新作成感染颗粒，从感染颗粒被吸附到它在细胞内再度出现之间这段期间称为隐蔽期。 干扰缺损病毒：病毒在感染时产生的亚基因组缺失突变体，它因失去病毒复制必需片段，不能单独进行复制，必须在同型的完全病毒的辅助下，由完全病毒提供其复制必需的基因功能才能完成复制。因为干扰缺损病毒的复制也需要和辅助它的完全病毒争夺细胞内有限的资源，因此它可以使完全病毒产量降低，干扰其复制，故称为干扰缺损病毒。
卫星病毒：是一类基因组缺损、需要依赖辅助病毒，基因才能复制和表达，才能完成增殖的亚病毒，不单独存在，常伴随着其他病毒一起出现。
假病毒体：具有病毒的形体，也有一定的侵染性，但是并不是生物学意义上的病毒，因为其不能在细胞内像其它病毒一样增殖，即为假病毒体。在病毒感染过程中，由于宿主细胞核酸完全取代了病毒基因组核酸的一类病毒，则称为假病毒体。
条件缺损病毒：一类基因组发生突变的条件致死突变体，在允许条件下能够正常繁殖，在限制条件下导致流产感染，也能干扰野生型病毒复制。 允许细胞：允许细胞是指病毒能在其内完成复制循环的细胞，这种细胞允许病毒基因组进入，甚至嵌入染色体，并在其中复制，能够产生完整的子代病毒。 非允许细胞：病毒在其内不能完成复制循环，不能顺利产生完整的子代病毒的细胞称为非允许细胞。
19.病毒释放的机制有哪几种？ 裂解细胞： (most non-enveloped viruses), 宿主细胞完全破裂，病毒出来（噬菌体）---嗜菌斑 细胞空斑
出芽：(Enveloped viruses）---病毒粒子释放时在细胞膜胞质侧向外顶出形成芽状（细胞膜包裹着病毒粒子），离开细胞时就可以 获得相应的囊膜，
运输泡: 病毒在释放前先进入一个胞外运输泡（intracellular vesicle ），再通过细胞运输泡系统运出到胞外。 20.病毒获得包膜的过程
在核内包装，穿过核膜时的出芽（在核膜上获得包膜），在内质网上和高尔基体形成运输泡，还可能是从核膜上获得包膜又被溶解，经过高尔基体时获得包膜，被运输泡运出去 21.缺损病毒主要有几类 ，各有什么特点？ 缺损病毒的5种形式： ①干扰缺损病毒（DI病毒）：①基因组是存在缺失的，不同的DI病毒缺损的大小数量是不同的，有的达到90%，但无论缺损多少，都必需保留有：a.为病毒复制起始化的序列；b.病毒壳体化序列。 ②可以干扰同源的标准病毒的复制，DI病毒和标准病毒为了复制竞争相同的基因功能产物而发生选择性的复制过程，且这种情况下，DI病毒一般处于优势，因为DI病毒含有较小的基因组，对核酸酶的亲和力较大，从而使标准病毒复制数量大大降低。③必须依赖同源病毒才能进行复制。④具有与标准病毒相同的形态特征，结构蛋白与抗原性。 ②整合的病毒基因组：基于某些温和性病毒（某些噬菌体、肿瘤病毒）感染宿主细胞后，其部分或整个病毒基因组整合于宿主细胞的基因组中，并且能够随细胞基因组而同步复制，遗传给子代细胞，只有在某些条件下（自发/诱导），病毒基因组脱离细胞基因组，转向合成完整的病毒粒子。
③卫星病毒：特征是具有极端寄生性，寄生于与之无关的辅助病毒上，基因产物的病毒与DI颗粒有相似性：它也是缺损病毒，必须依赖于辅助病毒才能进行复制，并且能够干扰辅助病毒的复制；但与DI颗粒也有不同：卫星病毒并不是来源于辅助病毒的亚基因组突变体，它是在自然界中存在的一类病毒，于辅助病毒的DNA/RNA毫无关系。
④条件缺损病毒：一类基因组发生突变的条件致死突变体，在一定条件下可以增殖，在另一条件下导致病毒的死亡。处于流产感染状态的病毒，可以通过一定办法，使它们完成增殖性
感染，从而产生子代病毒粒子。 ⑤假病毒体
第五章补充复习题
22.流感病毒的结构及各部分功能。 23.名次解释：
抗原漂移：指由基因组发生突变导致抗原的小幅度变异，不产生新的亚型，属于量变，没有质的变化。多引起流感的中小型流行。
抗原转换：是指由于病毒基因组发生重排而引起的病毒抗原发生质的变化，产生的新亚型，往往引起世界范围的传染病流行。
复感染复活：用紫外线灭活的两株同种病毒，若一同培养后，常可使灭活的病毒复活，产生出感染性病毒体，称为复感染复活 交叉复活：一株活性病毒与另一株具有不同遗传标记的灭活病毒复合感染细胞，由于重组产生具有灭活病毒某些遗传标记的活性病毒体，这类病毒复活现象称为交叉复活
表型混杂：两种病毒混合感染后，一个病毒的基因组偶尔装入另一病毒的衣壳内，或装入两个病毒成分构成的衣壳内，发生表型混合。这种混合是不稳定的，传代后可恢复其原来的特性。（转壳现象，混合壳体，嵌合包膜）
互补现象：指两种病毒通过其产生的蛋白质产物（如酶、衣壳或囊膜）相互间补助不足。如辅助病毒与缺损病毒间、两个缺损病毒间、活病毒与死病毒间都可以互补，互补后仍产生原来病毒的子代
干扰现象：同源干扰（homologous interference）发生在细胞中，仅在同源病毒或亲缘关系密切的病毒之间发生。（缺陷干扰病毒DI）
条件致死突变体：指病毒突变后在特定条件下能生长，而在原来条件下不能繁殖而被致死。其中最主要的是：温度敏感条件致死突变株（Temperature-sensitive conditional lethalmutant），简称温度敏感突变株（ts株） 基因重组：当两种或多种有亲缘关系的不同病毒感染同一宿主细胞时，它们的遗传物质发生交换，结果产生不同于亲代的可遗传的子代，称为基因重组
第六章复习题
24.病毒感染成功的基本条件
（1）病毒感染性：致病性、毒力、病毒量 （2）感染途径：到达易感细胞 （3）宿主易感性： 细胞表面病毒受体 机体免疫状态
其他物理因子：体温；营养和年龄因素 25.病毒感染后细胞有哪些表型变化？
病毒对细胞的致病作用包括来自病毒的直接损伤和机体免疫病理应答两个方面。敏感的宿主细胞被病毒感染后，两者相互作用下可表现为：杀细胞性感染；稳定状态感染；细胞凋亡；包涵体的形成；细胞增殖和转化；病毒基因的整合。 （一）杀细胞性感染
病毒在宿主易感细胞内增殖造成细胞破坏与死亡，这种感染称杀细胞性感染。 病毒在细胞内增殖引起细胞变性、死亡裂解的作用称病毒的细胞病变效应（CPE）。机制：病毒的早期蛋白影响宿主细胞；病毒蛋白的毒性作用；引起细胞内溶酶体膜破裂；细胞膜受体破坏引起细胞免疫病理损伤；对细胞器造成损伤。 (二)稳定状态感染
一些不具有杀细胞效应的病毒（多为有包膜病毒）所引起的感染称稳定状态感染。病毒在感染宿主细胞的过程中，对细胞代谢、溶酶体膜影响不很大。成熟的病毒多以出芽方式释放出来，其过程缓慢、病变轻微，细胞暂时还不会出现裂解和死亡，但可发生宿主细胞膜受体被破坏、细胞膜成分发生变化，出现细胞融合及细胞表面产生新的抗原等。 1.细胞融合：感染与未感染的细胞融合，可以使病毒从感染的细胞直接进入相邻的正常细胞，有利于病毒在细胞间的扩散。 2.细胞膜出现新抗原：病毒在细胞内增殖过程中，将病毒基因编码的蛋白质插入细胞膜表面，导致细胞膜表面抗原的改变。有利于进行病毒感染的诊断。
（三）细胞凋亡.细胞凋亡（cell apoptosis）是由细胞基因自身指令发生的一种生物学过程。实验研究证实有些病毒（腺病毒、人免疫缺陷病毒等）增殖可直接诱导细胞凋亡，也可通过病毒基因组编码的蛋白质间接作用下诱发细胞凋亡。 （四）包涵体的形成
某些受病毒感染的细胞内，用普通光学显微镜可看到有与正常细胞结构和着色不同的圆形或椭圆形斑块，称为包涵体。因病毒种类不同，包涵体有位于胞浆内的(痘病毒)，也有在细胞核内的(疱疹病毒)；或者两者都有(麻疹病毒)；有嗜酸性的或嗜碱性的。 包涵体的本质：①有些病毒的包涵体就是病毒颗粒的聚集体；②有些是病毒增殖留下的痕迹；③病毒感染引起的细胞反应物。故可作为诊断依据和鉴定病毒的参考。 （五）细胞转化增生和病毒基因组的整合
某些DNA病毒的全部或部分核酸，或RNA病毒基因组经逆转录后产生的DNA，结合至细胞染色体中，称为整合。整合作用可使细胞遗传性状发生改变，即转化（transformation）。转化的细胞生长、分裂失控，细胞可发生恶变。 26.病毒的致病机理
病毒感染细胞的分子机制：
1.与细胞膜的相互作用：吸附蛋白；受体蛋白；环境因子
2.与细胞转录的相互作用：抑制细胞转录；提高病毒转录效率：转录活化子、增强子；利用宿主酶加工病毒mRNA
３.与翻译系统的相互作用：抑制宿主翻译；降解宿主mRNA；竞争宿主翻译系统； 改变宿主翻译系统的特异性
４.与细胞DNA复制的相互作用：降解细胞ＤＮＡ、改变正常复制位点、抑制细胞ＤＮＡ合成并为病毒ＤＮＡ提供原料 27.中和性抗体的作用机理
中和抗体指与病毒结合后能消除病毒感染能力的抗体。中和抗体在杀灭细胞外的游离病毒起主要作用。
作用机理：中和性抗体是针对病毒表面抗原的抗体。它与病毒表面的抗原决定簇结合，使病毒失去吸附和穿入的能力，但不能直接灭活病毒，更不能对已进入细胞内的病毒发挥作用。中和性抗体的抗病毒作用，主要是预防感染的发生及蔓延。 28.MHC-1和MHC-2分子呈递抗原的过程。 （1）MHC-1总过程简述：
a）部分折叠的MHCI类分子α链在与β2m结合之前与Calnexin结合
b)MHCIα/β2m复合物与Calnexin解离，结合分子伴侣复合物，通过tapasin结合TAP； c)胞浆内的蛋白被蛋白酶体降解为肽片段；
d)TAP转运抗原肽入内质网，抗原肽结合MHCI类分子，并使MHCI稳定折叠，稳定的抗原肽/MHCI复合物被转运表达与细胞膜； （2）MHC-2总过程简述：
a）抗原提呈细胞将细胞外蛋白抗原摄入内吞泡中； b)在内体和溶酶体中加工摄取的蛋白抗原； c)MHCII类分子的生物合成及转运至内体；
d)加工后的抗原肽与MHCII类分子在内质体腔中结合； e)在细胞表面表达抗原肽-MHC分子复合物； 29.病毒逃避宿主免疫反映的策略
1、干扰正常细胞调亡：如腺病毒、疱疹病毒、痘病毒
2、干扰IFN所诱导的蛋白酶：该酶可抑制感病细胞中蛋白质的合成 3、干扰MHC的递呈作用：如HSV-1、EBV 4、直接杀死T淋巴细胞：如HIV
5、改变抗原决定簇结构：如流感病毒的抗原漂移与抗原转换 6、长期潜伏，等待时机：如疱疹病毒
7、隐蔽毒粒，免受袭击：如疱疹病毒能合成Fc受体于外膜，巨细胞病毒外膜的B2-微球蛋白
8、伪装毒粒，搅乱寄主：如麻疹病毒和CMV毒粒可模拟寄主蛋白的抗原决定簇 30.干扰素的作用及抗病毒机制。
1.由病毒或其他IFN诱生剂诱使人或动物细胞产生的一类糖蛋白。它作用于机体细胞可表现出抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等多方面的生物活性。干扰素的抗病毒作用无特异性。 2.干扰素抗病毒机理
干扰素不能直接灭活病毒，而是通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（AVP）发挥效应。 干扰素首先作用于细胞的干扰素受体，经信号转导等一系列生理过程，激活细胞基因表达多种抗病毒蛋白，降解病毒mRNA、抑制病毒多肽链的合成，使病毒复制终止，实现对病毒的抑制作用。
第十章复习题
31.昆虫病毒的一般特性
（1）宿主特异高 能杀灭害虫，而不影响害虫的天敌，引起主要害虫的再猖獗与次要害虫上升等可能性较小；
（2）不会污染环境，对人畜安全 昆虫病毒是自然界本来存在的，特别杆状病毒（核型多角体病毒与颗粒体病毒）对河虾、牡蛎、蚌、蟹没有致病性，对两栖类、鱼类、鸟类及哺乳动物也无任何中毒性、致病性或异常变态反应；
（3）后效作用明显 不仅病虫本身就是病毒生产的“小工厂”，而且有些情况下，病毒还可经卵传染，杀灭次代害虫，化学农药无此特点。 （4）生产容易、使用方便、成本低廉、适于推广 32.杆状病毒的双相复制周期
产生两种具有不同形态、不同功能的病毒粒子。
包涵体来源型病毒（occlusion derived virus，ODV） 出芽型病毒（budded virus，BV） 两种表型病毒粒子具有相同的基因组，但产生于病毒感染周期的不同时期，在细胞中的部位不同，形态结构也存在差异。
病毒接种后的0-24 小时为第一时相。第一时相的结果是产生大量的BV，通过出芽释放，体内传播病毒。
第二时相（即产生包涵体的时相）：在感染病毒20h以后，BV的释放量明显减少，在细胞核内出现很多新形成的膜，核衣壳与这些膜相连并被紧密包裹在这些囊膜中，形成成熟的病毒粒子——ODV。病毒编码并在复制的最后期大量合成的包涵体蛋白围绕着ODV 成熟粒子逐渐
沉积，浓缩，结晶，最终形成包涵体。 33.昆虫重组杆状载体的构建方法
将极晚期基因( 如多角体基因及其边界区) 克隆入细菌的质粒中 消除其编码区和不合适的酶切位点 保留其5c端对高效表达必需的调控区
在下游引入合适的酶切位点供外源基因的插入，即得到转移载体。 将要表达的外源基因插入其启动子下游 与野生型AcNPV DNA 共转染昆虫细胞
通过两侧同源边界区在体内发生同源重组，使多角体蛋白基因被外源基因取代。 34.质型多角体病毒的致病机理
寄生在寄主细胞质中，包含体内含有多个球状病毒粒子。 1、感染、侵入：
CPV病主要以食下传染为主，经碱性消化液作用，使多角体溶解释放出病毒粒子，通过围食膜的CPV侵入中肠上皮细胞。 2、复制：在细胞质中复制
3、增殖：CPV增殖情况与NPV基本相同，也可分为隐潜期、缓慢增殖期、高速增殖期及稳定增殖期。
35.昆虫病毒杀虫剂的优缺点 优点：
首先，病毒农药的最大特点是病毒来源于昆虫，对人类和环境没有任何伤害，以虫养毒，以毒杀虫。其次， 昆虫也不易产生抗药性，同时采用病毒和化学农药以及其他生物农药复配的品种即降低了化学农药和其他生物农药的使用量，可以延缓或者消除昆虫对化学农药和其他生物农药的抗性，同时可以延长杀虫的持续时间，克服了一种病毒农药只对一种标靶起作用的弊端。最后，病毒通过死虫的体液、粪便继续传染其它健康害虫和下一代害虫，形成“虫瘟” ，从而能够较长时间控制作物上的虫害，并能有效地控制害虫的种群数量，达到了标本兼治的目的。 局限性：
任何事物都是一分为二的,虽然病毒杀虫剂具有感染力强、 专一性强、抗逆性强等无可比拟的优点,但还是存在着田间不稳定、 持效性差等问题。昆虫病毒对于干燥、 阳光或紫外线非常敏感,如,病毒多角体在紫外光或日光下易失活。近年来已将一定浓度的一些品种的荧光增白剂添加到昆虫病毒杀虫剂中作为它的保护剂和增效剂,这样一来,能提高昆虫病毒防紫外线的能力,能加快病毒致死害虫的速度,扩大昆虫病毒的宿主域,改变病毒感染昆虫的途径,提升昆虫病毒的杀虫能力。
第十二章复习题
1、病毒分离和培养的方法及各方法优缺点。 细胞培养：(1)原代和次代细胞培养
特点：①对多种病毒敏感②生长能力有限,获取成本高③可携带潜伏病毒 (2)二倍体细胞培养
体外分裂50～100代仍保持二倍体染色体数目，可用于病毒分离和疫苗生产。
特点：①对多种病毒敏感②不带异种蛋白(人源性)③不带病毒，无致瘤潜能④可传50代左右
(3) 传代细胞培养
特点：①对多种病毒敏感性高②繁殖能力高，传代时间长③有致癌危险，不能用于疫苗生产 鸡胚接种：优点：易管理，不带微生物，成本较低