上海交大网络课程检验微生物讲义23

2019-03-16 19:32

第30章 出血热病毒 一、教学大纲要求

(1)汉坦病毒的病毒特点、流行环节和微生物检测。 (2)新疆出血热病毒的病毒特点和流行环节。

二、教材内容精要

(一)汉坦病毒

1.汉坦病毒又称为肾综合征出血热病毒,是流行性出血热的病原体,根据其抗原性及基因结构的区别可分为6个型。汉坦病毒呈圆球形、卵圆形或长形,双层包膜,核酸为单负链RNA,有大(L)、中(M)、小(S)三个片段。该病毒常用的培养细胞是人肺传代细胞(A549)、 非洲绿猴肾细胞(Vero-E6)、人胚肺二倍体细胞以及及地鼠肾细胞,但增殖速度较慢,一般不引起明显的细胞病变效应。

2.汉坦病毒的传播与鼠类的分布和活动有关。动物宿主通过尿、粪等排泄物和唾液等分泌物及其气溶胶而传播,人或动物经皮肤伤口、呼吸道和消化道感染。部分型别的汉坦病毒感染后引起肾综合征出血热,,另有部分型别的汉坦病毒感染后引起汉坦病毒肺综合征。人类感染后,IgM抗体于发热第2天就可测出,7~10d达高峰;IgG抗体在3~4d检出,10~14d达高峰,持续多年。病后获持久免疫力。

3.病毒微生物学检查包括:1)病毒分离与抗原检查。采集病人血液及尸体标本,或采集疫区鼠肺标本,通常接种于Vero-E6、人胚肺二倍体细胞或人肺传代细胞系(A549)中培养,用免疫荧光法、免疫酶染色法或直接电镜检测。2)免疫荧光测定。用来检测汉坦病毒抗原和抗体,在我国是检测动物组织标本中抗原的最常用方法。3)ELISA。是汉坦病毒诊断中最常用的血清学方法,既可检测抗原又可检测抗体。4)套式PCR。检测感染早期血标本。此外,核酸杂交、Western blot、放免沉淀、空斑减少中和试验等常用于汉坦病毒的研究工作。

(二)新疆出血热病毒

1.新疆出血热病毒呈球形,直径90~120 nm,单正链RNA,二十面体立体对称衣壳,有包膜,表面有血凝素。

2.新疆出血热主要分布在有硬蜱活动的荒漠和牧场,宿主是子午砂鼠、塔里木鼠、长耳跳鼠等野生啮齿动物和牛、羊、马、骆驼等家畜,亚洲璃眼蜱是传播媒介、也是储存宿主。感染有明显的季节性,每年4~5月为流行高峰。人被带毒硬蜱叮咬感染后,有发热、全身疼痛、出血和中毒症状。病后免疫力牢固。病后6d血清中可出现中和抗体,14d达高峰,并可维持5年以上;补体结合抗体至第2周才出现,且上升缓慢,滴度也低。

3.通常用ELISA、免疫荧光法检测中和抗体、补体结合抗体及血凝抑制抗体等。乳鼠对此病毒高度易感,可用于病毒分离和传代。


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