内表面的细胞排列紧密，彼此挤压，细胞形状很不规则。细胞一端都与基膜相连，但另一端，有的细胞达上皮游离面，有的未达游离面，细胞核位置高低不等，以致整个上皮似复层细胞组织。注意观察锥形细胞、梭形细胞、具纤毛的柱状细胞以及杯状细胞的排列位置。
（5）变移上皮（兔膀胱收缩时和充盈时切片）
高倍镜观察，可见收缩状态的膀胱上皮有多层细胞，表层细胞较大，呈宽立方体形，游离面呈弧形，靠游离面的细胞质着色深，核大，卵圆形，有的细胞可看到双核。中间几层为多角形或倒梨形细胞。基部细胞小，呈矮柱状，排列较密。
膨胀状态的膀胱上皮变薄，细胞层次减少，有时只有2层，细胞呈扁平或梭形。 2、肌肉组织（图1—2）
（1）蝗虫骨骼肌装片的制作与观察： 用尖头镊子取蝗虫浸制标本胸部的一小束肌肉，置于
图1-1 单层扁平上皮（自黄诗笺）
载玻片上的水滴中，用解剖针仔细分离肌纤维（越细越好），用0.1%亚甲基蓝染色，加盖玻片后，置显微镜下观察。
先用低倍镜观察，可见骨骼肌为长条形肌纤维，在肌纤维间有染色较淡的结缔组织。在高倍镜下，单个骨骼肌纤维呈长圆柱形，其表面有肌膜，肌膜内侧有许多染成蓝紫色
的卵圆形的细胞核。缩小光圈，使视野不致过亮，可见到每条肌纤维内有很多纵行的细丝状肌原纤维。肌原纤维上有明暗相间的横纹，即明带（I带）和暗带（A带）。★为什么？ （2）骨骼肌（猫骨骼肌横切片） 先低倍、后高倍镜观察；肌纤维呈多边形或不规则圆形，外有肌膜，细胞核卵圆形，紧贴肌膜内侧；肌原纤维呈小红点状，在肌浆内排列不均匀，所以在横切面上呈现小区。 （3）心肌（狗心肌切片） 高倍镜观察，在纵切面上，心肌纤维彼此以分支相连，核卵圆形，位于心肌纤维中央。把虹彩光圈缩小，光线放暗一些，可看到心肌纤维的横纹，但不及骨骼肌的明显。在心肌纤维及其分支上，可见到染色较深的梯形横线，即闰盘。在横切面上，由于切片的关系，有的有核，有的无核。 （4）平滑肌（蛙的平滑肌分离装片，猫的小肠横切片）
高倍镜观察蛙的平滑肌分离装片，可见分离的平滑肌纤维呈长梭形，核长椭圆形，位于细胞中部，在常规染色标本上肌原纤维看不清楚。
高倍镜观察猫的小肠横切片，可见小肠壁平滑肌横切面呈大小不等、不规则的红色圆点，有的中央有染成蓝紫色圆形的核，有的见不到核。 3、结缔组织
（1）血液组织（人血涂片标本，瑞氏染色）（图1－3）
①红细胞：数量最多，小而圆，无细胞核，其中央部分着色较周围淡，★原因何在？ ②白细胞：慢慢移动标本，观察各种白细胞，白细胞数量比红细胞少，但胞体大，细胞核明显，极易与红细胞区别开。
嗜中性粒细胞：数量较多，约占白细胞总数的50%—70%。胞质淡红色，并充满细小、分布均匀的淡紫红色颗粒。核紫色，通常分为2—5叶，叶间有细丝相连。如核呈杆状，则为嗜中性粒细胞的幼稚型。
嗜酸性粒细胞：数量较少，约占7%以下。较中性粒细胞略大，胞质中充满桔红色的大小一致的粗大、圆形颗粒。核紫色，通常分为2叶。
淋巴细胞：数量较多，约占20%－40%，可见中、小型淋巴细胞。小淋巴细胞一般略大于红细胞，核球形，占细胞体积的大部分，染成深蓝紫色；胞质极少，只有一薄层，围在核的周
图1-2 骨骼肌纵（A）、横切面（B）（自黄诗笺）
A. 蝗虫骨骼肌纵切面； B. 猫骨骼肌横切面