围,染成淡蓝色;中淋巴细胞比红细胞小,胞质较小淋巴细胞的稍多,着色较浅,核圆形或卵圆形,位于细胞中部,也染成深蓝紫色。
图1–3 人的各种血细胞(自黄诗笺)
嗜碱性粒细胞:数量极少,约占1%以下,在一般血涂片上不易找到。细胞体积比上述2种白细胞稍小,胞质中分散着许多大小不等的深紫蓝色颗粒。核形状不定,圆形或分叶,也染成紫色,但染色略浅,一般都被颗粒遮盖,形状不清。
单核细胞:数量少,约占2%-8%,是血液有形成分中最大的细胞。胞质淡灰蓝色,核多呈肾形或马蹄形,常在细胞的一侧,着色比淋巴细胞核浅。
③血小板:为形状不规则的细胞小体,其周围部分为浅蓝色,中央有细小的紫色颗粒,常聚集成群,分布于红细胞之间。高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒,在油镜下才能看到颗粒周围的浅蓝色胞质部分。
对比观察兔、大鼠和鸡的血涂片。★注意观察其粒细胞的特点与人的有何不同? 兔的嗜中性粒细胞的胞质颗粒被曙红染成红色。大鼠的嗜酸性粒细胞核呈环状。鸡的红细胞椭圆形,具核。凝血细胞(代替血小板功能)椭圆形,有核,胞质淡蓝色。嗜中性粒细胞(又称假嗜酸性粒细胞)的颗粒呈梭形,染色较红。 (2)脂肪组织(猫气管横切片)
低倍镜观察,在气管最外面一层的疏松结缔组织中可看到密集成群的圆形或多角形的空泡,即脂肪细胞(胞质内的脂肪滴在制片过程中被酒精及二甲苯溶解)。在成群脂肪细胞之间有疏松结缔组织分隔。
高倍镜观察,可见核为扁圆形或半月形,偏于细胞的一侧。 (3)疏松结缔组织(小白鼠皮下疏松结缔组织铺片)(图1–4)
先低倍、后高倍镜观察。由2种纤维(胶原纤维和弹性纤维)、4种细胞(成纤维细胞、巨噬细胞、肥大细胞和浆细胞)组成。 (4)致密结缔组织(猫的尾腱纵切片)
高倍镜观察,可见胶原纤维束粗而直,彼此平行排列。腱细胞在纤维束间排列成单行,切面上呈长梭形,核椭圆形或杆状,蓝紫色,2个邻近细胞的核常常靠近,细胞质不易显示。
图1–4 疏松结缔组织(自黄诗笺)
(5)网状组织(猫淋巴结纵切片)
高倍镜观察,网状纤维呈黑色,粗细不等,分支交织成网,网状细胞为星状有突起的细胞,相邻细胞以突起相连成网状。 4、神经组织
(1)脊髓(兔脊髓横切片)
肉眼观察: 脊髓横切片中央为蝴蝶状的灰质,其中心有一孔为中央管,灰质较狭的一端为后角,较宽的为前角;包围在灰质周围染色较淡的部分是白质。
低倍镜观察: 将玻片置显微镜下,脊髓灰质前角移至视野中央,观察神经元。在前角内有许多较大的多突起细胞即脊髓前角运动神经元,为多极神经元。神经元胞体上的突起包括树突和轴突,但不易区分,一般可根据轴突基部的轴丘处染色较浅(无尼氏体)来识别轴突。选择一个胞体较大、突起较多、核较清晰的神经元移至视野中央。
高倍镜观察 核大,呈囊泡状,居细胞中央,核内有染色较深的核仁。 (2)骨骼肌运动终板(兔肋间肌撕片装片)
低倍镜观察 可见骨骼肌平行排列成束,有的呈蓝紫色,有的呈紫红色。传出神经纤维染成黑色,形似树枝,分布到骨骼肌纤维上,当它们接近肌纤维时,其末端再行分支成爪形小球,附着于肌纤维表面。
高倍镜观察 神经纤维终末的爪状分支端膨大,在与肌纤维附着处形成椭圆形板状隆起,即为运动终板。
(五)海胆或文昌鱼早期胚胎装片标本的观察(图1—5)
观察处于不同平面的胚胎细胞时,宜在低倍镜下观察,并不时转动细准焦螺旋,切不可转动粗准焦螺旋。
(1)卵裂:单细胞期只有一个大细胞,有两种情况,一种是可看到大而清晰的细胞核,这是
未受精卵;另一种则看不到细胞核,这是受精后待分裂的卵。受精卵进行第一次分裂后,形成2个连在一起的较小的细胞,这是2细胞时期。再进行一次分裂则成为4细胞时期。第三次分裂就进入8细胞时期。但在显微镜下并非一下就能看清8个细胞。因为4细胞后,细胞排列不在同一平面上,所以必须及时转动细准焦螺旋才能看清。再进行分裂就进入16细胞时期、32细胞时期。
(2)囊胚:由一层细胞构成的空球状物。由于观察的是装片,所以细胞界线不明显。中央的空腔叫囊胚腔(或卵裂腔)。
(3)原肠胚:囊胚一端的细胞内陷,形成具有两层细胞的胚,称原肠胚。外面的细胞层叫外胚层,两胚层之间的空腔是原来的囊胚腔,★它是如何形成的?内胚层包围的腔是原肠腔。原肠腔和外界相通的小孔叫胚孔。
图1-5 文昌鱼的早期胚胎发育 (自Romer)
H~I. 原肠胚的剖面;J. 原肠胚后期外观 A~D. 卵裂期;E. 桑椹期;F~G. 囊胚及其剖面;
(六)动物的细胞、组织及多细胞动物早期胚胎发育的多媒体演示 1、动物细胞的电子显微照片及细胞分裂过程的多媒体演示 2、动物4类组织图片的多媒体演示
3、多细胞动物(文昌鱼和蛙)早期胚胎发育过程的多媒体演示
六、作业与思考
绘图作业:1. 人口腔黏膜上皮细胞结构图,并注明各部分名称; 2. 4类基本组织的其中一种组织结构图,并注明各部分名称。
思考题: 1. 细胞的基本结构及其机能怎样?细胞分裂各期有何特点? 2. 动物4类基本组织的结构特点与主要机能;
3. 根据实验观察,思考海胆原肠胚形成中胚层细胞的运动情况。
实验2 眼虫、变形虫和草履虫等的观察
一、实验目的
1、了解眼虫、变形虫和草履虫等原生动物的生活环境,知道到什么样的水域可采到这些动物。 2、了解眼虫、变形虫和草履虫等的食性和生活习性,从而懂得怎样去培养这些动物。 3、通过显微观察,掌握绿眼虫、变形虫、草履虫等动物运动方式和形态结构上的特点,草履虫的无性和有性繁殖方式,进一步了解鞭毛虫纲、肉足纲、纤毛纲的主要特征。 二、实验内容
1、绿眼虫、变形虫和草履虫等原生动物的采集、培养与观察; 2、草履虫的分裂生殖和接合生殖过程观察; 3、锥体虫和间日疟原虫玻片标本示范观察。 三、实验材料
稻草秆、小麦粒、玉米粉;绿眼虫、变形虫、草履虫等永久玻片标本。 四、实验用品
普通光学显微镜,体视显微镜,数码显微互动教学系统。
浮游生物采集网,玻璃培养缸;电炉、铝锅;广口瓶、三角瓶、锥形瓶、载玻片、盖玻片、凹玻片、培养皿、吸管、解剖针、小镊子、吸水纸、棉花、牙签;pH试纸、洋红粉末、琼脂、蓝黑墨水、5%冰醋酸、1%醋酸、1%氯化钠母液、蒸馏水、1%碘液。 五、实验方法
(一)眼虫、变形虫、草履虫等原生动物的采集与培养
这部分内容实行开放式实验,成立学生动物学科技小组,在本次实验前1—2周内,让学生利用课外时间进行户外采集,带回实验室放到玻璃缸内进行培养。 1、眼虫(Euglena)
①采集: 在不流动的、腐殖质较多或排有生活污水的小河沟、池塘或临时积有污水的水坑中,尤其是带有臭味、发绿色的水中常可采到绿眼虫(Euglena viridis)。眼虫大量繁殖时,水呈绿色。
②培养: 将富含腐殖质的泥土少许,置于三角瓶中,加水至瓶容积的2/3处,以棉花轻轻塞住瓶口,煮沸15 min,室温放置24h。由于多数情况下采到的水样混杂有其他动物,因此接种时,应在解剖镜下用微吸管将眼虫吸出,反复多次。再将眼虫接种到三角瓶中,置于向光处(避免阳光直射)纯培养,一周后眼虫大量繁殖。 2、变形虫(Amoeba)
①采集: 变形虫常常生活在较为洁净、缓流的小河或静水的池塘中,通常集中在水底泥渣烂叶中或水生植物水下部分的茎叶上,主要取食硅藻等藻类,也取食腐败的水生植物叶片等。采集时可捞取水底物质,用粗吸管吸取呈黄褐色的碎屑(硅藻较多),或水面上漂浮着的灰褐色似胶状物,或水生植物如荷叶下面的粘稠物,往往可以得到很多变形虫。还可在水边或潮湿处挖取带根的禾本科植物(不要去除根上的土)带回实验室。
②培养: 选用池塘水过滤、煮沸,放入数粒小麦粒,室温放置1—2d,使细菌繁殖起来。
接种变形虫时,将含有变形虫的池塘水滴加在载玻片上,并滴加水1滴,放置1—2min,使变形虫贴附于玻片上,倾斜玻片使水流掉,并用水缓缓冲洗玻片,尽量去除其他微小动物。将该玻片放入培养液,约两周后,可有大量的变形虫出现。亦可将根上带土的禾本科植物直接浸入培养液中培养。
3、草履虫(Paramecium)
①采集: 草履虫多生活在湖沼、池塘、水田以及城市生活用水的下水沟中,以细菌、藻类和其他腐败的有机物为食。在水底沉渣表面浮有灰白色絮状物、有机物质丰富的水中,有大量草履虫生活。采集方法是将广口瓶系上绳,沉入水底连同沉渣一块捞起。
②培养: 常用1%稻草水培养草履虫。将1g稻草秆切成小段放入锥形瓶中,加水100mL,瓶口塞上棉花,煮沸30min,放盆24h。接种草履虫(方法同于眼虫).1周左右可见瓶中有大量的草履虫。可在培养液中加少量玉米粉等物,促进草履虫的繁殖。 (三)眼虫、变形虫、草履虫等原生动物标本的观察 1、眼虫的观察
先观察含有绿眼虫的水体颜色,★水体呈现何种颜色?这种颜色在水中是均匀分布还是集中在某一区域,这与光线照射方向有何关系? 然后,用滴管吸取颜色较深部位水样,滴一滴在载玻片中央,盖上盖玻片后,放在显微镜下观察。先用低倍镜观察,注意滴的水样应尽量少些,使眼虫活动减慢,便于观察。 眼虫的鞭毛不经染色也可看到,但需将光线调暗一些,仔细观察,常可见到鞭毛摆动。
(1)绿眼虫的形态结构(图2—1)
体形:前端钝圆,后端尖,整个身体略呈梭形。
图2- 1 眼虫(自刘凌云等)